国家自然科学基金(30270375)
- 作品数：24 被引量：150H指数：9
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- 相关机构：第三军医大学西南医院第三军医大学新桥医院第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 传代种植密度对人间充质干细胞增殖及成骨分化的影响被引量：7
- 2004年
- 目的 :研究人间充质干细胞 (mesenchymalstemcells ,MSCs)传代培养时 ,细胞种植密度对MSCs增殖及成骨诱导分化影响。方法 :将第 2代MSCs以 8× 10 3 /cm2 、 3× 10 3/cm2 、 8× 10 2 /cm2 密度接种 ,分析其生长曲线 ,并扩增培养 18d ,记录细胞扩增数量 ,再分析扩增后细胞的生长曲线和成骨诱导能力。结果 :人骨髓MSCs阴性表达ALP、CD3 4;在 8× 10 3/cm2 种植密度下 ,细胞倍增时间 40h ,18d后细胞数量扩增 (5 1± 13 )倍 ;在 3× 10 3 /cm2 种植密度下 ,细胞扩增 (2 8± 6)倍 ;在 8× 10 2 /cm2 种植密度下 ,细胞总数仅增加 (5± 3 )倍。在低密度下获得的细胞增殖能力强于高密度组 ,两组细胞均具有成骨诱导能力。结论 :种植密度对MSCs增殖有明显影响 ,快速扩增MSCs作为骨组织工程种子细胞 ,宜选择 8× 10 3 /cm2 种植密度。
- 段小军周跃杨柳林炎水陈光兴李忠
- 关键词：细胞生物学
- 可注射温固化支架复合异体软骨细胞修复关节软骨缺损的初步研究被引量：11
- 2006年
- 目的探讨可注射性温固化凝胶壳聚糖-甘油磷酸钠(C-GP)复合同种异体软骨细胞在体内形成透明软骨和注入关节腔后修复关节软骨缺损的可行性和有效性。方法将预制的壳聚糖和甘油磷酸钠按一定体积比制成混合液,实验组为支架复合同种异体软骨细胞,设单纯支架和生理盐水为两组对照。注入成年兔的背部皮下和预制关节软骨缺损的关节腔内,复合物在体内37℃形成凝胶,术后4、8、12周分别行大体、组织学(HE、TB)、Ⅱ型胶原免疫组织化学观察,并进行Wakitani评分。观察其体内成软骨和填充并修复关节缺损效果。结果液态C-GP复合物注入体内可形成凝胶,实验组皮下生长4周,组织学观察示典型的透明软骨样结构且分泌基质;C-GP复合细胞注入关节腔可很好地填充关节缺损,并于4周后开始形成透明软骨样结构且表面平整与宿主整合良好,组织学切片上可见类软骨形成并分泌甲苯胺蓝异染的软骨基质和软骨特异性Ⅱ型胶原。结论可注射性C-GP复合软骨细胞体内可形成具有一定形态功能的类软骨组织,能够应用于微创技术再生修复软骨的缺损。
- 王东武杨柳段小军李忠张洪鑫
- 关键词：软骨细胞甘油磷酸钠关节软骨
- 缺氧诱导因子-1α基因转染人间充质干细胞被引量：2
- 2005年
- 目的 将HIF 1α基因转染人间充质干细胞(hMSCs) ,并检测该基因在hMSCs中的表达。方法 构建含人缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)的重组逆转录病毒载体,制备含目的基因的重组逆转录病毒,感染hMSCs。采用RT PCR法检测HIF 1α基因的表达。结果 转基因hMSCs的HIF 1α表达水平较正常hMSCs明显增高。结论 HIF 1α基因成功转入hMSCs并被强制表达,为研究骨组织工程的血管化奠定了基础。
- 胡鸢杨柳段小军
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α基因转染间充质干细胞骨组织工程
- 胶原凝胶包埋软骨细胞复合聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸支架异体移植修复兔关节软骨缺损被引量：24
- 2005年
- 目的探讨胶原凝胶包埋软骨细胞复合聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸(CPPf/PLLA)支架异体移植修复兔关节软骨缺损的有效性和可行性。方法将胶原凝胶包埋的软骨细胞接种CPPf/PLLA支架构建的复合物体外培养3周,行倒置显微镜和扫描电镜观察,并将复合物异体移植入兔关节软骨缺损,术后4、8、12周取材,从大体、组织学和Ⅱ型胶原免疫组织化学对再生软骨组织进行评价。结果复合物体外培养3周,细胞被大量基质包裹,在支架内分布均匀;新形成的组织为透明软骨样组织、表面光滑且与周围组织整合良好、基质内有Ⅱ型胶原分布。结论胶原凝胶包埋软骨细胞接种CPPf/PLLA支架的方法能提高细胞支架复合物构建质量,胶原凝胶复合CPPf/PLLA支架可作为软骨细胞载体修复关节软骨缺损。
