江苏省医学重点学科建设资助项目(XK200723)
- 作品数:9 被引量:18H指数:3
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- 发文基金:江苏省医学重点学科建设资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学理学更多>>
- RNA干扰技术在裸鼠移植瘤中的应用
- 2009年
- RNA干扰(RNAi)技术是由人工导入的双链RNA介导的特异性的转录后基因沉默技术。近年RNAi技术已大量应用于裸鼠移植瘤中,RNAi裸鼠体内实验,通过敲低肿瘤的凋亡抑制基因、促增生基因、肿瘤细胞浸润转移基因的表达,达到抑制肿瘤的效果。同时,RNAi在裸鼠移植瘤内可作为肿瘤放化疗的辅助手段。
- 王敬春王惠民
- 关键词:RNA干扰基因肿瘤治疗方案
- RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对结肠癌细胞周期的影响被引量:4
- 2010年
- 目的 探讨沉默增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)基因对人结肠癌SW480细胞增殖及细胞周期的影响.方法 将APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNA-APRIL)转染结肠癌SW480细胞株,以非特异性序列载体转染组(nontargeting control)及未转染组(nontransfected control)作为对照.Real-time PCR和Western blot评价APRIL沉默效率;CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR检测细胞周期调控基因p21及p27的表达.结果 与非特异性序列载体转染组及未转染组相比,siRNA-APRIL显著抑制APRIL mRNA及蛋白的表达(P<0.05);siRNA-APRIL转染SW480细胞48 h、72 h和96 h后细胞增殖能力明显下降(P<0.05);转染48 h,siRNA-APRIL组G0/G1期细胞比例增高,S期及G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡的数量增加,同时p21及p27 mRNA的表达上调(P<0.05);而上述指标两对照组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 siRNA-APRIL能特异性抑制结肠癌SW480细胞APRIL的表达,并抑制细胞增殖,使细胞周期出现G0/G1期阻滞,其机制可能与上调p21和p27的表达有关.
- 王峰丁伟峰王敬春景蓉蓉倪红兵丛辉王跃国鞠少卿王惠民
- 关键词:增殖诱导配体小干扰RNA结肠癌细胞周期
- 增殖诱导配体shRNA对结直肠癌细胞增殖与转移的影响被引量:2
- 2008年
- 目的探讨增殖诱导配体(APRIL)shRNA对结直肠癌细胞的增殖与转移的影响。方法用RNA干扰技术敲低结直肠癌细胞株SW480中APRIL基因的表达,以免疫印迹技术、细胞黏附、损伤修复及侵袭力检测等体外实验对比APRIL基因敲低前后细胞株SW480的增殖、黏附、侵袭及转移能力的变化。结果转染组细胞APRIL蛋白表达的灰度值为0,显著低于阴性对照组的1.04-0.3和未转染组的1.1±0.4,差异有统计学意义(F=42.15,P=0.00);转染组、阴性对照组及未转染组最大增殖细胞数分别为(6.1±4.7)×10^4个、(36.4±14.4)×10^4个和(41.3±19.2)×10^4个,转染组细胞增殖能力明显受到抑制(F=24.76,P〈0.05);转染组细胞黏附的平均吸光度(A)值为0.343,低于阴性对照组的0.409及未转染组的0.412,细胞黏附率相对于未转染组降低39%;转染组、阴性对照组及未转染组迁移至损伤区细胞数分别为(47.89±13.16)个、(98.78±23.26)个和(108.01±39.11)个,与阴性对照组、未转染组比较,细胞迁移能力的差异有统计学意义(F=65.53,P〈0.01);细胞侵袭力(A值0.58±0.10)相对于阴性对照组(A值0.94±0.23)与未转染组(A值1.11±0.21)差异亦有统计学意义(F=5.771,P〈0.05)。结论APRIL有促细胞增殖作用,很可能参与结直肠癌细胞的侵袭和转移,并具增强结直肠癌侵袭和转移潜能。
- 丁伟峰鞠少卿朱俐王惠民
- 关键词:结直肠肿瘤膜蛋白质类肿瘤坏死因子类细胞增殖
- 医学检验中的测量不确定度被引量:5
- 2011年
- 医学检验结果报告单定量检测结果包含了测量不确定度才是完整的,以判断检测结果是否达到预期检测目的。比较相关检测结果的一致性时,也必须报告测量不确定度[1]。测量不确定度可定量地评价检测结果的质量,是参考实验室和常规实验室质量体系的核心部分。
