重庆市科委基金(2005AA5008-3)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：唐均英姚陈果郭飞赵雪王建更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆大学更多>>
- 发文基金：重庆市科委基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 纳秒级陡脉冲电场治疗裸鼠恶性黑色素瘤的疗效观察被引量：1
- 2013年
- 为观察纳秒级陡脉冲电场(nsPEFs)治疗绿色荧光蛋白标记的恶性黑色素瘤细胞裸鼠皮下瘤的疗效,本实验采用活体荧光成像技术检测治疗前以及治疗后48h、10d的皮下瘤荧光变化,组织学检测治疗后90d治疗局部效果。数码相机随访治疗后疤痕变化。结果显示,治疗组皮下瘤荧光强度及面积于治疗后48h大部分减少,至治疗后10d完全消失,对照组则逐渐增加。组织学证实治疗组治疗后90d治疗原位未见肿瘤细胞。皮下瘤治疗后治疗区域出现结痂,随时间推移,疤痕逐渐变浅。结果表明:nsPEFs可以有效治疗裸鼠恶性黑色素瘤,且疤痕少,操作简单,它可能成为浅表肿瘤临床治疗的一种新途径。
- 彭巧董守龙郭飞姚陈果唐均英
- 关键词：有效性绿色荧光蛋白人黑色素瘤
- 纳秒级脉冲电场对SKOV3细胞的凋亡诱导作用及对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:探讨纳秒级脉冲电场对SKOV3细胞的凋亡诱导作用及对凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达的影响。方法:以场强为50kV/cm,脉宽100ns,10、30、60或80个脉冲电场处理SKOV3细胞,以未经处理的SKOV3细胞为对照组,Annexin V/PI双染流式细胞仪检测早期凋亡;处理后6h,琼脂糖凝胶电脉法检测晚期凋亡;以50kV/cm,100ns,30个脉冲电场处理细胞,分别孵育0h,2h,6h,12h后提取总蛋白,Western blot法检测caspase-3活性片段、Bax、Bcl-2表达量的改变。结果:与对照组相比,纳秒级陡脉冲处理组细胞出现明显的磷脂酰丝氨酸(PS)外翻(P<0.05)且细胞膜保持完整,即Annexin V(+)/PI(-);凝胶电泳检测显示,处理组DNA呈明显的阶梯状分布;Western blot检测示,与对照组相比,处理组细胞内caspase-3活性片段、促凋亡蛋白Bax表达量显著增加(P<0.05),凋亡抑制蛋白Bcl-2表达量略降低,Bcl-2/Bax显著降低(P<0.05)。结论:纳秒级脉冲电场可通过caspase-3依赖凋亡途径,降低Bcl-2/Bax比值诱导SKOV3细胞凋亡。
- 文燕青唐均英姚成果
- 关键词：CASPASE-3BCL-2基因BAX
- 纳秒级陡脉冲诱导人卵巢癌细胞凋亡及对Fas介导的细胞凋亡通路的影响被引量：1
- 2012年
- 为探讨纳秒级陡脉冲(nsPEFs)对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用及Fas介导的细胞凋亡通路的影响,以场强为45kV/cm,脉宽分别为50、100和200ns,脉冲个数为30个的nsPEF处理的SKOV3细胞为实验组,以未经处理的SKOV3细胞为对照组,流式细胞术检测细胞晚期凋亡率和(或)死亡率,琼脂糖凝胶电泳法检测DNA Ladder,RT-PCR和Western blot检测细胞内Fas、FasL、caspase-8和Bid的表达量变化。