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胶质瘤中脑肿瘤干细胞的分离、培养和鉴定被引量：7: 2009年; 目的分离、培养和鉴定胶质瘤中脑肿瘤干细胞(BTSC),探讨CD133作为BTSC特异性标记,用于BTSC分离的可行性。方法9例胶质瘤临床标本,胶质瘤C6和U87细胞系,用直接培养和磁珠选择CD133+细胞二种方法分离BTSC。参照NSC培养条件,进行体外培养。观察细胞生长情况,利用免疫荧光染色检测细胞标记,包括Nestin,神经元特异性烯醇化酶(NSE),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)等;诱导细胞分化,验证该种细胞是否具有干细胞特性。结果9例临床标本中,有2例儿童恶性胶质瘤在培养过程中出现神经球,在成人胶质瘤中均未出现。C6和U87细胞中,均出现比较典型的神经球,二种分离方法结果相同。神经球细胞具有增殖能力,体外培养可以不断增大。标记检测显示这种细胞Nestin阳性,而NSE和GFAP阴性。经诱导后,可以分化为形态与来源细胞相似的细胞,能够表达NSE和GFAP等多种表型细胞标记。结论在胶质瘤中,存在具有NSC特性的干细胞,即BTSC。CD133是BTSC重要的表面标记,可以用于BTSC的分离。在胶质瘤细胞系中CD133+细胞是BTSC。; 王存祖赵鹏尤永平陆小明陈云祥傅震鲁艾林刘宁; 关键词：胶质瘤脑肿瘤干细胞 CD133

胶质瘤CD133阳性和阴性U87细胞蛋白质组学分析: 2012年; 目的通过对人脑胶质瘤U87细胞中CD133＋和CD133一细胞进行配对研究，寻找差异性蛋白。方法通过磁珠选择分离U87中CD133＋和CD133-细胞，利用双向凝胶电泳（2D—PAGE）检测上述细胞总体蛋白，分析差异性蛋白点。通过质谱（MALDI—TOF—MS）对蛋白点进行鉴定，建立两种细胞差异性蛋白文库。结果CD133＋和CD133一细胞配对比较，蛋白质组学检测结果中，差异有统计学意义（P〈0．05）的2D—PAGE蛋白点共有73个，〉1．5倍差异蛋白点有46个，〉2倍差异蛋白点有27个，〉3倍差异蛋白点有8个。在CD133＋U87细胞中，有10个蛋白表达增多（上调），63个蛋白表达下降（下调）。共得到44张高质量质谱肽质量指纹图谱（PMF），鉴定了35种蛋白质。结论CD133＋和CD133-细胞是同一细胞株中两种不同的细胞，蛋白方面存在的差异，将成为进一步研究它们相互关系的重要靶点。; 王存祖杨伟现赵鹏尤永平傅震欧阳琦许慧中; 关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞蛋白质组学 CD133

CD133阳性和阴性胶质瘤U87细胞基因组学分析: 2013年; 目的分析胶质瘤U87中的CD133阳性(CD133+)和阴性(CD133-)细胞,建立差异性基因文库。方法通过磁珠选择分离U87细胞中的CD133+和CD133-细胞,利用AgilentHuman 1Aoligo芯片检测2种细胞总体基因,分析结果,建立差异性基因文库。结果基因组学研究中,CD133+和CD133-U87细胞比较,差异性基因数为840个;其中,上调基因759个,下调基因81个。在各基因功能分组中,与翻译调控功能相关的基因,差异性基因所占比率最大,为14.9%;各功能组之间差异性基因比率均有统计学意义(P<0.01)。结论通过基因组学研究,建立了CD133+和CD133-U87细胞差异性基因文库,为进一步研究脑肿瘤干细胞提供了线索。; 王存祖陆晓峰赵鹏尤永平傅震欧阳琦向定朝徐敏; 关键词：胶质瘤基因组学

神经干细胞和脑肿瘤干细胞研究进展: 2007年; 神经干细胞（NSC）是中枢神经系统（CNS）内具有自我更新和多向分化潜能的干细胞，主要存在于脑室下区域（SVZ），NSC通过自我更新和分化维持正常CNS的形态和功能。可塑性（plasticity）是NSC的重要特征，由NSC所处的微环境（microenvironment）决定。脑肿瘤干细胞（BTSC）是脑肿瘤中与NSC相似的细胞，是脑肿瘤发生和生长的细胞来源。BTSC可能起源于NSC，是NSC可塑性的表现，导致NSC向BTSC分化的机制可能是微环境作用的结果。; 王存祖赵鹏尤永平傅震; 关键词：干细胞脑肿瘤神经系统

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江苏省自然科学基金(BK2005156)