国家科技支撑计划(2006BAK02A03-1)
- 作品数：8 被引量：94H指数：5
- 相关作者：宋立陈瑞张纯萍宁宜宝熊惠军更多>>
- 相关机构：中国兽医药品监察所华南农业大学中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技攻关计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 鸡源沙门菌的耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究被引量：4
- 2011年
- 为了解北京地区鸡源沙门菌血清型的分布、耐药性以及基因型情况,利用Riboprinter全自动微生物基因指纹鉴定仪对分离到的沙门菌进行血清型鉴定,采用微量肉汤稀释法进行药物敏感性测定,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行基因分型。结果显示,共分离到15株肠炎沙门菌、1株鼠伤寒沙门菌,沙门菌对利福平、萘啶酸和多黏菌素E的耐药率较高,15株肠炎沙门菌中有14株的基因型为A型,1株为B型。本次分离的鸡源沙门菌以肠炎沙门菌为主,A型为优势基因型。
- 董剑辉熊惠军宋立陈瑞
- 关键词：沙门菌耐药性脉冲场凝胶电泳
- 中国10省市健康母猪体内猪链球菌致病血清型分布及其耐药性研究被引量：8
- 2009年
- 目的为调查中国健康母猪体内猪链球菌的主要致病血清型分布和不同血清型猪链球菌的耐药性差异。方法采集国内10个省市的健康母猪扁桃体并从中分离鉴定出猪链球菌421株，经与标准血清的凝集反应了解其主要致病血清型分布，并用微量肉汤法对不同血清型的猪链球菌进行耐药性检测，经统计分析了解不同血清型猪链球菌的耐药性差异。结果健康母猪体内所分离猪链球菌的优势（致病）血清型依次为9、3和7型，所占比例分别为26．6％、23．5％和15．7％。在能分型的其他血清型中，猪链球菌2型所占的比例为7．4％；耐药性研究结果表明，不同血清型的猪链球菌对抗菌药物的耐药性不同，猪链球菌2型对所测12种药物的敏感性最强。结论健康母猪体内猪链球菌的致病血清型分布结果再次证明猪链球菌是一种条件性致病菌，不同廊清型的猪链球菌感染应根据抗生素敏感性测试结果选用不同的药物进行合理防治。
- 张纯萍宁宜宝张仲秋宋立丘惠深高和义范学政
- 关键词：猪链球菌血清型耐药性
- 健康鸡猪体内大肠杆菌对四环素的耐药性及耐药基因分布被引量：34
- 2010年
- 【目的】四环素作为人类和动物临床上广泛使用的广谱抗生素,其耐药性问题一直为全球所关注。健康动物体内的共生性大肠杆菌作为耐药指示菌和耐药基因的贮存库,了解其对四环素的耐药性及耐药机制对于疾病的防控具有重要意义。【方法】从健康鸡、猪体内分离大肠杆菌,用微量肉汤法检测其对四环素的耐药性,并用PCR方法对耐药菌株中8种四环素耐药基因的携带情况进行调查,运用统计学方法分析鸡、猪体内大肠杆菌分离株的耐药性和耐药基因分布情况的差异。【结果】总共分离鉴定出大肠杆菌269株,其中86.2%的菌株对四环素产生了耐药性,健康猪体内大肠杆菌分离株的耐药性明显高于健康鸡体内分离株(P<0.05)。tet(A)、tet(B)和tet(M)3种四环素耐药基因广泛存在于健康鸡、猪体内的共生大肠杆菌中,所携带比例分别为87.9%、28.4%和15.5%;所有对四环素耐药的大肠杆菌均携带tet(A)或tet(B)基因,其中25.0%和2.6%的耐药菌株分别携带有2种和3种耐药基因,tet(M)基因与tet(A)或tet(A)+tet(B)基因共存于对四环素耐药的大肠杆菌中;健康鸡、猪体内耐药性大肠杆菌在tet(A)+tet(M)基因携带率方面的差异具有统计学意义(P<0.01)。【结论】健康鸡、猪体内的大肠杆菌分离株普遍对四环素耐药,四环素耐药基因广泛分布于大肠杆菌分离株中,大肠杆菌对四环素的耐药机制以主动外排作用为主,核糖体保护基因在大肠杆菌对四环素耐药机制方面的作用尚待进一步的研究。
- 张纯萍宁宜宝宋立
- 关键词：大肠杆菌四环素耐药性耐药基因
- 鸡传染性支气管炎病毒H52株TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：7
- 2012年
