国家自然科学基金(81000887)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：张宁邢象斌李明马三梅王永飞更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院广州医学院暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- DOK2对胃癌细胞生物学行为的影响及其与胃癌预后的关系被引量：2
- 2015年
- 构建重组质粒pc DNA3.1-DOK2并转染胃癌细胞BGC823,采用平板集落形成、CCK8法和软琼脂克隆形成实验检测过表达DOK2基因对BGC823生物学行为的影响,并采用免疫组织化学法检测116例胃癌组织中DOK2蛋白的表达,分析其与胃癌临床病理学特征及预后的关系。结果显示,过表达的DOK2基因对BGC823细胞增殖有显著抑制作用。在所有胃癌组织中,DOK2蛋白低表达占62.93%,且其与胃癌浸润深度、淋巴结转移以及分化程度密切相关;DOK2蛋白的表达、胃癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移以及分化程度是影响患者预后生存时间的重要因素。
- 焦金霞王永飞李明杨洋张宁邢象斌马三梅
- 关键词：胃癌BGC823生物学行为预后
- 启动子甲基化致OPCML基因失活在胃癌发病中的作用被引量：4
- 2012年
- 目的探讨OPCML基因在胃癌细胞株中的失表达及其与基因启动子CpG岛甲基化的关系,并分析OPCML对胃癌细胞增殖的影响。方法 (1)实验组为胃癌细胞株(SGC7901、AGS、MKN28、MKN45、N87、KATOⅢ和SNU1),对照组为正常胃组织,分别采用RT-PCR检测两组细胞OPCML mRNA的表达。(2)用亚硫酸盐修饰正常胃组织的DNA和胃癌细胞MKN45的DNA,分别采用甲基化特异性PCR法检测OPCML基因启动子区甲基化情况。(3)实验组为药物处理组,即5-氮胞苷(5-AZA)去甲基化处理胃癌细胞MKN45,对照组为未经药物处理的MKN45,分别采用RT-PCR检测OPCML mRNA的表达变化。(4)RT-PCR检测转染OPCML表达载体及pcDNA3.1空载体后mRNA的表达情况。(5)实验组为OPCML表达载体转染胃癌细胞AGS,对照组为空载体转染胃癌细胞AGS,使用浓度为0.5 mg/mL的新霉素(G418)对转染细胞进行筛选,观察OPCML对胃癌细胞AGS集落形成的影响。结果 (1)在胃癌细胞株中OPCML mRNA的表达率显著低于正常胃组织。(2)胃癌细胞AGS和MKN45的甲基化程度明显高于正常胃组织。(3)5-AZA处理MKN45细胞后,OPCML表达上调。(4)OPCML表达载体转染HEK293A、AGS、MKN45细胞后,RT-PCR检测显示OPCML高表达。(5)外源性表达OPCML可抑制胃癌细胞AGS的集落形成率。结论 OPCML基因作为肿瘤抑制基因,在胃癌细胞中的表达下调。OPCML表达下调与该基因启动子区甲基化密切相关。药物性去甲基化处理能够恢复OPCML的表达。在表达沉默的AGS细胞中外源性表达OPCML,抑制集落形成率。
- 张宁许继德元刚陈洁陈旻湖邢象斌
- 关键词：胃癌细胞株OPCML基因甲基化
- OPCML在胃癌中的表达及对胃癌细胞生物学的作用被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨OPCML与胃癌临床病理学因素和预后的关系,并分析OPCML基因对胃癌细胞株AGS生物学行为的影响。方法:(1)免疫组织化学方法检测118例胃癌组织中OPCML蛋白的表达,并分析其与胃癌临床病理学特征和预后的关系。(2)RT-PCR法检测OPCML在正常胃粘膜组织及7株人胃癌细胞中基因的表达情况。(3)构建重组质粒pc DNA3.1-OPCML,转染至胃癌细胞株AGS中,采用CCK8法、平板集落形成实验分析OPCML表达上调对AGS生物学行为的影响。结果:(1)OPCML在胃癌组织中低表达的占68.6%,OPCML表达与胃癌浸润深度和分化程度密切相关(P<0.05);OPCML的表达、胃癌浸润深度、淋巴结转移和远处转移是影响患者预后生存率的重要因素(P<0.05)。(2)OPCML在胃癌细胞的mRNA表达水平显著低于正常胃粘膜组织。(3)RT-PCR显示pc DNA3.1-OPCML转染后AGS细胞株中OPCML mRNA表达水平明显升高,CCK8实验、平板集落形成实验均显示OPCML基因对AGS细胞增殖有显著抑制作用。结论:OPCML在胃癌发病中发挥肿瘤抑制作用,可能是一个新的胃癌预后评估的指标。
- 李明王永飞焦金霞杨洋张宁邢象斌马三梅
- 关键词：胃癌OPCML生物学行为
