目的:通过体外诱导耐药建立肺腺癌A549细胞系的培美曲塞耐药细胞株,并进一步研究其耐药性发生与HER2/neu之间的关系。方法:通过高浓度反复间歇诱导法建立A549的培美曲塞耐药细胞系。CCK8法检测耐药性、绘制生长曲线,计算倍增时间;流式细胞术法检测细胞周期分布及细胞凋亡水平;RT-PCR法检测耐药株及亲本株HER2/neu的mRNA表达。结果:历经6个月建立了耐药指数为6.7倍的A549/PEM细胞系,其较亲本株的倍增时间延长(33.5±1.71h vs 27.1±1.15h);流式细胞术检测结果显示:与亲本株比较,A549/PEM处于G1期的细胞比例增加(66.03±1.61%vs 57.92±1.73%),S期细胞比例降低(30.05±1.25%vs 37.51±1.31%),差别均有统计学意义(P<0.05);在PEM作用24h后,A549与A549/PEM细胞凋亡率分别为23.52%和10.99%,差别有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测结果示:A549/PEM较亲本株HER2/neu基因的mRNA表达水平增高(P<0.05)。结论:A549/PEM与亲本株的生物学特性有差别;肺腺癌培美曲塞继发性耐药的产生可能与HER2/neu表达上调有关。
