深圳市科技局资助项目(200901008)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：苗北平卢永田林峰梁勇王晓彬更多>>
- 相关机构：深圳市第二人民医院深圳大学南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：深圳市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HRP/IAA酶前药系统抗鼻咽癌的实验研究
- 2011年
- 目的体外、原位实验观察HRP/IAA酶前药系统对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤效应,以探讨其对鼻咽癌的治疗作用。方法细胞转染获得稳定表达HRP蛋白的C666-1细胞。MTT法检测不同浓度的IAA对HRP表达阳性的C666-1细胞的杀伤效应。原位基因治疗:取5×106对数生长期的C666-1细胞接种裸鼠右腋下,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,接种细胞10d后将裸鼠随机分成3组,观察HRP/IAA酶前药系统对移植瘤生长的抑制作用。结果体外实验中,同一浓度IAA干预后C666-1/HRP(+)组细胞的相对存活率显著低于C666-1/HRP(-)组(P<0.05),且随着IAA浓度的升高C666-1/HRP(+)组细胞的相对存活率逐渐降低,分别为(15.58±1.12)%、(10.11土1.06)%、(5.21±1.04)%;原位基因治疗实验结果表明IAA组鼻咽癌移植瘤生长受到抑制,体积明显小于空病毒组和生理盐水组(P<0.05),且肿瘤细胞凋亡显著增多(P<0.05)。结论 HRP/IAA酶前药系统对鼻咽癌C666-1细胞具有杀伤作用,具有抗鼻咽癌的作用。
- 林峰苗北平卢永田
- 关键词：鼻咽癌基因治疗
- 重组adv5.oriP.HRP腺病毒载体构建及对EBV阳性鼻咽癌C666-1细胞株的靶向表达
- 2011年
- 目的:构建腺病毒载体adv5.oriP.HRP,观察其对EBV阳性鼻咽癌C666-1细胞株的靶向表达。方法:采用p△EIsp1A穿梭质粒系统,酶切、定向克隆方法构建含HRP自杀基因的p△EIsp1A/oriP-HRP重组质粒,在293细胞中进行重组腺病毒adv5.oriP.HRP包装、扩增、纯化与病毒滴度测定,体外转染EBV阳性鼻咽癌C666-1细胞株与EBV阴性鼻咽癌CNE-2Z细胞株,RT-PCR法检测不同细胞系中adv5.oriP.HRP的表达,Western blot法检测经不同浓度adv5.oriP.HRP转染后细胞中HRP蛋白的表达。结果:p△EIsp1A/oriP-HRP在293细胞中包装扩增后的病毒滴度为528@1012TCID50/L;体外转染鼻咽癌C666-1细胞株与CNE-2Z细胞株后,RT-PCR检测到C666-1细胞系1229bp处得明亮条带,而CNE-2Z细胞几乎未检测到重组基因mRNA的表达,Western blot可见随着MOI的增加C666-1细胞中HRP蛋白表达逐渐增多,而在CNE-2细胞中HRP蛋白的表达几乎呈阴性,两组间差别有统计学意义(P<0.05)。结论:重组腺病毒adv5.oriP.HRP能在EBV阳性的鼻咽癌C666-1细胞株内靶向性转染和表达。
- 林峰苗北平卢永田
- 关键词：腺病毒HRP鼻咽癌EBV靶向表达
- 顺铂增加BCL-2蛋白高表达的鼻咽癌细胞凋亡被引量：2
- 2013年
- 目的:通过对3种不同鼻咽癌细胞的BCL-2蛋白表达、细胞存活率和凋亡率的观察,探讨提高顺铂治疗鼻咽癌疗效的新方法。方法:采用Western blot技术检测3种不同鼻咽癌细胞CNE1、C666-1及SUNE1的BCL-2蛋白的表达情况;采用MTT法及流式细胞技术,检测并比较顺铂对3种鼻咽癌细胞的细胞存活率和凋亡率的影响。结果:BCL-2蛋白在CNE1及C666-1细胞上高表达,在SUNE1上几乎无表达(P<0.05);经顺铂干预后,CNE1及C666-1细胞的细胞凋亡率明显升高,存活率明显低于对照组(P<0.05);SUNE1细胞的细胞凋亡作用较弱(P<0.05)。结论:BCL-2蛋白在不同类型的鼻咽癌细胞上表达量不同,提示顺铂对BCL-2蛋白高表达的鼻咽癌细胞的杀伤作用更强。
- 林峰卢永田梁勇苗北平
- 关键词：鼻咽肿瘤BCL-2蛋白顺铂CNE1
- 辣根过氧化物酶/吲哚三醋酸酶前药对鼻咽癌细胞的杀伤作用被引量：1
- 2009年
- 目的研究adv5.oriP.HRP对鼻咽癌细胞靶向性转染和HRP/IAA对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法将adv5.oriP.HRP感染C666-1,KS1和CNE-2Z细胞,加入IAA,用MTT法评估细胞杀伤效果。建立乏氧有氧条件,检测HRP/IAA在乏氧状态下鼻咽癌细胞的杀伤能力及旁观者效应。结果adv5.oriP.HRP能靶向性在EBV阳性的鼻咽癌细胞内高效转染和表达。HRP/IAA对鼻咽癌细胞有强大的杀伤作用,在一定范围内杀伤能力随孵育时间和病毒载体及前药的浓度增高而增加。在乏氧状态下,HRP/IAA有同样的杀伤能力。当感染细胞占总细胞的10%左右时,65%的肿瘤细胞死亡,当比例达到20%时,90%以上的细胞死亡,显示HRP/IAA有很强的旁观者效应。结论adv5.oriP.HRP能在EBV病毒阳性的细胞内靶向性表达;HRP/IAA在乏氧和有氧状态下均有强大的杀伤能力和旁观者效应。adv5.oriP.HRP/IAA是理想的病毒介导的酶前药基因组合。
- 苗北平张蕊石孟庆国王晓彬孙焕吉林峰卢永田
- 关键词：旁观者效应
