全球变化研究国家重大科学研究计划(2013CB967404)
- 作品数：6 被引量：49H指数：4
- 相关作者：屈艺母得志李晋辉陈大鹏李德渊更多>>
- 相关机构：四川大学更多>>
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- 整合素β8在星形胶质细胞氧糖剥夺后对TGF-β1的活化影响被引量：5
- 2014年
- 目的探讨在氧糖剥夺(OGD)后,星形胶质细胞中整合素β8(β8)的表达对转化生长因子-β1(TGF-β1)活化的影响。方法体外培养星形胶质细胞,OGD模拟缺氧缺血。免疫细胞化学法检测β8蛋白在星形胶质细胞中的表达及分布,Western blot定量检测OGD处理后复氧12 h、1 d及2 d时β8蛋白表达的变化。建立星形胶质细胞与荧光素酶报道细胞(TMLC)共培养体系,利用RNA干扰技术抑制星形胶质细胞β8表达,观察β8对TGF-β1活化的影响。结果β8主要分布于星形胶质细胞的胞浆和树突;星形胶质细胞中β8蛋白表达在复氧后12 h即有增加,1 d时达高峰;星形胶质细胞与TMLC共培养体系在复氧后各时间点TGF-β1活性增高趋势与星形胶质细胞β8表达趋势相似,抑制β8表达后,TGF-β1活性在各时间点均显著降低。结论新生鼠在缺血缺氧时,星形胶质细胞高表达的β8对中枢神经系统中TGF-β1的活化起重要调控作用。
- 李晋辉李德渊陈大鹏母得志屈艺
- 关键词：星形胶质细胞整合素转化生长因子新生大鼠
- 核转录因子FOXO3a在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经元凋亡中的作用被引量：5
- 2013年
- 目的探讨核转录因子FOXO3a在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经元凋亡中的作用及机制。方法 160只10日龄SD大鼠随机分为缺氧缺血(HI)组和假手术组,HI组在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎后缺氧2.5 h;假手术组不结扎颈总动脉,不作缺氧处理。两组在HI后0.5 h、2 h、4 h、8 h和24 h各处死16只大鼠取大脑皮层。应用Western blot定量检测FOXO3a总蛋白、胞核FOXO3a蛋白、胞浆FOXO3a蛋白及Bim蛋白表达。应用TUNEL染色法检测凋亡细胞。结果与假手术组比较,HI组胞核FOXO3a蛋白于HI后0.5 h表达开始增高,随HI时间延长表达逐渐增高,24 h达高峰(P<0.01);胞浆FOXO3a蛋白水平在HI后各时间点均低于假手术组(P<0.01);Bim蛋白在HI后0.5 h表达升高,2 h达高峰,4 h开始降低,至8 h开始恢复至基线水平。TUNEL染色结果显示HI后4 h,凋亡细胞开始增多,24 h达高峰,各时间点凋亡指数均高于假手术组(均P<0.01)。结论新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时FOXO3a自胞浆转位入胞核,诱导靶基因前凋亡蛋白Bim表达,Bim表达上调可能与神经元凋亡有关。
- 李德渊屈艺李晋辉张莉熊涛母得志
- 关键词：FOXO3A凋亡神经元新生大鼠
- 磷酸酶PTEN在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经元凋亡中的作用被引量：4
- 2014年
- 目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)时,大脑皮层第10号染色体上磷酸酶及张力蛋白同源缺失的基因(PTEN)蛋白、磷酸化(p)-PTEN蛋白、促凋亡蛋白Bim mRNA及蛋白表达变化,探讨抑制PTEN活性对新生大鼠缺氧缺血(HI)神经元凋亡的保护作用机制。方法将128只10日龄SD大鼠随机分为4组:缺氧缺血组、假手术组、PTEN脂质磷酸酶抑制剂双过氧化钒(bisperoxovanadium,bpv)干预组和生理盐水溶剂组。缺氧缺血组在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎,氮氧混合气(92%N2、8%O2)中缺氧2.5h;假手术组不结扎颈总动脉,不作缺氧处理。bpv干预组和溶剂对照组予腹腔内注射bpv和生理盐水,30min后做缺氧缺血处理。各组分别于建模后0.5h及24h处死动物取大脑皮层,应用Western blot检测PTEN、p-PTEN及Bim的蛋白含量。实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)定量检测Bim mRNA表达水平,应用TUNEL染色法检测凋亡细胞。结果缺氧缺血组于HI后0.5h及24h,PTEN蛋白无明显变化,p-PTEN蛋白表达降低。HI后0.5h,Bim mRNA及蛋白表达增加,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),HI后24h,Bim mRNA及蛋白恢复至基线水平。bpv干预组PTEN蛋白无明显变化,p-PTEN蛋白表达增加,Bim mRNA及蛋白表达降低,与生理盐水组和缺氧缺血组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。bpv干预组于HI后24h,TUNEL染色阳性细胞数较生理盐水组和缺氧缺血组减少,凋亡指数降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时,PTEN发生去磷酸化,活性增高,抑制PTEN活性可下调前凋亡蛋白Bim mRNA及蛋白表达,减少神经细胞凋亡。
- 李德渊屈艺李晋辉张莉熊涛母得志
- 关键词：PTEN凋亡神经元新生大鼠
- 早产儿218例视网膜病变筛查分析被引量：33
