国家自然科学基金(30970030)
- 作品数：8 被引量：45H指数：4
- 相关作者：宋水山黄媛媛娄瑞娟罗利龙张霞更多>>
- 相关机构：河北省科学院河北工业大学河北省生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金国家重大基础研究前期研究专项更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 聚羟基脂肪酸酯合成酶的改造和代谢途径构建的研究进展
- 2013年
- 聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)是许多细菌在非平衡生长条件下在胞内积累的以颗粒状态存在的碳源和能源储藏物质。PHA因其具有生物可降解性、生物相容性等许多良好的材料性质、可以作为化学合成塑料未来的替代品而引起广泛关注。但由短链脂肪酸或单一脂肪酸单体合成的PHA的材料性质具有局限性,需要利用多种单体合成满足实际需求的PHA材料。PHA合成酶的底物特异性和PHA合成代谢途径决定着PHA的单体组成情况,进而影响着PHA的理化特性和材料性能。因此需要对PHA合成酶进行改造,扩展其对底物的特异性。另一方面需要构建新的PHA合成代谢途径,能合成出一些不常见的且性能优良的PHA材料。综述了近些年对PHA合成酶改造的研究及PHA代谢途径构建的研究进展。
- 李浩黄媛媛李曼宋水山
- 关键词：聚羟基脂肪酸酯代谢途径
- 细菌群体感应参与铜绿假单胞菌胞内聚羟基脂肪酸酯合成的调控被引量：3
- 2011年
- 群体感应是细菌根据细胞密度变化调控基因表达的一种调节机制。铜绿假单胞菌中QS系统由lasI和rhlI合成的信号分子3OC12-HSL和C4-HSL以及各自的受体蛋白LasR、RhlR组成,它们以级联方式调控多个基因表达。【目的】研究细菌群体感应(QS)对聚羟基脂肪酸酯合成的调控。【方法】利用铜绿假单胞菌PAO1及其QS突变株为材料通过气相色谱、荧光定量PCR在生理和分子水平上研究QS对聚羟基脂肪酸酯合成的调控。【结果】QS信号分子合成抑制剂阿奇霉素处理铜绿假单胞菌PAO1和QS突变株导致胞内PHA积累量显著减少;铜绿假单胞菌PAO1中C4-HSL合成酶基因rhlI缺失突变株PAO210胞内PHA积累量与野生型无差别;而3OC12-HSL合成酶基因lasI缺失突变株PAO55、3OC12-HSL受体合成酶基因lasR缺失突变株PAO56以及lasI/lasR双缺失突变株PAO57胞内PHA含量与野生型相比明显减少;lasI和lasR的突变株体内PHA合成酶基因phaC1的表达量显著降低,信号分子3OC12-HSL回补实验使phaC1的表达量可恢复到野生株水平,但只可部分恢复lasI缺失导致的胞内PHA合成。【结论】由此推测,铜绿假单胞菌群体感应系统中lasI/lasR系统参与胞内聚羟基脂肪酸酯合成的调控。
- 徐操李曼黄媛媛张哲边子睿宋水山
- 关键词：铜绿假单胞菌细菌群体感应聚羟基脂肪酸酯
- aiiA基因表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达被引量：11
- 2010年
- 构建携带N-酰基高丝氨酸内酯酶基因(aiiA)的重组毕赤酵母表达载体pPIC3.5K-aiiA,采用电转化方法转入毕赤酵母GS115,经营养缺陷型培养基、表型鉴定和高G418浓度筛选获得高拷贝表达盒的酵母转化子,用0.5%甲醇诱导表达,RT-PCR鉴定可检测到重组酵母中编码目的基因成熟肽的mRNA,SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,aiiA基因在毕赤酵母中成功表达,用指示菌紫色杆菌CV026检测发现目的蛋白具有降解N-酰基高丝氨酸内酯的活性。
