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褐飞虱表皮蛋白基因NlICP的克隆及功能研究被引量：8: 2013年; 表皮蛋白与几丁质结合构成抵御外界不良环境的昆虫角质层,在昆虫的生长发育及蜕皮硬化中具有重要的作用。为了探讨表皮蛋白基因在褐飞虱Nilaparvata lugens生长发育中的功能,本研究根据褐飞虱转录组测序信息,对其中1个预测为编码表皮蛋白的Unigene36450序列进行了克隆,并应用荧光定量PCR和RNA干扰(RNAi)技术分别对该基因的表达规律和功能进行了研究。结果表明:克隆的Unigene36450全长cDNA开放阅读框长585bp,编码的蛋白含194个氨基酸,具有典型的表皮蛋白R&R保守结构域,命名为NlICP。转录水平的时序表达分析发现,NlICP仅在褐飞虱若虫期表达,且在3龄若虫体内表达量最高,提示该基因编码的蛋白属于幼虫表皮蛋白。RNA干扰结果显示,取食dsNlICP的1龄末2龄初(孵化后第3天)若虫在干扰6 d和8 d时,NlICP基因的表达量分别较取食dsGFP的对照组下降58.8%和45.6%,差异极显著(P<0.01);干扰后部分褐飞虱若虫因蜕皮不完全死亡,干扰5 d的存活率较对照下降26.7%。本研究结果提示,NlICP与褐飞虱若虫的生长发育及蜕皮相关,可以作为褐飞虱防治的潜在靶标基因。; 马艳郝培应陆潮峰俞晓平; 关键词：褐飞虱表皮蛋白表达谱 RNA干扰荧光定量PCR

三种稻飞虱体内类酵母共生菌18S rDNA和ITS-5.8S rDNA序列克隆及进化分析被引量：1: 2012年; 为研究水稻3种主要害虫灰飞虱Laodelphax striatellus、褐飞虱Nilaparvata lugens和白背飞虱Sogatella furcifera体内类酵母共生菌(yeast-like symbiotes,YLS)的种属地位及与寄主的进化关系,测定了其体内YLS的18S rDNA及ITS-5.8Sr DNA的全长序列。基于3种稻飞虱体内YLS的18SrDNA序列比对表明,褐飞虱YLS和白背飞虱YLS的一致性比其与灰飞虱YLS的高(褐飞虱YLS和白背飞虱YLS为98.91%,灰飞虱YLS和褐飞虱YLS为95.74%,灰飞虱YLS和白背飞虱YLS为96.02%),而基于ITS-5.8SrDNA序列比对,灰飞虱YLS和白背飞虱YLS的一致性比其与褐飞虱YLS的要高(白背飞虱YLS和灰飞虱YLS为99.57%,灰飞虱YLS和褐飞虱YLS为91.91%,白背飞虱YLS和褐飞虱YLS为90.46%)。基于真菌18SrDNA和ITS-5.8SrDNA的系统发育树均表明,3种稻飞虱体内YLS与其他已知真菌进化关系较远。本研究证实了昆虫真菌类共生菌与寄主形成了长期的进化关系,从而形成了不同于已知真菌的分类地位。; 周岩岩董胜张白旭俞晓平; 关键词：稻飞虱灰飞虱白背飞虱

灰飞虱Bursicon基因的克隆、序列分析及在不同发育阶段的表达被引量：2: 2012年; Bursicon是通过G蛋白受体调节昆虫表皮硬化及展翅的功能蛋白,它在昆虫蜕皮后的表皮硬化过程中起着关键作用。为探讨灰飞虱Laodelphax striatellus的bursicon的功能,利用RT-PCR和RACE技术克隆获得1126bp的bursicon α和761bp的bursicon β全长序列,将其分别命名为Lsburs-α和Lsburs-β。生物信息学分析表明:Lsburs-α开放阅读框长483bp,编码160个氨基酸,该蛋白具有2个N-豆蔻酰化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点以及2个蛋白激酶C磷酸化位点。Lsburs-β开放阅读框长417bp,编码138个氨基酸,该蛋白具有2个N-豆蔻酰化位点、3个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点以及1个酪氨酸激酶磷酸化位点。qRT-PCR结果表明:Lsburs-α和Lsburs-β在灰飞虱各龄期均有转录表达,并在若虫期随龄期增加呈上升趋势,在羽化期达到峰值,成虫期表达量逐渐降低。结果提示bursicon与灰飞虱蜕皮后的外表皮硬化关系密切。本文结果为深入研究bursicon的功能、受体调节和信号通路等奠定了基础。; 杨科许益鹏董胜张俞晓平; 关键词：灰飞虱 BURSICON 同源性分析基因表达实时荧光定量PCR

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浙江省自然科学基金(Z3100594)