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国家高技术研究发展计划(2013AA065802): 作品数：15 被引量：44H指数：4; 相关作者：魏东陈娇敏李露闫文君张会贞更多>>; 相关机构：华南理工大学中国农业大学中国科学院更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：生物学环境科学与工程理学轻工技术与工程更多>>

小球藻Chlorella variabilis NC64A二酰甘油酰基转移酶基因的克隆表达与功能研究: 2016年; 为了揭示二酰甘油酰基转移酶(DGAT)在小球藻油脂合成过程中的作用,对单细胞小球藻Chlorella variabilis NC64A的二酰甘油酰基转移酶进行原核克隆表达及功能初步研究。结果表明,其编码序列为894bp,编码297个氨基酸,表达蛋白的表观分子量为33 k Da,p I 9.48。保守结构域分析表明,该蛋白属于Lysophospholipid acyltransferases(LPLATs)超家族,具有二酰甘油酰基转移酶活性,序列位点H68,L71,F76,R94,I97和GAA(144?146)组成特定的酰基受体结合口袋,能够结合酰基?酰基载体蛋白(ACP)或者酰基辅酶A上的酰基,催化三酰甘油合成的最后一步。表达蛋白与Ss PDAT和At PDAT的序列相似性分别为32%和24%,表明该蛋白可能具有磷脂酰甘油酰基转移酶(PDAT)活性,能利用磷脂上的酰基合成三酰甘油。因此,采用薄层层析方法以L-α-磷脂酰胆碱和1,2-二油酰-sn-甘油为底物,检测到其确实具有PDAT活性,表明限氮条件下NC64A中DGAT的PDAT活性可能促进了膜脂降解耦合三酰甘油的合成。; 杨金水高全秀李兆胜邢冠岚袁红莉; 关键词：CHLORELLA 三酰甘油克隆表达

微藻总脂含量快速测定的方法比较被引量：5: 2014年; 快速、可靠、简便的总脂含量测定方法在富油藻种筛选、功能性藻油评估及微藻生物学研究中至关重要。本研究以三种微藻(微绿球藻Nannochloris sp.、普通小球藻Chlorella vulgaris、绿色巴夫藻Pavlova viridis)藻粉为原料,系统比较了四种方法(Bligh-Dyer法、改良Bligh-Dyer法、ASTM标准法和皂化法)用于测定微藻中总脂含量的差异,并以原位转酯法为对照,进一步分析了各方法总脂提取物中的脂肪酸含量及组成。改良Bligh-Dyer法和ASTM标准法总脂测定结果稳定,脂肪酸回收率最高,三种藻粉中分别为93.65%和93.74%、85.02%和85.77%、88.62%和88.84%;两者总脂含量及提取物中脂肪酸的组成和含量均无显著差异(p>0.05)。显然,改良Bligh-Dyer法操作简便、分析时间短(1 h)、所需样品量少(0.25 g),可替代ASTM标准法,作为实验室快速准确测定微藻总脂含量的首选方法。; 魏东袁显渊向文洲; 关键词：微藻总脂脂肪酸皂化法

葡萄藻中烷烃化合物的GC-MS分析条件比较: 2014年; 通过单因素分析,对不同溶剂、温度和时间条件下提取葡萄藻微量藻粉中碳氢化合物的效果进行了比较,获得了最佳提取条件为:40 mg藻粉悬浮于正己烷中,超声处理(35℃,70 Hz)半小时后再于35℃下提取10 h,碳氢化合物得率最高,占藻粉干重的2.95‰。比较获得了GC-MS分析的程序升温优化条件,发现处于对数期的葡萄藻微量冻干藻粉中含量最高的碳氢化合物都是C22-C31长链烷烃,其组成与含量分别为:二十二烷(50.40μg/g)、二十四烷(209.17μg/g)、二十五烷(351.45μg/g)、9-辛基十七烷(472.38μg/g)、二十七烷(540.48μg/g)、二十八烷(542.24μg/g)、角鲨烯(473.60μg/g)、正三十一烷(306.86μg/g)。该提取和分析过程具有样品量少、时间短、得率高和操作简单的优点,可作为葡萄藻碳氢化合物分析检测的一种快速高效途径。; 魏东熊爽; 关键词：葡萄藻碳氢化合物