- 李忠杨柳陈光兴林炎水段小军
- 关键词：软骨细胞关节软骨缺损胶原凝胶异体移植聚磷酸钙纤维
- 胶原凝胶包埋软骨细胞接种CPPf/PLLA支架体外构建组织工程软骨被引量：5
- 2004年
- 目的探讨软骨细胞均匀、高效种植于三维支架的细胞接种方法。方法将胶原凝胶包埋的软骨细胞整合入CPPf/PLLA三维支架并进行体外培养,细胞计数检测细胞粘附情况,倒置显微镜观察细胞在支架内分布的均一性,组织形态学检测细胞-胶原凝胶-支架复合物形成软骨组织的情况。结果超过90%的种植细胞能有效、均匀种植于CPPf/PLLA支架,体外培养3周的复合物能形成较成熟的工程化软骨组织。结论胶原凝胶包埋软骨细胞三维接种能有效提高组织工程软骨的体外构建质量,同时结合了两种材料的优势。
- 李忠杨柳段小军陈光兴林炎水
- 关键词：软骨细胞胶原
- 新型组织工程化人工骨的体外初步构建(英文)被引量：4
- 2004年
- 背景:L-聚乳酸可以用于制备骨组织工程支架材料,但存在某些缺陷,能否复合聚磷酸钙纤维、Ⅰ型胶原来改善材料性能,从而找到新的组织工程化骨体外构建方法?目的:应用组织工程学技术,体外初步构建有活性的新型组织工程化人工骨。设计:体外构建细胞-材料复合体,自身对照前瞻性研究。地点和对象:本研究在解放军第三军医大学西南医院骨科和兰州铁道医学院复合材料研究所完成,对象为5例重庆市健康志愿者的髂骨骨髓。干预:培养、诱导人骨髓间充质干细胞向成骨细胞表型分化,制备性能优越的新型支架材料,再按一定的方法体外构建细胞-材料复合体。主要观察指标:细胞碱性磷酸酶染色的阳性率、扫描电镜观察组织工程化骨的微观结构。结果:由L-聚乳酸、聚磷酸钙纤维、Ⅰ型胶原制备出新型的骨组织工程复合支架材料,孔径300～450μm,孔隙率90.1%;细胞接种前碱性磷酸酶阳性率为(55±8)%,接种后细胞可在材料内良好贴附生长,碱性磷酸酶阳性率为(52±6)%,两者差异无显著性。结论:经成骨诱导的间充质干细胞,可以与由L-聚乳酸、聚磷酸钙纤维、Ⅰ型胶原制备的支架材料复合,在体外构建出组织工程化人工骨。
- 段小军杨柳周跃石宗利
- 关键词：人工骨体外生物医学工程生物相容性
- 种植密度、换液时间对人间充质干细胞原代培养时间的影响被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨不同种植密度、换液时间对人间充质干细胞 (hMSCs)原代培养时间的影响 ,从而确定原代培养hMSCs的适宜条件。方法 :分离人骨髓细胞 ,按不同种植密度、首次换液时间分组进行原代培养 ,记录原代培养时间 ,然后进行传代培养和成骨诱导培养 ,并检测细胞碱性磷酸酶、骨钙素、钙结节表达情况。结果 :hMSCs原代培养种植细胞密度为 1× 10 5～ 3× 10 5/cm2 ,4 8h后换液的方法较合理。经化学药物 (如地塞米松、β -甘油磷酸、维生素C)成骨诱导后 ,hMSCs表达碱性磷酸酶、骨钙素明显增加 ,并可形成钙结节。结论 :合理hMSCs原代培养方法 ,可以快速获得大量的自体种子细胞 ,从而为组织工程化骨的体外构建创造条件。
- 段小军杨柳林炎水陈光兴
- 关键词：间充质干细胞细胞培养骨组织工程
- 胶原凝胶包埋软骨细胞接种骨胶原基质支架体外构建组织工程软骨被引量：1
- 2005年
- 目的探讨复合应用胶原凝胶和骨胶原基质(BCM)支架作为软骨细胞载体体外构建组织工程软骨的有效性和可行性。方法将胶原凝胶包埋的软骨细胞接种BCM支架并在体外培养,应用倒置相差显微镜和扫描电镜观察软骨细胞的粘附、生长和增殖情况,培养14d,行HE、TB(甲苯胺蓝)染色观察软骨组织形成情况。结果软骨细胞在支架上粘附、生长和增殖良好,体外培养14d能形成较成熟的软骨组织。结论胶原凝胶复合BCM支架可作为软骨细胞的载体体外构建组织工程软骨。
- 李忠杨柳林炎水陈光兴
- 关键词：软骨细胞胶原
- 关节软骨组织工程研究进展被引量：9
- 2004年
- 李忠杨柳
- 关键词：关节软骨骨损伤种子细胞
- 骨组织工程关键技术的研究进展被引量：12
- 2003年
- 段小军杨柳何天佐
- 关键词：成骨细胞种子细胞骨组织
