放射性药物教育部重点实验室开放基金(120204)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：任浩郑磊李前伟黄定德唐波更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院北京师范大学更多>>
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- 噬菌体展示肽库筛选VPAC1高亲和力结合多肽被引量：1
- 2013年
- 目的通过噬菌体展示肽库技术筛选VPAC1高亲和力结合十二肽配体,并进行特异性和亲和力鉴定。方法建立稳定表达VPAC1的真核细胞系;利用噬菌体肽库展示技术进行全细胞差减筛选,随机挑取40个噬菌体克隆进行测序,初步鉴定确定阳性克隆,明确外源十二肽序列,固相合成该十二肽;利用体外竞争结合ELISA及流式细胞分析,鉴定目标多肽与VPAC1受体结合的特异性及亲和力。结果成功构建稳定表达VPAC1细胞系;经过4轮差减筛选,回收噬菌体逐轮得到富集,随机挑取40个克隆测序,共得到15条序列不同的多肽,经ELISA鉴定有7个克隆与细胞有特异性高结合能力;阳性噬菌体克隆与细胞结合通过多肽VP1介导;VP1能特异高亲和地与VPAC1受体结合。结论通过噬菌体展示肽库技术成功筛选得到与VPAC1高亲和力特异结合十二肽。
- 唐波黄定德郑磊任浩李前伟
- 关键词：稳定转染噬菌体展示肽库分子探针
