中央高校基本科研业务费专项资金(GK200902033)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：齐浩张坤宋发奎孙润广陈文芳更多>>
- 相关机构：陕西师范大学西北大学更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 单细胞凝胶电泳联合原子力显微镜观测UVB诱导的细胞DNA损伤模式变化
- 2013年
- 目的:检测UVB诱导的真核细胞DNA损伤。方法:采用单细胞凝胶电泳与原子力显微镜。结果:不同照射剂量的UVB引起的真核细胞DNA损伤模式不同。在0～20 J/m2照射剂量范围内DNA无损伤;在20～360 J/m2照射剂量范围内DNA损伤程度加快;当照射剂量超过360 J/m2时DNA损伤速度减慢,实验组之间无显著性差异,出现"平台"。原子力显微镜的观察结果表明随着UVB照射剂量的增加,DNA结构的变化经历了断裂、交联与断裂并存的损伤增强趋势。当照射能量达到280 J/m2时细胞DNA大都形成断片,并相互交联在一起。这一结果表明彗星电泳检测到的UVB照射剂量达到一定剂量后,DNA损伤出现"平台"的原因可能是此时DNA发生了链内或链间交联。结论:不同照射剂量的UVB造成的细胞DNA损伤模式不同;原子力显微镜是一种比较直观的观测DNA损伤的方法。借助原子力显微镜我们可以深入了解单细胞凝胶电泳检测的原理,为DNA损伤检测提供更优良的检测手段。
- 张坤陈文芳任兆玉孙润广齐浩
- 关键词：单细胞凝胶电泳原子力显微镜细胞DNA损伤UVB
- 经多聚赖氨酸修饰后的云母表面形貌及细胞DNA的AFM观察
- 2011年
- 通过原子力显微镜(AFM)观察并分析多聚赖氨酸在不同浓度和不同修饰方式下云母表面的形貌,选择适于观察细胞DNA的最佳修饰条件.使用不同浓度的多聚赖氨酸对云母表面进行直接滴加和镀膜两种方式进行处理后,AFM观察其对云母表面形貌的影响以及DNA分子在修饰后的云母表面沉积情况.结果显示:多聚赖氨酸直接滴加至云母上时,其表面会形成大小不同的颗粒与聚集体;采用镀膜方式后,云母表面颗粒数量明显减少,颗粒粒度亦明显变小,经镀膜处理的云母表面更为平坦,表面平均粗糙度(Ra)更小;降低多聚赖氨酸浓度会使云母表面粗糙度减小,多聚赖氨酸浓度降至0.1μg/mL及以下时云母表面的粗糙度不再有明显变化.经0.1μg/mL多聚赖氨酸镀膜处理云母后,DNA分子在其上有较好的铺展.与直接滴加的方式相比,采用多聚赖氨酸镀膜方式处理云母表面,可降低粗糙度.0.1μg/mL多聚赖氨酸镀膜后,细胞DNA在云母表面分散较更好,适于AFM对DNA分子的观察和相关研究.
- 宋发奎张坤齐浩
- 关键词：原子力显微镜多聚赖氨酸
- 静磁场对人白血病细胞K562DNA的损伤模式研究被引量：1
- 2013年
- 【目的】研究静磁场处理对人白血病细胞DNA的损伤模式与损伤程度,为肿瘤细胞的物理治疗提供依据。【方法】以人白血病细胞K562为试材,对其进行8.8mT静磁场处理6,12,24,30,36h后,采用MTT检测细胞活力并对细胞进行计数,同时联合使用单细胞凝胶电泳以及原子力显微镜观测方法,分析经过静磁场处理后K562细胞DNA的损伤模式。【结果】K562细胞在8.8mT静磁场中处理24h,细胞生长受到抑制,细胞彗星尾长与对照相比有显著差异(P<0.05);处理时间延长到30h,尾部DNA含量和尾长与对照相比均有极显著性差异(P<0.01),表明随着静磁场处理时间的增加,K562细胞DNA的损伤模式与损伤程度发生变化。原子力显微镜观察结果显示,静磁场处理12h,K562细胞DNA已经发生损伤,细胞DNA分子的平均高度增加,平均长度减小;静磁场处理24h,DNA链变短变粗,小片段DNA明显增多,部分DNA发生断裂;静磁场处理36h,细胞DNA形态发生显著变化,DNA大部分断裂成小片段,小片段DNA之间相互交联成板状聚集体。【结论】8.8mT静磁场对K562细胞有杀伤效应,并且这种杀伤作用具有随处理时间延长而累积的效应。随着静磁场处理时间的延长,细胞DNA经历了解链-断裂-交联和断裂并存的变化过程,DNA损伤程度亦逐步加剧。
- 张坤陈文芳宋发奎卜婷刘亚妮孙润广齐浩
- 关键词：静磁场原子力显微镜单细胞凝胶电泳