结果显示与对照组相比,脉宽分别为50、100和200ns组细胞晚期凋亡率和(或)死亡率分别为(18.31%±0.65%)、(45.55%±3.71%)和(47.47%±7.01%),明显高于对照组(3.03%±0.57%)(P<0.05);琼脂糖凝胶电泳结果显示脉宽为50ns和100ns组有大量DNA ladder形成,而200ns组条带模糊;RT-PCR检测结果显示50ns、100ns组Fas、FasL、caspase-8和Bid mR-NA表达量均显著升高(P<0.05),200ns组mRNA表达量均显著降低(P<0.05);Western blot检测结果显示50ns、100ns组Fas、FasL、caspase-8和Bid蛋白表达量显著升高(P<0.05),200ns组蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。提示场强45kV/cm,脉宽为50ns、100ns的nsPEFs能诱导人卵巢癌SKOV3细胞发生凋亡,机理可能与Fas介导的细胞凋亡通路被激活有关。
- 夏如民唐均英赵雪郭飞王建姚陈果
- 关键词：细胞凋亡FASFASLCASPASE-8BID
- 纳秒脉冲电场可用于治疗裸鼠人恶性黑色素瘤被引量：5
- 2012年
- 目的观察纳秒脉冲电场(nsPEF)治疗裸鼠皮下人恶性黑色素瘤的效果及其机制。方法建立裸鼠皮下人黑色素瘤模型,随机分为:1)长期治疗组及对照组各10只,观察肿瘤生长、裸鼠存活率时间;2)短期治疗组(分2 h、4 d组)及对照组(分别为4、6和6只),以HE染色检查细胞形态,DNA琼脂糖凝胶电泳、TUNEL法分析细胞凋亡,Western blot和免疫组织化学法检测肿瘤组织BAX、BCL-2的表达。两组均用电场峰值40 kV/cm、脉冲宽度200 ns、频率1 Hz、脉冲次数1 000个的nsPEF进行治疗。结果长期治疗后即刻看到肿瘤区均变为灰白色,表面皮肤均没有出血现象,肿瘤质地变硬;随生存时间延长,肿瘤体积较对照组明显缩小(P<0.01);平均生存时间(60.6±6.9)d较对照组(17.7±5.4)d明显延长(P<0.01);短期治疗组,4 d时坏死区域增多;4 d时较对照组有明显"阶梯"状分布,凋亡率明显高于对照组(P<0.01),较对照组相比BAX表达明显增高(P<0.01)、而BCL-2表达明显降低(P<0.01)。结论 nsPEF对裸鼠皮下人黑色素瘤有明显的治疗效果,可能是通过调控BAX、BCL-2基因表达诱导细胞凋亡。
- 赵雪唐均英夏如民姚陈果郭飞王建
- 关键词：人黑色素瘤凋亡BAXBCL-2
- 纳秒脉冲治疗裸鼠皮下移植瘤抗癌机制研究
- 2013年
- 本研究探讨了纳秒级陡脉冲(nsPEF)对人恶性黑色素瘤A375细胞裸鼠皮下移植瘤模型可能的抗癌机制。通过用游标卡尺测量裸鼠皮下瘤大小,估算抑瘤率。用琼脂糖凝胶电泳、TUNEL法检测肿瘤细胞在纳秒脉冲电场下的细胞凋亡情况,并用HE染色观察细胞形态变化。通过免疫组化法检测瘤体内微血管密度MVD、微血管形态、血管生长因子VEGF和增殖细胞核抗原PCNA的表达。结果发现nsPEF治疗后4d肿瘤生长抑制率达42.6%,琼脂糖凝胶电泳显示治疗后2h组出现阶梯状分布,治疗后4d组阶梯状分布较之明显,对照组未见阶梯状分布;TUNEL法显示治疗组凋亡率均高于对照组,治疗后4d组凋亡率明显高于2h组(P<0.01)。脉冲处理后见肿瘤区即刻变为灰白色;HE染色发现治疗后2h组肿瘤见少许坏死区域、4d组肿瘤坏死区域增多;免疫组化检测发现治疗后4d组微血管腔闭塞状态、MVD、VEGF及PCNA表达较对照组及治疗后2h组明显增多(P<0.01),而对照组与治疗后2h组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明纳秒级陡脉冲可能通过诱导细胞大量凋亡,短时间内降低肿瘤血流量,降低细胞增殖能力并降低肿瘤血管形成和重塑以防止肿瘤再生等方面发挥其抗癌效应。
- 彭巧赵雪姚陈果唐均英
- 关键词：血管形成