一株高生物量链带藻分离筛选与培养条件优化被引量：4: 2013年; 为了得到具有高生物量累积特性的微藻及其最优培养条件,从自然水样中分离筛选出一株生物量较高的微藻属,经18s rRNA及ITS1鉴定为链带藻属(Desmodesmus sp.),命名为EJ12-3。通过单因素试验及响应面分析对其培养条件进行优化,得到最大生物量累积的条件为:温度28℃,光照强度131μmol/(m2·s),光周期15∶9(光暗时间比),pH值为6,在此条件下,其培养14 d后的生物量累积可达(0.648±0.015)g/L。并得到这些环境因素对链带藻EJ12-3生长的交互影响,得到二次方程模型,该模型的拟合较好(R2为0.950),有一定的应用价值。; 季方郝睿刘颖李道义周宇光董仁杰

优化营养方式强化蛋白核小球藻生物量及蛋白质和叶绿素生产被引量：14: 2017年; 本文通过优化营养方式和培养条件,提高了蛋白核小球藻生物量及细胞内蛋白质和叶绿素含量。结果表明,葡萄糖浓度能显著影响蛋白核小球藻混养和异养生长的生物量浓度(p<0.05),但不同硝酸钠浓度影响不显著。在葡萄糖浓度50 g/L、硝酸钠浓度3.75 g/L条件下,小球藻异养培养4 d,即可达到最高生物量浓度为21.31 g/L,显著高于盐度15‰条件下混养所得最高生物量浓度(14.32 g/L)(p<0.05)。当葡萄糖耗尽,将小球藻细胞经含氮且不含糖的培养基适当稀释后进行光诱导培养,并优化硝酸钠浓度。发现在高异养细胞密度(11.09 g/L)下,采用硝酸钠浓度(3.75 g/L)和低光强(6,411±532 Lux)诱导培养藻细胞48 h,即可获得高蛋白质含量(54.10%)和高叶绿素含量(3.14%)的小球藻,相对于光诱导培养前,分别提高了207.74%和342.25%,蛋白质和叶绿素产率也显著高于单独混养或异养培养的最高值,分别达到1.32 g/(L·d)和0.09 g/(L·d)。; 魏东张会贞陈娇敏; 关键词：营养方式蛋白核小球藻蛋白质叶绿素

高密度接种胶球藻C-169处理脱色酵母发酵废水条件优化: 2018年; 本文探究了胶球藻C-169的营养方式,并在未灭菌的脱色酵母废水中高密度接种胶球藻C-169,系统比较了接种密度、废水浓度对胶球藻C-169的生长及其处理酵母废水效果的影响。结果表明,胶球藻C-169可以利用葡萄糖和蔗糖进行异养和混养生长。混养条件是胶球藻C-169快速扩种的最佳条件。在混养条件下,胶球藻生长速度最快,最适葡萄糖浓度为20 g/L。通过单因素实验研究培养条件(接种密度、废水起始浓度)对胶球藻C-169的生长和废水处理效果的影响,建立的最佳培养条件为:起始接种密度不低于1 g/L,脱色废水稀释倍数为2倍。在此条件下,胶球藻C-169的生物量产率为0.23 g/(L·d),脱色废水COD(化学需氧量)、总氮、总磷的去除率分别为49.54%、70.39%和98.09%。此研究表明胶球藻C-169在藻菌共生条件下对酵母废水的净化具有很大潜力。; 余宗苡闫文君魏东; 关键词：营养方式酵母废水去除率

基于高通量培养的胶球藻C-169生物量和油脂积累能力的快速评价被引量：2: 2016年; 本研究利用CO2培养箱内48孔板振荡光照培养专利设计的微藻高通量培养体系,结合细胞组学技术,系统评价了氮源和盐度梯度下胶球藻C-169细胞的生长速率、生物量浓度和油脂积累能力。结果表明,该培养体系的均一性和稳定性良好,可实现微藻的高通量及多处理培养。富氮培养基可显著提高胶球藻C-169的细胞生长速率和生物量浓度,缺氮培养基显著驱动了细胞积累中性脂。在含1/4氮的培养基中藻细胞的生物量浓度是4倍氮培养基中的25%,而中性脂含量（平均荧光强度表示）则高达后者的16倍以上。在015‰盐度范围内胶球藻C-169的生长状况良好且无显著差异（p〉0.05）,15‰以上盐度藻细胞生长受到明显抑制。10‰盐度下中性脂含量（以平均荧光强度表示）显著高于所有其他组（p〈0.05）,说明该盐度有利于驱动细胞积累中性脂。; 魏东李露; 关键词：氮源盐度细胞生长