- 娄瑞娟张霞罗利龙徐操宋水山
- 关键词：AIIA基因毕赤酵母基因表达
- 巴斯德毕赤酵母表达系统的研究进展和前景展望被引量：21
- 2010年
- 巴斯德毕赤酵母经过近二十来年的发展,已经成为表达外源基因的优秀表达系统之一,成功地表达了许多重组异源蛋白。从表达菌株,表达载体等方面详细综述了毕赤酵母表达系统的优点,如:营养要求低、可高密度发酵、遗传稳定性高等;分析了可能影响巴斯德毕赤酵母表达系统的相关因素,这些因素包括外源基因的特性、基因拷贝数、产物稳定性及发酵策略等,结合这些因素和具体实践经验,就如何提高外源基因在巴斯德毕赤酵母中表达量进行了阐述;讨论了该表达系统存在的不足之处并且展望了其发展前景。
- 娄瑞娟罗利龙张霞张瑞刚宋水山
- 关键词：巴斯德毕赤酵母外源基因
- 细菌群体感应及其干扰策略的研究进展被引量：4
- 2010年
- 群体感应(QS)广泛存在于细菌中,是细菌根据细胞密度变化调控基因表达的一种机制。许多植物病原菌依赖QS调控致病基因和毒性因子的表达,导致植物发病,因此通过抑制QS效应就为控制细菌病害提供了一种有效的方法。目前发现许多途径可以干扰细菌的QS,如:产生可使信号分子降解的酶,产生病原菌信号分子的类似物与信号分子受体蛋白竞争结合来阻断病原菌的群体感应,利用QS中信号分子来诱发寄主抗性。系统阐述了细菌QS及其干扰策略。
- 罗利龙娄瑞娟邱健宋水山
- 关键词：细菌
- 群体感应对铜绿假单胞菌生物被膜形成的调控被引量：1
- 2011年
- 生物被膜是一种与浮游细胞相对应的生长方式,由细菌和自身分泌的包外基质组成。铜绿假单胞菌是研究这一生长方式的模式生物。在过去十年,对铜绿假单胞菌生物被膜的研究已取得显著进展。群体感应(QS)的细胞沟通机制在铜绿假单胞菌生物被膜形成中发挥着重要作用。介绍生物被膜的特点,并重点讨论了QS和生物被膜之间的关系。
- 黄媛媛宋水山
- 关键词：铜绿假单胞菌生物被膜
- 聚-4-羟基丁酸的微生物合成及医学应用被引量：5
- 2011年
- 聚-4-羟基丁酸[P(4HB)]是由微生物在非平衡生长条件下胞内积累的高分子聚酯,具有高柔韧性、生物相容性、生物可降解性、热塑性等特点。P(4HB)作为可吸收材料可用于制备医用可植入器件,如制备补片、心脏瓣膜和人造血管等治疗心血管疾病;制备手术缝合线;制备软组织修复材料;用于药物缓释体系。研究表明,生物发酵合成的P(4HB)是一种优良的医用生物材料。
- 张岩峰田立宋水山
- 群体感应系统对紫色杆菌CV31532积累PHA的影响被引量：1
- 2013年
- 紫色杆菌CV31532中群体感应系统产生的信号分子C6-HSL是由cviI基因编码合成的。在限氮条件下,以D-葡萄糖酸钠、果糖、葡萄糖为唯一碳源时,紫色杆菌CV31532均产生聚-3-羟基丁酸,且以D-葡萄糖酸钠为唯一碳源时积累量最高。利用气相色谱分析发现,紫色杆菌CV31532培养48 h的PHA积累量显著高于其群体感应合成酶突变株CV026 PHA的积累量;通过薄层层析分析发现紫色杆菌CV31532合成信号分子的量在48 h显著提高;外源添加C6-HSL信号分子可显著提高突变体CV026 PHA的积累量。由此推测,紫色杆菌群体感应系统参与调控胞内PHA的合成。
- 黄媛媛宋水山
- 关键词：群体感应系统
