江苏省高校自然科学研究项目(09KJB230001)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：陈华友齐向辉耿旭徐庆刚张春霞更多>>
- 相关机构：南京工业大学江苏大学河南大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 枯草杆菌重组水蛭素(HV3)的发酵工艺研究被引量：1
- 2009年
- [目的]确定芽孢杆菌发酵生产水蛭素的最佳工艺条件。[方法]以枯草芽孢杆菌为供试菌种,研究菌种活化时间、接种量、培养基装量、温度、初始pH值、碳源、氮源等对发酵的影响,在此基础上对发酵条件进行优化。[结果]最佳发酵条件为:温度37℃,初始pH值7,培养基装量20ml/250ml,菌种活化时间6h,接种量3%,氮源为1.5%Tryptone,碳源为9.0%大豆浸出液,转速220r/min,16h后添加0.3%Tween80,发酵时间29h。[结论]优化条件下,发酵液活性可达210ATU/ml,较优化前提高13.1倍;优化条件上50L罐放大后具有很好的重复性,发酵液活性可达208ATU/ml。
- 陈华友齐向辉谭小力乌慧玲
- 关键词：水蛭素枯草杆菌发酵
- 枯草杆菌重组水蛭素的分离纯化工艺研究被引量：7
- 2009年
- [目的]优化枯草杆菌重组水蛭素的分离纯化工艺。[方法]采用系列预处理、初步层析和精细纯化试验。[结果]优化的分离纯化工艺为:发酵液经离心、三氯乙酸处理、超滤浓缩脱盐,再上阴离子交换柱,或用乙醇处理后贮存,为离子交换备用。初步层析介质用阴离子交换QSepharoseF.F.,缓冲体系为Tris-HCl(pH值8.0),体系电导率为6.0mS/cm,上样量为240.0ATU/ml介质,产品纯度为70.2%,回收率达90.0%。用SephacrylSi-100凝胶过滤柱精细纯化水蛭素,在一定流速范围内,流速对纯化效果影响不大,上样量可为10.0ml,得到的纯品纯度可达95.1%,得率为93.0%,SDS-PAGE电泳为单一条带。[结论]可为进一步工业化分离纯化水蛭素研究提供借鉴。
- 陈华友齐向辉耿旭徐庆刚
- 关键词：水蛭素枯草杆菌离子交换分离纯化
- 蛋白质分离纯化策略被引量：4
- 2009年
- 系统地介绍了蛋白质分离纯化的依据、原则、过程、特点、问题和对策,为提高我国蛋白质分离纯化水平提供参考。
- 陈华友张春霞马晓珂齐向辉
- 关键词：蛋白质分离纯化色谱
- 枯草杆菌重组水蛭素的冷冻干燥工艺及热稳定性研究被引量：2
- 2009年
- [目的]研究枯草杆菌重组水蛭素的冷冻干燥优化工艺及在酸碱中的热稳定性。[方法]测定不同填充剂、保护剂浓度组合下的共熔点,根据共熔点最高的原则确定其组合浓度,据此再设计水蛭素的冷冻干燥工艺。[结果]优化的冷冻干燥工艺为:填充剂浓度4%,保护剂浓度1.2%,共熔点为-30℃,装样量为3.0 ml,冷冻温度-40℃,冷冻时间2 h,升华干燥温度-32℃,升华时间24 h,再干燥温度25℃,时间5 h,活力回收为96.2%,含水量为1.48%。100℃时,酸性条件下,水蛭素非常稳定;加热结合碱性的条件下水蛭素才相当不稳定。[结论]可为进一步工业化冷冻干燥水蛭素研究提供借鉴。
- 陈华友耿旭齐向辉徐庆刚
- 关键词：水蛭素枯草杆菌共熔点冷冻干燥
