国家自然科学基金(30270437)
- 作品数：28 被引量：93H指数：5
- 相关作者：孙善全汪克建黄思琴余维华贺桂琼更多>>
- 相关机构：重庆医科大学重庆医科大学附属第一医院怀化医学高等专科学校更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“春晖计划”重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 内毒素导致的脑损伤过程中脑红蛋白的表达上调
- 目的本课题通过复制内毒素休克大鼠模型和内毒素脑室注射脑损伤大鼠模型探讨内毒素所致脑损伤过程中大鼠脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)的表达变化及其意义,以期为内毒素性脑损伤修复机制的研究和临床干预性治疗提供实验依据...
- 刘超孙善全杨美陈海
- 关键词：脑红蛋白脑损伤
- 文献传递
- 内毒素性脑损伤过程中脑红蛋白的表达及意义
- 本课题通过复制内毒素休克大鼠模型和内毒素脑室注射脑损伤大鼠模型探讨内毒素所致脑损伤过程中大鼠脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)的表达变化及其意义,以期为内毒素性脑损伤修复机制的研究和临床干预性治疗提供实验依据。实...
- 刘超闵苏
- 关键词：脑红蛋白内毒素脂多糖
- 文献传递
- 内质网分子伴侣GRP78在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中的表达变化被引量：6
- 2007年
- 目的观察在大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCII)过程中内质网分子伴侣GRP78的表达变化,并探讨其意义。方法健康成年Wistar大鼠55只,随机分为两组:(1)脊髓压迫缺血再灌注组50只,每个时间点10只,采用自制压迫装置制备脊髓压迫缺血再灌注模型;(2)假手术对照组5只,只做全椎板切除不做脊髓压迫。用免疫组化、West-ernblot和TUNEL等方法,分别于缺血再灌注后30min、3、7、11和23h,检测压迫段脊髓组织中GRP78的表达变化及细胞凋亡情况。结果再灌注30min后,GRP78在压迫段脊髓开始表达上调,7h达峰值,11h表达回落,23h显著减少。TUNEL染色显示,神经细胞的凋亡指数随着再灌注时间的延长而升高。结论GRP78在脊髓缺血再灌注损伤中呈现时序性的表达变化,这可能是脊髓内源性保护机制之一。
- 黄柏南孙善全汪克建李红岩杨美
- 关键词：再灌注损伤脊髓损伤
- 半胱氨酸蛋白酶-12表达与细胞色素C释放在脊髓压迫性损伤后少突胶质细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨半胱氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)表达与细胞色素C(cytochrome-C,Cyto-C)释放在脊髓压迫性损伤(compressed spinal cord injury,CSCI)后少突胶质细胞凋亡中的作用。方法:采用自行设计的方法制作脊髓压迫模型,通过原位细胞凋亡染色于压迫后1、3、7 d检测CSCI后少突胶质细胞凋亡;运用Western blot技术从分子水平分别检测与细胞凋亡有关的Caspase-12和Cyto-C的表达。结果:不同组别凋亡的少突胶质细胞数目不全相同(F=30.946,P=0.000),LSD-t法两两比较,1、3、7 d模型组凋亡的少突胶质细胞数目均高于正常组(P=0.000)。与对照组、1 d组、3 d组相比,7 d组凋亡的少突胶质细胞数目最多,组间比较,差异有统计学意义(P=0.000)。不同组别Caspase-12和Cyto-C蛋白表达不全相同(F分别等于1 402.646和326.638,P=0.000),LSD-t法两两比较,1、3、7 d模型组的Caspase-12和Cyto-C蛋白表达均高于正常组(P=0.000),与对照组、1 d组、3 d组相比,7 d组的Caspase-12和Cyto-C蛋白表达水平均最高,组间比较,差异有统计学意义(P=0.000)。结论:CSCI后出现了少突胶质细胞凋亡,其凋亡机制可能与Caspase-12表达增强及Cyto-C释放共同作用有关。
- 黄思琴漆伟孙善全汪克建陆蔚天卓飞伍修宇
- 关键词：脊髓压迫性损伤细胞色素C少突胶质细胞凋亡
- 脑红蛋白在内毒素休克大鼠模型中的表达变化被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨内毒素休克模型大鼠海马、脑脊液、血浆脑红蛋白(Ngb)的表达变化及其意义.方法:选用SD大鼠70只,随机分为7组(n=10):对照组,经尾静脉注入0.5mL生理盐水;内毒素干预3,6,12,24,48,72h不同时间点组,经大鼠尾静脉注射0.5mL革兰氏阴性菌胞壁脂多糖(LPS),0.016g/kg,制作内毒素休克模型.对照组注射生理盐水后6h、内毒素干预不同时间点各组分别注射LPS后,于3,6,12,24,48,72h收集血浆、脑脊液,并处死大鼠留取海马.应用酶联免疫吸附法、免疫印迹法、免疫组织化学法检测标本中Ngb含量;应用干燥法检测海马组织含水量.结果:注射内毒素后,大鼠海马、脑脊液、血浆中Ngb含量显著高于对照组(P<0.01),48h达峰值,分别为34.89,22.01,14.01mg/L.免疫印迹法结果显示,内毒素干预不同时间点各组表达Mr均为17×103Ngb蛋白,Ngb蛋白表达量也显著高于对照组.注射内毒素后大鼠脑海马组织含水量明显高于对照组(P<0.01),48h含水量达峰值为0.8313.结论:Ngb表达量的上调与大鼠脑损害严重程度成正相关,其过度表达是全身性的,与内毒素处理的时程密切相关,Ngb表达上调可能是在内毒素休克状态下机体的内源性神经保护机制之一.