- 肖静杨梅倪红兵陆青云王惠民
- 关键词:测量不确定度生物变异
- 参加国际比对的三种血清酶实验分析
- 2010年
- 目的:应用国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)公布的参考方法对血清乳酸脱氢酶、γ-谷氨酰基转移酶及淀粉酶进行测定,其准确性通过参考实验室国际比对计划的评估。方法:按照IFCC有关酶学活性在37℃测定参考方法的标准操作程序,使用Hitachi测定系统进行3个酶的测定。通过测定质控血清监测系统稳定状态、有证参考物和参加酶学国际比对,验证参考方法的准确性。结果:本测定系统测定室内质量控制血清3种酶日间测定变异系数为0.5%~1.4%;有证参考物测定结果在允许的范围内,初步验证了参考方法的准确性;3种国际比对样本A、B两个浓度的测定值均位于所有参考实验室测定值的軃x±2s范围内。结论:应用IFCC参考方法采用本测定系统对3个酶进行的测定结果稳定、准确,具有一定的可比性。
- 施秀英王惠民沈蕾倪红兵
- 应用参考方法对血清γ-谷氨酰基转移酶的测量不确定度评定被引量:1
- 2010年
- 目的 探讨临床实验室对测量不确定度的评定方法和程序.方法 应用国际临床化学联合会(IFCC)公布的参考方法对参考实验室外部质量评价计划(RELA)样本进行γ-谷氨酰基转移酶(GGT)催化活性浓度测定,明确反映整个过程测量不确定度分量的来源,按A,B两类不确定度的计算方式对各分量分别进行评定,计算合成标准不确定度,最后取95%置信区间,计算出扩展不确定度.结果 GGT催化活性浓度均值为3.492 μkat/L,合成标准不确定度为0.032 μkat/L,取95%置信区间,包含因子k=2,则扩展不确定度(U)为0.064 μkat/L.结论 临床实验室的测量不确定度与传统的测量误差相比,更能反映测量的水平,对临床检验工作有一定的指导意义.
- 倪红兵施秀英王惠民肖静鞠少卿王跃国
- 关键词:测量不确定度Γ-谷氨酰基转移酶合成标准不确定度扩展不确定度
- 2型糖尿病患者载脂蛋白CⅢ基因多态性与高三酰甘油血症关系研究
- 2010年
- 目的探讨中国南通地区汉族2型糖尿病(T2DM)患者中高三酰甘油血症(HTG)是否与载脂蛋白CⅢ(apoCⅢ)基因启动子区T-455C和C-482T多态性有关。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测212例T2DM患者apoCⅢ-455和-482位点多态性的基因型和等位基因频率,同时检测相关生化指标。结果 apoCⅢT-455C和C-482T多态性位点之间存在强连锁不平衡(D'〉0.7,r2〉0.6,P〈0.0001)。等位基因以常见等位基因-455T和-482C为主,-455和-482位点基因型均分别以杂合型-455TC和-482CT为主。此2个多态性位点等位基因和基因型频率在正常三酰甘油(NTG)组和HTG组之间差异均无统计学意义(P〉0.05)。-455CC和-455TC型患HTG的风险与野生型-455TT相比差异无统计学意义(P〉0.05),比值比(OR)[95%可信区间(CI)]分别为0.79(0.31~1.99)和1.09(0.52~2.28)。-482TT和-482CT型患HTG的风险与-482CC相比差异也无统计学意义(P〉0.05),OR(95%CI)分别为1.33(0.53~3.34)和1.65(0.78~3.51)。所有相关生化指标在这2个多态性位点各基因型之间差异也均无统计学意义(P〉0.05)。结论在中国南通地区汉族T2DM患者中,未发现apoCⅢ基因启动子区多态性与HTG有关联,与非T2DM人群中研究结果不一致。
- 俞娟王惠民杨曙梅孙长江丛辉陈连英王跃国朱静仪
- 关键词:高三酰甘油血症多态性
- miR-145与结肠癌被引量:3
- 2011年
- 微小RNA(microRNA,miRNA,miR)是参与基因转录后调控的非编码小分子RNA。miRNA与人类肿瘤的发生、发展密切相关。研究表明,miR-145在结肠癌中呈低表达,具有抑制结肠癌生长的潜能;miR-145可以调节多个靶基因,同时,其本身又受p53的调控。miR-145可能是肿瘤抑制基因调控网络的关键因子。本文就miR-145与结肠癌的相关研究进展作一综述。
- 王峰王惠民
- 关键词:MIR-145P53结肠癌
- SELEX技术中分离方法的研究进展被引量:3
- 2011年
- 指数富集配体的系统进化(systematicevolutionofligandsbyexponentidenrichment,SELEX)技术是一种用特定的随机寡核苷酸文库,并结合体外PCR扩增,经过多轮筛选,筛选出能与靶分子高亲和、高特异性结合的寡核苷酸序列[该序列被称为适配体(aptamer)]的技术。适配体类似于抗体,但优于抗体,有可能代替抗体应用于临床诊断和疾病的治疗。SELEX技术问世20年来,适配体的应用前景吸引着众多研究者不断探索,
- 邵可可王惠民马达
- 关键词:适配体