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c-Abl蛋白酪氨酸激酶形成同源二聚体(英文)被引量：1: 2005年; cAbl是非受体酪氨酸激酶,它在细胞内被一些基因毒性的、氧化的及其它形式的压力所激活。目前研究证明:应用标记的cAbl发现其在细胞内可以相互形成同源二聚体,并且一分子cAbl的N末端区域与相应的另一分子的C末端相互作用形成二聚体。实验进一步表明:cAblSH3结构域结合到另一cAbl分子富含脯氨酸的C末端约958982氨基酸区域。如果去除cAbl富含脯氨酸的结构域,就会阻止二聚体的形成。这些结果首先证实了cAbl在细胞内可以相互形成同源二聚体,并暗示着二聚体的形成可能影响着cAbl活性的调节。; 魏玲刘萱易艳萍李楚芳王云龙曹诚; 关键词：C-ABL 相互作用同源二聚体

核孔蛋白p62促进非受体酪氨酸激酶c-Abl进入细胞核: 2005年; 非受体酪氨酸激酶c-Abl广泛表达于各组织细胞中,其序列高度保守,它的亚细胞定位与其功能密切相关。c-Abl借助其C端的3个核定位信号(NLS)和1个核输出信号(NES)完成细胞核-细胞质间的穿梭过程。关于c-Abl核-质穿梭的详细机制还不清楚。通过酵母双杂交系统,以人类Ib型c-Abl作为诱饵蛋白进行HeLa细胞cDNA文库的筛选,获得了可能在c-Abl核-质穿梭过程中具有调控作用核孔蛋白p62。核孔复合物(NPC)是大分子物质进行核-质运输的惟一通道,p62是NPC的重要组成部分,它位于中央通道内侧,在许多物质的核-质穿梭过程中具有调节作用。免疫共沉淀和体外结合实验证实,c-Abl和p62之间具有相互作用,而且这种相互作用是通过c-Abl的SH3结构域与p62的P299位点之间的结合实现的;p62可被c-Abl部分磷酸化。此外,在293和DKO细胞株中共转染c-Abl和p62,发现核内的c-Abl分布增多。以上结果表明,p62具有促进c-Abl进入细胞核的作用。; 黄维刘萱李平靳彦文李晓荣刘传暄马清钧曹诚; 关键词：C-ABL

RNA干扰(RNAi)及其在抑制HIV-1感染中的应用: 2005年; RNA干扰(RNA interfering,RNAi)现象是生物界近10年来最令人兴奋的发现,它是动植物抵抗外来病毒感染、抑制病毒复制的一种重要细胞保护机制.RNAi现象是一种序列特异性的、转录后基因沉默(post-transcriptional gene-silencing,PTGS)的过程,启动这个过程的双链(double-stranded,ds)RNA与被沉默基因在序列上是同源的,并在多种有机体中成为沉默基因表达的有力工具.近来已有实验证明:21～25个核苷酸的双链siRNA可以转染相关的细胞并抑制特异的RNA.在哺乳动物细胞中,30bp或更长的双链RNA可以导致干扰素效应,从而引发细胞内非特异反应,这也限制了RNAi作为实验手段和治疗工具的应用.然而,19～25个核苷酸长短且3'端有突出碱基的双链siRNA(small interfering RNA),在培养的哺乳动物细胞内可以以序列特异性的方式,有效地抑制基因表达.人们可以利用这种方法来抑制HIV-1对人类细胞的感染.体外实验表明,RNAi作为一种抗病毒的有力武器,将给病毒性疾病的基因治疗带来新的希望.; 魏玲刘萱曹诚; 关键词：RNA干扰基因沉默小干扰RNA

siRNA抑制HIV-1基因表达的研究被引量：7: 2006年; RNA干扰(RNAinterfering,RNAi)现象是动植物体内的一种序列特异性的、转录后基因沉默的过程.在哺乳动物细胞中,19～25个核苷酸长短的双链siRNA(smallinterferingRNA)可有效地抑制基因表达.利用pBS/H1SP载体,它表达的双链RNA的转录产物可以用来抑制特异性HIV-1基因的表达.在siRNA实验中,为了比较由H1启动子转录的siRNA在细胞内的作用,使用以绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的载体——pEGFP-C1质粒,在荧光显微镜下,很容易地看到EGFP在细胞中表达.将HIV-1siRNA表达载体与表达相应EGFP-HIV融合基因的质粒,共转染人胚肾293细胞,结果表明,和对照质控载体相比,转染了pHIV-siRNA质粒的细胞中EGFP-HIV的表达得到显著抑制.通过该途径,筛选出能抑制HIV-1基因表达的有效siRNA.此外,还在同一载体上表达两种或三种siRNA,分别针对不同的HIV基因,获得了良好的抑制效果.; 魏玲刘萱曹诚; 关键词：SIRNA 双链RNA 基因沉默

非受体酪氨酸激酶ARG与过氧化氢酶相互作用机制的初步研究: 2004年; 通过体外结合实验,发现Arg蛋白与过氧化氢酶之间有相互作用,且这种作用是通过Arg蛋白的SH3结构域和过氧化氢酶的P290FNP介导的。利用体外激酶分析和Western印迹证明Arg蛋白可以使过氧化氢酶磷酸化。本研究为过氧化氢酶的活性调控研究奠定了基础。; 李伟李平钟辉杨淑静马清钧曹诚; 关键词：过氧化氢酶蛋白活性氧

MUC1及其C端活性片段突变体具有抑制肿瘤的活性被引量：2: 2007年; MUC1蛋白翻译后成为一条多肽链,它很快在内质网被切割成2个亚基,形成稳定的异源二聚体.Cys-Gln-Cys(CQC)3个氨基酸位于MUC1C端亚基跨膜结构域与胞内结构域的连接处.研究发现,MUC1C端的CQCRRK结构域突变成AQARRK或使其缺失,突变体的致瘤性明显降低.表明:通过突变CQC→AQA来阻碍与C端亚基相关的二聚体化,可能成为肿瘤治疗的新途径.; 魏玲易艳萍刘萱DONALD KUFE曹诚; 关键词：MUC1 异源二聚体

hPLIC-2分子RNA干涉稳定细胞系的建立及鉴定被引量：2: 2006年; 目的:建立人源性泛素类似蛋白hPLIC-2(hum an prote in links IAP and cytoskeleton-2)knockdown稳定细胞系。方法:将RNA干涉载体稳定整合于MCF-7细胞中,建立hPLIC-2 knockdown细胞系。结果:从经抗性基因筛选的48个单细胞克隆中获得6个hPLIC-2表达被显著抑制的细胞克隆。结论:利用RNA干涉技术成功建立了hPLIC-2 knockdown稳定细胞系,为hPLIC-2分子的功能研究提供细胞模型。; 潘传英李楚芳刘萱陈宏曹诚; 关键词：RNA干涉细胞系

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国家自然科学基金(30270316)