- 刘超孙善全余剑波徐瑲陈海李红岩高宝兵
- 关键词：脑红蛋白内毒素休克脂多糖
- 内毒素性休克大鼠脑组织和血浆神经球蛋白水平的变化
- 2009年
- 目的评价内毒素性休克大鼠脑组织和血浆神经球蛋白（Ngb）水平的变化。方法健康清洁级SD大鼠70只，7周龄，雌雄不拘，体重250～300g，随机分为2组：对照组（C组，n=10）和内毒素性休克组（ES组，n=60）。ES组经尾静脉注射内毒素16mg／kg制备内毒素性休克模型，C组注射等容量生理盐水。ES组于注射内毒素后3,6、12、24、48和72h（T1-6）时取颈静脉血和脑脊液（CSF）标本，随后处死大鼠，取额叶皮质和海马组织，采用ELISA法和Western blot法测定血浆、CSF、额叶皮质和海马组织Ngb的表达水平，并计算脑水含量。结果与C组比较，ES组T2-6时血浆、CSF、海马和额叶皮质Ngb水平和脑水含量升高（P〈0．01）；与T2时比较，ES组T3-6时Ngb水平和脑水含量升高（P〈0．01）；与T5时比较，ES组T2～4时Ngb水平和脑水含量降低（P〈0．01），T6时差异无统计学意义（P〉0．05）；脑水含量与血浆、CSF、海马和额叶皮质Ngb水平呈正相关（r分别为0．631、0．719、0．707和0．706，P〈0．01）。结论大鼠内毒素性休克时机体Ngb水平上调，此变化可能是机体内源性保护机制之一。
- 刘超孙善全李红岩徐玱杨美董一山陈海
- 关键词：球蛋白类
- 吗啡依赖和戒断大鼠脊髓内NA能神经元变化的研究被引量：7
- 2005年
- 目的探讨慢性吗啡处理及戒断后大鼠脊髓内NA能神经元的形态变化。方法24只雄性SD大鼠随机分为吗啡依赖组、吗啡戒断组和生理盐水对照组,每组8只。依赖组大鼠以腹腔注射吗啡方法建立吗啡依赖模型。戒断组大鼠在依赖模型建立后于腹腔注射纳洛酮5mg/kg诱导戒断症状,对照组大鼠注射等量生理盐水。注射24h后取脑和脊髓作冰冻切片。利用免疫组化方法检测各组大鼠脊髓及LC内NA能神经元的变化。结果正常组LC内DBH阳性细胞数为(98±17),吗啡依赖组和戒断组LC内DBH阳性细胞数分别为(212±20)和(229±27),明显高于正常组(P<0.01),但平均灰度值无明显差异。慢性吗啡处理后脊髓前角DBH阳性神经元数量增多,染色加深,后角和侧角新增加大量阳性神经元,吗啡依赖组和戒断组DBH阳性神经元增加具有极显著意义(P<0.01)。结论慢性吗啡处理和戒断引起LC和脊髓内NA能神经元增多,提示NA与吗啡依赖和戒断的形成有关,其可能是吗啡依赖及戒断的分子机制之一。
- 贺桂琼孙善全余会平余维华汪克建梁益建
- 关键词：吗啡依赖吗啡戒断
- 电针对大鼠脊髓压迫性损伤后髓鞘再生的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察电针对大鼠脊髓压迫性损伤（CSCI）后DNA结合抑制物2（Id2）和髓鞘碱性蛋白（MBP）的表达变化，探讨髓鞘再生的机制。方法将54只SD大鼠分为对照组和治疗组，每组27只，再根据取材时间点的不同各分为3d、7d和14d三个亚组，每个亚组9只大鼠。治疗组采用自行设计的大鼠脊髓压通器制作脊髓压通性损伤模型，针刺脊髓损伤节段局部夹脊穴、双侧足三里和双侧太溪穴，并于双侧足三里和太溪穴进行电针刺激（连续波，输出频率为2Hz，电压1．5V，30min）。对照组只造模，不治疗。2组大鼠均于对应时间点取材，运用电镜观察脊髓损伤节段髓鞘的超微结构；采用免疫印迹技术和免疫荧光双标从分子水平检测Id2及MBP的表达变化。结果CSCI后，荧光双标结果显示，造模后第3天，对照组大鼠的Id2免疫阳性少突胶质细胞数目为（20±2）个／高倍镜视野，并在造模后第14天下降至（164-1）个／高倍镜视野，组内各时间点Id2免疫阳性少突胶质细胞数目比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。