不同碳源培养胶球藻C-169净化糖蜜酵母废水: 2019年; 本项目系统研究了三种碳源(CO_2、醋酸和甘油)添加到预处理后的糖蜜酵母废水,在藻菌共生条件下培养胶球藻C-169的生长情况及强化废水净化效果。结果表明,与通入空气相比,补充2%CO_2,能显著提高细胞的平均比生长速率、生物质产率,分别是通入空气的6.49、10.4倍,显著提高了对脱色废水的总氮、总磷和氨氮去除率(p<0.05),但降低了废水COD(化学需氧量)去除率。研究发现胶球藻C-169能够利用甘油作为其生长的碳源,在0～20 g/L甘油浓度时,随着甘油浓度的提高,细胞生长速率增大,总氮、总磷去除率提高,并在20g/L时获得最高生物量干重达到8.80g/L,平均比生长速率是不添加甘油的2.07倍,生物量产率达0.70 g/(L·d)。甘油浓度在15 g/L以上时,总氮、总磷去除率分别高达85%、95%以上,极显著地提高了废水COD(p<0.01)。添加1～4g/L醋酸,均会抑制胶球藻C-169的生长,降低废水净化效果。因此在使用C-169净化COD较高的废水时,可添加甘油作为其生长的碳源。; 余宗苡闫文君李焕凯魏东; 关键词：碳源去除率

两种微藻对高浓度酵母发酵废水中细胞耐受能力的比较被引量：1: 2013年; 本文研究了蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa，简称C. py）和二形栅藻（Scenedesmus dimorphus NIES-119，简称NIES-119）在异养生长中对蔗糖的耐受浓度，进而比较了对高浓度酵母发酵废水的细胞耐受性。结果表明，C. py和NIES-119在蔗糖浓度高达70 g/L的培养基中仍有高比生长速率（0.90 d-1和0.63 d-1），最大生物量浓度可达到3.37 g/L和2.84 g/L。酵母废水添加糖蜜后，COD可高达104~105 mg/L并伴随有总氮、总磷的高浓度，C. py和NIES-119在这类废水培养基中的最高比生长速率为0.43 d-1和0.42 d-1，最大生物量浓度可达到1.95 g/L和1.70 g/L，均极显著高于不加糖蜜的废水培养基中的最高值；同时，C. py对废水培养基中COD、总氮、总磷的最高去除率分别高达34.56%、20.00%和20.63%，NIES-119则分别高达21.46%、31.25%和16.11%。结果说明这两种微藻在耐受高浓度酵母废水、通过生长净化废水中都具有巨大潜力。; 魏东陈娇敏巴音克西克; 关键词：蛋白核小球藻栅藻异养生长

胶球藻C-169户外诱导培养积累脂肪酸和色素的研究: 2016年; 本研究分别采用Basal、BBM以及无氮磷添加的培养基,在户外开放跑道池中培养胶球藻C-169,系统比较了比生长速率、生物量浓度、脂肪酸和色素含量的差异。研究表明,胶球藻C-169在户外开放跑道池中,水温13-20℃下,生长良好。在第二阶段氮磷限制Basal、BBM培养基中的8 d,细胞处于生长的对数期,Basal培养基中平均比生长速率是BBM培养基的1.92倍,生物量干重浓度最高为0.22 g/L。第一阶段细胞在BBM、Basal两种培养基中亚麻酸含量可分别高达总脂肪酸含量的36.6%、53.9%;第二阶段在氮磷限制的BBM培养基中,亚麻酸占总脂肪酸的比例下降了32.4%,油酸的比例增大了38.5%;氮磷限制BBM培养基中细胞内总脂肪酸含量由起始的3.99%增大到18.18%。上述两种藻液以1：1混合培养5 d,平均比生长速率下降到0.0094 d^-1,总脂肪酸含量增大到20.2%。藻细胞中色素含量随着脂肪酸含量的增加而降低,呈明显的负相关。; 魏东闫文君; 关键词：脂肪酸叶绿素

国家高技术研究发展计划(2013AA065802)

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