国家自然科学基金(30970057)
- 作品数：5 被引量：22H指数：4
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- 重组大肠杆菌产角质酶-CBM摇瓶发酵优化及分泌表达研究被引量：4
- 2011年
- 在TB培养基的基础上,通过单因素分析和正交设计对重组大肠杆菌产角质酶-CBM发酵进行优化,得到最适培养基的组分为:甘油5 g/L,蛋白胨16 g/L,MgSO4.7H2O 2.5 mmol/L,K2HPO413.7 g/L,KH2PO41.53 g/L,菌体生长至对数前中期时添加终浓度为1 g/L乳糖和0.75 g/L甘氨酸,30℃发酵48 h,角质酶-CBM产量可达63 U/ml,较TB培养(20 U/ml)提高了近3倍。考察了热激作用、渗透调节物质及温度两控制对角质酶-CBM分泌表达的影响,在添加Lactose和Glycine后,发现在添加终浓度为75 mmol/L的L-脯氨酸,37℃热激1 h或47℃热激0.5 h,变温至25℃发酵,角质酶-CBM产量可达90 U/ml,较TB恒温培养提高了近四倍。
- 郭森吴丹陈晟吴敬陈坚
- 关键词：正交设计渗透调节物质
- 重组角质酶的发酵制备及其对涤纶纤维的表面改性被引量：6
- 2011年
- 对大肠杆菌表达嗜热子囊菌Thermobifida fusca角质酶的摇瓶诱导条件及3 L发酵罐扩大培养进行了研究,并探讨了角质酶对涤纶纤维的改性作用。结果表明,在摇瓶培养中,采用工业级TB培养基,用2 g/L乳糖诱导,菌体培养至对数生长前期添加0.5%甘氨酸,角质酶产量可达到128 U/mL。在3 L发酵罐扩大培养中,补料培养生物量(OD600)最大达到35,角质酶酶活最高达506 U/mL,是迄今国内外报道细菌来源角质酶的最高水平。紫外分光光度法分析初步表明涤纶纤维经角质酶水解产生了对苯二甲酸类物质。角质酶处理后纤维的染色性和润湿性明显高于对照样,且角质酶与Triton X-100联合作用,能显著提高涤纶的亲水性。为国内首次采用细菌来源角质酶进行涤纶纤维改性的报道。
- 张瑶陈晟吴丹何淼朱孔亮陈坚吴敬
- 关键词：乳糖发酵涤纶表面改性
- 角质酶及其在纺织工业中的应用被引量：8
- 2010年
- 详细综述了国内外对角质酶的研究概况,包括角质酶的主要来源,角质酶基因的克隆与表达,以及关于角质酶的发酵研究。着重阐述了目前角质酶在棉纤维的生物精炼,羊毛的防毡缩整理,以及合成纤维的生物改性等方面的应用进展。另外,作为推动纺织工业清洁生产的关键酶制剂,对未来角质酶在纺织工业中的应用前景作了简要展望。
- 张瑶陈晟吴丹吴敬陈坚
- 关键词：角质纺织工业酶制剂
- 重组大肠杆菌产Streptomyces sp.FA1来源木聚糖酶的摇瓶发酵优化被引量：1
- 2013年
- 为了实现来源于Streptomyces sp.FA1的木聚糖酶的高效胞外分泌表达,对E.coli BL21(DE3)/pET20b(+)/coe/xynA基因工程菌的发酵产酶诱导条件进行优化,获得最优的诱导条件为25℃发酵6 h后添加终浓度为0.4 mmol/L的IPTG。在此基础上对发酵培养基进一步优化,得到最优培养基成分为:甘油11 g/L,酵母粉24 g/L,蛋白胨8 g/L,磷酸盐浓度89 mmol/L,镁离子4mmol/L。最终酶活达到780.2 U/ml,为未优化前的2.2倍,是目前大肠杆菌摇瓶发酵产木聚糖酶的最高表达水平,为实现该酶的工业化生产奠定基础。
- 何洁宿玲恰吴敬
- 关键词：链霉菌木聚糖酶重组大肠杆菌发酵优化
- 复合与合成培养基对大肠杆菌胞外生产α-环糊精葡萄糖基转移酶的影响被引量：4
- 2010年
- 为实现来源于Paenibacillus macerans JFB05-01的α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGT酶)的高效胞外表达,以含分泌型信号肽OmpA的大肠杆菌E.coliBL21(DE3){pET-20b(+)/α-cgt}为研究对象,比较了其在不同诱导条件下复合与合成培养基中生长产酶的规律。结果表明在添加甘氨酸的条件下采用合成培养基,以0.8g/L/h的乳糖进行流加诱导所得的胞外酶活和生产强度最高。在该条件下发酵30小时后胞外α-CGT酶的环化活性达113.0U/ml(水解活性为79100.0IU/ml),是复合培养基胞外产酶的2.3倍,完全满足工业化生产的需求。
- 程婧吴丹陈晟吴敬陈坚
- 关键词：PAENIBACILLUSΑ-环糊精葡萄糖基转移酶大肠杆菌合成培养基
