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多孔化CLEAs催化降解壳聚糖制备活性低聚糖: 2018年; 针对传统交联酶聚体(CLEAs)催化大分子底物传质限制严重的问题,作者利用多孔化CLEAs(p-CLEAs)实现了壳聚糖酶法降解制备生物活性低聚糖。相同条件下p-CLEAs催化所生成还原糖量是游离酶的85%,是传统CLEAs的4倍。p-CLEAs所具有的多孔化结构造成了反应物相对分子质量和多分散性指数具有与游离酶催化不同的变化规律。通过控制酶解时间,结合超滤膜分离得到了相对分子质量为5 000~10 000的低聚糖产品,占总酶解产物质量的67.5%。抑菌性实验发现,当低聚壳聚糖(5 000~10 000)质量浓度为0.275 mg/m L时,对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌达到完全抑制。; 刘晓婧王梦凡齐崴齐崴何志敏; 关键词：木瓜蛋白酶壳聚糖低聚糖抑菌性

β-半乳糖苷酶磁性交联酶聚体的制备及性质研究被引量：3: 2016年; 制备了β-半乳糖苷酶磁性交联酶聚体,优化了制备条件,并对其酶学性质进行了系统研究.实验结果表明,最优的制备条件为,4.2 mg Fe3O4磁性纳米颗粒,20 mg/m L的BSA 2m L,吸附时间为1.5 h,β-半乳糖苷酶酶液50μL,沉淀剂为异丙醇,体积比为1∶1,沉淀时间1h,戊二醛体积分数为0.125%,交联时间1 h,在此条件下得到的β-半乳糖苷酶M-CLEAs酶活保留率为58.67%.扫描电镜观察显示β-半乳糖苷酶磁性交联酶聚体呈多孔结构,比表面积大.与游离酶相比,β-半乳糖苷酶M-CLEAs具有更加宽泛的催化温度和p H范围,同时表现出较好的重复利用性.; 孙槐胜邢肖肖齐崴王梦凡苏荣欣何志敏何志敏; 关键词：Β-半乳糖苷酶固定化

分子印迹光子晶体传感芯片的制备及对邻苯二甲酸酯类化合物的检测被引量：14: 2015年; 将光子晶体与分子印迹技术相结合,制备了一种反蛋白石结构的分子印迹光子晶体传感芯片,并将其应用于4种邻苯二甲酸酯类化合物的检测效果研究。分子印迹光子晶体传感芯片的制备过程包含3个步骤。首先,通过垂直沉降自组装方法制备Si O2蛋白石结构模版;随后,向蛋白石结构模板空隙中填充含有印迹分子邻苯二甲酸二异壬酯（DINP）的预聚液,引发光聚合;最后,移除Si O2结构模版及印迹分子,得到对邻苯二甲酸酯类化合物具有特异性识别功能的分子印迹光子晶体传感芯片。结果表明,传感芯片对待测物分子的识别过程可通过布拉格方程转换为可读的光学信号,当4种待测物浓度从1×10^-5mol/L增大到1 mol/L时,最大衍射峰位置发生20-40 nm的红移,且检测过程仅需6 min。检测芯片高度交联的聚合物结构令其具有较高的稳定性和重复利用性,5次检测后,芯片仍保持较好的传感性能。; 兰小波赵文斌王梦凡齐崴苏荣欣何志敏; 关键词：光子晶体分子印迹布拉格衍射

基于短肽自组装与共组装的纳米纤维人工水解酶被引量：1: 2015年; 将水解酶活性中心催化三联体氨基酸(His/Ser/Asp)引入9-芴亚甲氧羰基苯丙氨酸二肽(Fmoc-FF)双亲短肽序列中,利用短肽的自组装性能,构建了具有对硝基苯酚乙酸酯水解活性的超分子纳米纤维人工水解酶.研究结果表明,形成规则的纳米纤维结构是获得催化活性的必要条件.9-芴亚甲氧羰基(Fmoc)基团间的弱相互作用促使β-折叠二级结构的形成.通过对比天然水解酶的米氏动力学方程、最适催化温度及p H结果可知,所制备的超分子纳米纤维人工水解酶具有与天然酶相似的酶学性质.金属离子Ca2+和Ba2+对人工水解酶活性具有激活作用,而Mg2+,Ni2+,Co2+,Cu2+和Zn2+则抑制酶活性.; 吕昱琦王梦凡齐崴苏荣欣何志敏; 关键词：水解酶纳米纤维

青霉素酰化酶交联酶聚体的制备及热失活动力学被引量：4: 2014年; 以0.53 g/mL硫酸铵为沉淀剂,0.35%(体积分数)戊二醛为交联剂制得青霉素酰化酶交联酶聚体(CLEAs),酶活收率30.1%,其最适温度(57℃)比游离酶提高10℃,最适pH(10.0)向碱性偏移1.7个单位.对比游离酶及其CLEAs的热稳定性和热失活动力学模型发现,游离青霉素酰化酶制成CLEAs后,其热失活动力学模型由一步失活转变为连串失活,失活反应活化能由248.8 kJ/mol增加至549.2 kJ/mol,对CLEAs热稳定性大幅提高的原因进行了解释.CLEAs重复利用7次后,酶活保留56%以上,具有良好的重复利用性.; 慕洋洋甄倩楠王梦凡齐崴苏荣欣何志敏; 关键词：青霉素酰化酶固定化稳定性

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国家自然科学基金(21206113)