- 2013年
- 目的探讨早产儿视网膜病变（ROP）的发生率及高危因素，初步评价2004年早产儿治疗用氧和视网膜病变防治指南在ROP筛查中的实用性。方法对2011年2月至2012年2月在四川大学华西第二医院住院治疗且符合筛查标准的218例早产儿进行眼底检查，并分析发生ROP的相关因素。按英国推荐的ROP筛查标准（体质量≤1500g或胎龄≤31周）对筛查结果进行比较。结果218例早产儿中，11例发生ROP，发生率为5．0％。ROP组与非ROP组10minApgar评分分别为（8．60±1．78）分及（9．53±0．98）分，合并呼吸窘迫综合征例数分别为6例及33例，吸氧时间〉10d的患儿分别为8例及44例，使用机械通气患儿例数分别为6例及23例，使用输血治疗的早产儿分别为6例及53例，上述指标2组间比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）。若按英国推荐的ROP筛查标准统计，将遗漏7例。结论出生后Apgar评分较低、病程中吸氧时间长、使用机械通气或伴有严重全身并发症与ROP的发生有关，在进行ROP筛查时使用2004卫生部推荐指南符合本地区的实际情况，但应根据患儿全身疾病情况尤其是并呼吸窘迫综合征的患儿有选择地进行筛查可减少漏诊率。
- 罗黎力陈大鹏屈艺母得志
- 关键词：早产儿视网膜病变
- 整合素β_8在共培养系统中对缺氧缺血后神经元凋亡的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨星形胶质细胞与神经元共培养系统中，缺氧缺血后星形胶质细胞表达的整合素β8对神经元凋亡的影响。 方法 取新生1～3 d SD大鼠及孕16 d SD大鼠的胎鼠脑皮质，分别分离培养星形胶质细胞及神经元，免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度。取缺氧缺血培养复氧后12 h、1 d、2 d星形胶质细胞（实验组）以及正常星形胶质细胞（对照组），RT-PCR检测细胞整合素β8表达变化。利用整合素β8小干扰RNA （small interfering RNA，siRNA）感染抑制星形胶质细胞整合素β8表达，实时荧光定量PCR检测其抑制效率。取正常神经元及星形胶质细胞共培养（共培养缺氧缺血组）、经整合素β8 siRNA感染后2 d的星形胶质细胞与正常神经元共培养（β8 RNA干扰组）以及正常神经元（单纯缺氧缺血组），行体外模拟缺氧缺血处理；复氧后1 d收集细胞，TUNEL染色法检测整合素β8对神经元凋亡的影响；以正常神经元作为对照组。 结果 免疫细胞化学染色鉴定示，星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白及神经元神经核阳性率均达90%以上。与对照组相比，实验组星形胶质细胞中整合素β8 mRNA表达在复氧后12 h即增加，1 d时达峰值，2 d时仍维持较高水平；各时间点实验组与对照组比较及实验组复氧后各时间点间比较，差异均有统计学意义（P 〈 0.05）；整合素β8 siRNA感染后，实验组整合素β8 mRNA表达明显降低，感染后2 d降至最低值（P 〈 0.05）。TUNEL检测示，与对照组相比，单纯缺氧缺血组、共培养缺氧缺血组及β8 RNA干扰组神经元凋亡明显增多（P 〈 0.05）；共培养缺氧缺血组及β8 RNA干扰组细胞凋亡指数较单纯缺氧缺血组明显降低，共培养缺氧缺血组低于β8 RNA干扰组，差异均有统计学意义（P 〈 0.05）。 结论 缺氧缺血后，星形胶质细胞中整合素β8表达增高，神经元凋亡率下降，对受损神经�
- 李晋辉陈大鹏唐军伍金林屈艺母得志
- 关键词：缺氧缺血性脑病星形胶质细胞神经元
- 抑制第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因活性对缺氧缺血神经元凋亡的保护作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨抑制第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因（PTEN）活性对缺氧缺血神经元凋亡的保护作用及机制。方法培养新生SD大鼠皮质神经元，建立体外神经元氧糖剥夺（OGD）模型模拟细胞缺氧缺血。细胞分为3组：1．正常对照组：正常培养液孵育的神经元；2．OGD组：模型制备后，取再灌注后0．5、3．0、6．0、12．0、24．0、48．0h神经元进行观察；3．PTEN抑制剂过氧钒酸钠（bpv）干预组：应用bpv处理神经元，再制备OGD模型，于再灌注后24h观察。应用末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记法检测神经元凋亡，Westernblot检测PTEN、p-PTEN、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、p-GSK-3β、抗凋亡蛋白髓细胞淋巴瘤-1（Mcl-1）蛋白表达。结果1．与正常对照组比较，OGD神经元凋亡增加（P〈0．05），PTEN表达增加，p-PTEN、p-Akt、p-GSK-3β及Mcl-1的表达降低（P均〈0．05），而Akt及GSK-3β表达未发生变化（P均〉0．05）。2．与OGD组比较，bpv干预后神经元凋亡减少（P〈0．05），p-PTEN、p-Akt、p-GSK-3β和Mcl-1的表达增加（P均〈0．05），而PTEN、Akt及GSK-3β并未发生变化（P均〉0．05）。结论缺氧缺血诱导神经元凋亡发生，PTEN／Akt／GSK-3β／Mcl-1信号通路参与调控其凋亡。抑制PTEN活性后，Akt及GSK-3β磷酸化水平增加，使Mcl-1泛素化降低，从而减少神经元凋亡。
- 赵婧屈艺母得志
- 关键词：糖原合成酶激酶-3Β凋亡
