国家教育部博士点基金(20060358021)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：刘兢朱娟娟江冰陈舒扬傅璐更多>>
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- 抗ErbB2嵌合抗体chA21大规模纯化工艺的建立及质量研究被引量：3
- 2009年
- 自行研制的抗ErbB2嵌合抗体chA21具有抑制高表达ErbB2的乳腺癌细胞生长的作用。在前期小规模培养和纯化工作的基础上,以填充床生物反应器大规模培养CHO工程细胞株表达的上清为原料,采用亲和层析、凝胶过滤除盐、阳离子交换层析、分子筛等步骤,分离纯化嵌合抗体chA21,建立了大规模纯化工艺,并按照中国药典(2005年版第三部)对最终产品进行全面鉴定和质量控制。该工艺能有效解决抗体纯化过程形成的多聚体问题,去除内毒素和DNA残留;可以确保每批纯化20～40L培养上清,每批收获嵌合抗体可达5g以上,蛋白总回收率大于50%,纯度可达98%。研究结果表明,该抗体纯化工艺得率高,质量控制方法稳定可靠,适用于大规模生产。
- 傅璐黄辉陈舒扬初波刘兢
- 关键词：嵌合抗体纯化工艺
- 抗ErbB2嵌合抗体chA21聚集现象的鉴定和分析被引量：3
- 2008年
- 聚集现象是目前基因重组抗体面临的挑战之一。采用高效排阻色谱(HPSEC)、动态光散射(DLS)、SDS-PAGE和间接ELISA鉴定抗ErbB2嵌合抗体chA21聚集的形式和性质,并比较温度和添加剂对抗体聚集程度、抗原结合活性的影响,用圆二色谱(CD)检测不同聚集条件下蛋白构象的变化,最后将抗体酶解分离分析聚集的部位。结果表明:chA21在溶液中可形成二聚和更高形式的聚集,聚集体是通过非共价键相互作用形成,并仍保留抗原结合活性,聚集程度和活性受温度和添加剂影响,而蛋白质的构象相对稳定,抗体可变区的相互作用可能是引起聚集的主要原因之一。对抗体聚集现象的分析有助于建立稳定的抗体保存条件,并为今后抗体进一步改造提供依据。
- 朱娟娟荣子烨江冰刘兢
- 关键词：嵌合抗体动态光散射圆二色谱