造模后第3天，治疗组大鼠Id2免疫阳性少突胶质细胞为（13±1）个／高倍镜视野，造模后第14天降至（7±1）个／高倍镜视野，组内各时间点ld2免疫阳性少突胶质细胞数目比较，差异有统计学意义（P〈0．05），并与同时间点的对照组比较，差异亦有统计学意义（P〈0．05）。Western结果显示，造模后第3天，对照组和治疗组Id2蛋白表达分别为（1．12±0．12）和（0．67±0．01），造模后第14天，对照组和治疗组Id2蛋白表达分别下降至（0．86±0．02）和（0．25±0．01），与组内造模后第3天比较，差异均有统计学意义（P〈0．05），2组相同时问点Id2蛋白表达组间比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。造模后第3天，对照组和治疗组的MBP蛋白表达分别为（0．44±0．02）和（0．67±O．0
- 黄思琴漆伟孙善全汪克建卓飞
- 关键词：脊髓压迫性损伤脱髓鞘病变髓鞘碱性蛋白
- 脑红蛋白在内毒素脑损伤大鼠模型中的表达变化
- 2009年
- 目的了解内毒素脑损伤大鼠额叶皮质、脑脊液（CSF）和血清中脑红蛋白（Ngb）的表达变化并分析其意义。方法选用SD大鼠70只，随机分为对照组10只和内毒素干预组60只。内毒索干预组大鼠于脑池内注射0．1mg／kgLPS，对照组注入等体积等渗盐水。内毒素干预组大鼠于注射后3、6、12、24、48、72h收集血清和CSF，并处死大鼠留取额叶皮质，每时相点10只大鼠。应用酶联免疫吸附测定（ELISA）法和蛋白质印迹法测定Ngb含量，干燥法测定额叶皮质含水量；并对各样本中Ngb含量与额叶皮质含水量行相关性分析。采用生物素．链霉亲和素一辣根过氧化物酶（SP）法检测Ngb在额叶皮质中的表达。对照组大鼠亦进行上述检测。结果ELISA结果显示，内毒素干预组大鼠注射后各时相点额叶皮质、CSF、血清中Ngb含量高于对照组，其中48h达峰值[分别为（35．4±3．9）、（22．7±3．1）、（14．4±2．8）ng／mL，P〈0．01]。蛋白质印迹法显示，各组均表达相对分子质量约为17×10^3的Ngb蛋白，Ngb表达变化与ELISA检测结果相似。注射后6～72h，内毒素干预组大鼠额叶皮质含水量明显高于对照组（P〈0．01），其中48h达峰值（83．3±1．9）％。内毒素干预组大鼠各时相点血清、CSF、额叶皮质Ngb含量与额叶皮质含水量4项指标两两比较，均呈正相关（γ为0．631～0．719，P〈0．01）。SP法显示，Ngb免疫反应阳性细胞主要位于神经元的细胞质。结论LPS所致脑损伤中Ngb表达的上调与LPS的注入时间相关。
- 刘超孙善全余剑波汪克建徐玱陈海李京
- 关键词：脂多糖类脑损伤脑红蛋白
- 大鼠椎管减压与细胞凋亡的相关性研究被引量：3
- 2010年
- 目的:观察在大鼠脊髓压迫性损伤后椎管减压与神经细胞凋亡的关系。方法:健康成年SD大鼠36只,随机分为两组:(1)椎管减压组30只,每组10只,采用自制压迫装置于L1水平制做椎管减压模型;(2)假手术组6只,只做全椎板切除不做脊髓压迫。用HE、Nissl、TUNEL、免疫组化和Western blot等方法,分别于脊髓压迫6、12h和24h后去除压迫装置,观察减压段脊髓组织病理变化、细胞凋亡与caspase-3的表达变化情况。结果:TUNEL(+)细胞数于6h减压时开始增高(9.62±3.54),24h减压时达峰值(26.09±4.11),与假手术组(3.38±1.04)相比具有显著性差异(P<0.05);各减压组间比较有显著性差异(P<0.05)。caspase-3免疫反应与TUNEL(+)细胞数量表达变化相符。结论:大鼠脊髓损伤后,神经细胞凋亡的改变与脊髓受压时间长度相关;早期进行椎管减压可减少继发性神经细胞凋亡,加快神经功能恢复。
- 李京孙善全朱淑娟刘辉张兴业高宝兵
- 关键词：脊髓损伤凋亡半胱氨酸蛋白酶3
