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抗ErbB2嵌合抗体chA21大规模纯化工艺的建立及质量研究被引量：3: 2009年; 自行研制的抗ErbB2嵌合抗体chA21具有抑制高表达ErbB2的乳腺癌细胞生长的作用。在前期小规模培养和纯化工作的基础上,以填充床生物反应器大规模培养CHO工程细胞株表达的上清为原料,采用亲和层析、凝胶过滤除盐、阳离子交换层析、分子筛等步骤,分离纯化嵌合抗体chA21,建立了大规模纯化工艺,并按照中国药典(2005年版第三部)对最终产品进行全面鉴定和质量控制。该工艺能有效解决抗体纯化过程形成的多聚体问题,去除内毒素和DNA残留;可以确保每批纯化20～40L培养上清,每批收获嵌合抗体可达5g以上,蛋白总回收率大于50%,纯度可达98%。研究结果表明,该抗体纯化工艺得率高,质量控制方法稳定可靠,适用于大规模生产。; 傅璐黄辉陈舒扬初波刘兢; 关键词：嵌合抗体纯化工艺

抗P185工程抗体表达与纯化研究被引量：4: 2006年; 人类的原癌基因Her-2编码一个185kDa的跨膜受体酪氨酸激酶,也称为p185,是肿瘤相关蛋白,在多种癌细胞,特别在乳腺癌中有高表达。构建了抗p185/HER-2的二价的嵌合抗体(scFv-Fc),并证明其保留了亲本抗体的特异结合活性,进而建立了高表达的细胞株。对该嵌合抗体进行滚瓶大规模培养,并对培养产物的纯化条件进行了摸索,建立了亲和层析和阳离子交换层析两步法。最终产物的纯度在95%以上,回收率为63%。摸索了嵌合抗体的冻干保存条件,抗体可以保持其稳定性和结合活性一年以上。嵌合抗体纯化工艺和保存条件的确定,为进一步的临床研究奠定了基础。; 乔婧娟刘海波朱娟娟程联胜刘兢; 关键词：嵌合抗体稳定性

生物技术和药物研究进展被引量：5: 2008年; 以单克隆抗体研究为例,从一个侧面介绍了生物技术及药物研究在中国科学技术大学的发展.先后研制过多种单克隆抗体.其中,用人α干扰素单克隆抗体制备的人α干扰素单克隆抗体亲和胶,成功地应用于干扰素的工业生产,解决了国内干扰素生产中的关键技术问题,并依此技术成立了安徽省第一家具有自主研发生物技术药物产品的生物技术公司;肿瘤抗原p185erbB-2/HER-2单克隆抗体有一种已被开发成肿瘤蛋白免疫组化诊断试剂,于2004年获得国家新药证书,现已转化为产品,另一种同类单抗正在用于抗体治疗药物的研发.此外,基于蛇毒抗栓组分的研究成果,与香港兆峰集团合资成立了兆峰科大药业公司,研发的蛇毒溶栓素已获得国家一类新药证书.今后更多的研发成果将在生物技术医药产业中得到应用.; 刘兢; 关键词：单克隆抗体干扰素抗体药物

抗ErbB2嵌合抗体chA21对SKBR3细胞的增殖抑制以及对PI3K/Akt和Erk1/2信号转导途径的影响被引量：3: 2009年; 目的检测抗ErbB2嵌合抗体chA21对高表达ErbB2乳腺癌细胞SKBR3的增殖抑制作用,并分析抗体对细胞膜上ErbB2分布以及对细胞PI3K/Akt和Erk1/2信号转导途径的影响,探讨chA21的抑癌机制。方法采用MTT检测chA21对SKBR3的增殖抑制作用,流式细胞术检测经chA21处理后细胞膜上ErbB2抗原的分布变化,Western blot检测抗体作用后对细胞PI3K/Akt和Erk1/2信号转导途径的影响。结果chA21可抑制SKBR3细胞的增殖,其作用呈剂量和时间依赖性。抗体作用后可下调细胞膜上ErbB2含量,并不同程度下调细胞的PI3K/Akt和Erk1/2的活化水平。结论chA21可抑制SKBR3细胞增殖,可能通过下调细胞膜上ErbB2分布而减少其介导的PI3K/Akt和Erk1/2信号转导途径的活化来实现的。; 朱娟娟赵斌刘兢; 关键词：SKBR3 ERBB2 嵌合抗体 PI3K/AKT ERK1/2

抗ErbB2嵌合抗体chA21聚集现象的鉴定和分析被引量：3: 2008年; 聚集现象是目前基因重组抗体面临的挑战之一。采用高效排阻色谱(HPSEC)、动态光散射(DLS)、SDS-PAGE和间接ELISA鉴定抗ErbB2嵌合抗体chA21聚集的形式和性质,并比较温度和添加剂对抗体聚集程度、抗原结合活性的影响,用圆二色谱(CD)检测不同聚集条件下蛋白构象的变化,最后将抗体酶解分离分析聚集的部位。结果表明:chA21在溶液中可形成二聚和更高形式的聚集,聚集体是通过非共价键相互作用形成,并仍保留抗原结合活性,聚集程度和活性受温度和添加剂影响,而蛋白质的构象相对稳定,抗体可变区的相互作用可能是引起聚集的主要原因之一。对抗体聚集现象的分析有助于建立稳定的抗体保存条件,并为今后抗体进一步改造提供依据。; 朱娟娟荣子烨江冰刘兢; 关键词：嵌合抗体动态光散射圆二色谱

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国家自然科学基金(30570362)