- 本研究建立了一种快速的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H52株定量检测方法,为进一步研究疫苗的效价检测和质量监控新方法奠定基础。针对IBV核蛋白(N)基因,设计特异的H52株荧光定量PCR检测引物和TaqMan-MGB探针,优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验,探讨荧光定量RT-PCR与EID50方法测定病毒含量的相关性,并通过体外转录技术对病毒基因拷贝数进行定量分析。该方法特异性强,与其他禽源病毒均无交叉反应;该方法可检测到5.60×101拷贝/μL的病毒核酸,与常规PCR相比,敏感性高10倍;重复性试验的变异系数为0.9%～3.2%;与EID50检测结果的相关系数r=0.934,两种方法在检测H52株病毒效价上具有很好的相关性。本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法,适合于对鸡传染性支气管炎病毒H52株病毒含量的快速定量检测。
- 梁耀峰郭霄峰宋立刘洋
- 关键词：荧光定量RT-PCRTAQMAN-MGB探针鸡传染性支气管炎病毒
- 鸡沙门氏菌脉冲场凝胶电泳分型研究被引量：5
- 2009年
- 为应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)从分子水平上对禽源沙门氏菌之间的差别进行分析和研究,本研究采用自动微生物鉴定仪对12株疑似鼠伤寒沙门氏菌和15株疑似鸡白痢沙门氏菌进行了鉴定。以限制性核酸内切酶XbaⅠ对其全基因组DNA进行酶切、PFGE分型,Info QuestFP聚类分析软件对电泳结果进行分析。结果显示,共鉴定出11株鼠伤寒沙门氏菌、1株圣保罗沙门氏菌、6株阿姆斯特丹沙门氏菌、5株亚拉巴马沙门氏菌、1株鸡白痢沙门氏菌、2株纽波特沙门氏菌和2株肠炎沙门氏菌,一共分为12个PFGE型。实验结果表明,江苏地区存在有不常见的沙门氏菌血清型,同种血清型之间的基因型差别较小(相似值为0.85～1),不同血清型之间差别较大(相似值为0.45～0.70)。PFGE能从分子水平上对禽源沙门氏菌的基因组DNA进行分型。
- 陈瑞訾占超石佩宋立
- 关键词：沙门氏菌脉冲场凝胶电泳分子分型
- 中国不同年代食品动物大肠杆菌耐药性调查研究被引量：31
- 2009年
- 收集到20世纪70，80，90年代和2000年食品动物大肠杆菌共326株，对不同年代的大肠杆菌进行耐药性、整合子／基因盒测定，结果表明在过去的30多年里，食品动物大肠杆菌耐药性呈逐渐增长的趋势．从1970～2000年，对青霉素类的耐药率从19．0％增长到81．3％；对四环素类药的耐药率从61．9％～63．5％增长到89．5％～93．1％；对氨基糖甙类的耐药率从0-9．5％增长到5．0％～63．1％，对氟喹诺酮类的耐药率从0％增长到50.2％-53．0％；对磺胺类药的耐药率从11．7％～57．1％增长到77．7％～79．7％；对氯霉素的耐药率从39．7％增长到51．8％．整合子的携带率从20世纪70年代的17．5％增长到2000年的79．1％，其中大多数为I型整合子，也有少数Ⅱ型整合子（90年代为4．4％，2000年为11．8％）．在20世纪70和80年代，大多数I型整合子的基因盒编码aadAI基因，比例分别为72．7％和70．0％．20世纪90年代和2000年基因编码dfrA—aadA的占多数，分别为80．0％和74．7％．近4个世纪以来，细菌的多重耐药谱也逐渐增宽．本项研究给兽医从业者滥用抗菌药提出了警示，同时提出中国动物源细菌耐药性的监测和控制是必要的．
- 宋立宁宜宝沈建忠范学政张纯萍杨承槐韩剑峰
- 关键词：大肠杆菌耐药性
- 脉冲场凝胶电泳在沙门氏菌流行病学中的应用被引量：4
- 2010年
- 脉冲场凝胶电泳是20世纪80年代发展起来的一种可用于分离10 kb至10 Mb分子质量DNA的新型凝胶电泳技术,已广泛应用于细菌分子分型、种群特异性鉴定及遗传分析等方面。文章介绍了脉冲场凝胶电泳的技术、应用状况及目前沙门氏菌的分型现状,并阐述了该技术在沙门氏菌流行病学研究方面的应用及发展前景。
- 陈瑞熊惠军宋立陈坚
- 关键词：脉冲场凝胶电泳沙门氏菌分子分型流行病学
- 沙门菌肠毒素基因克隆及序列分析被引量：4
- 2010年
- 研究常见的不同血清型沙门菌肠毒素(stn)基因核苷酸序列之间的差异及其分布情况。根据沙门菌的stn核苷酸序列设计一对引物,应用PCR技术,分别对肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌和鸡白痢沙门菌进行PCR扩增,对扩增产物进行克隆及序列分析,并用所设计的引物检测7种血清型沙门菌(42株)。结果显示,3种沙门菌经PCR均扩增出749 bp的特异条带,DNA序列分析证实,沙门菌的stn核苷酸序列比较保守,42株沙门菌stn的检出率为100%。本试验成功克隆出沙门菌的stn,调查其在不同血清型沙门菌中的分布及序列分析,为进一步研究stn致病机理及研制减毒沙门菌活菌疫苗奠定了基础。
- 陈瑞熊惠军王培园董剑辉孙跃辉宋立
- 关键词：沙门菌肠毒素基因
