国家教育部博士点基金(2000056916)
- 作品数：6 被引量：27H指数：3
- 相关作者：余学清李幼姬唐可京谢灿茂王碧飞更多>>
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- Akt/NF-κB信号途径参与免疫复合物诱导肾小球系膜细胞表达趋化因子被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨Akt/NF -κB信号途径在免疫复合物 (ICs)诱导肾小球系膜细胞 (MC)表达趋化因子中的作用。方法 :体外培养小鼠MC。对照组 :0 5 % (v/v)lipofectin作用 8h后IgG单体刺激 ;刺激组 :0 5 % (v/v)lipofectin作用 8h后AIgG(一种标准的ICs模型 )刺激 ;反义、正义、错义寡核苷酸组 :0 5 % (v/v)lipofectin转导Akt1反义、正义、错义寡核苷酸 8h后AIgG刺激。ELISA法检测单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP - 1)、巨噬细胞集落刺激因子 (CSF - 1)浓度 ,mRNA半定量用RT -PCR。EMSA法检测NF -κB活性。结果 :MC有低水平NF -κB活化和组成性MCP - 1、CSF- 1mRNA及蛋白表达。AIgG刺激后 ,NF -κB活化增强 (0 35± 0 0 6vs 0 75± 0 16 ,P <0 0 1) ,MCP - 1和CSF - 1mRNA表达上调 (0 4 8± 0 0 3vs 0 72± 0 0 2 ,P <0 0 5 ;0 4 4± 0 0 1vs 0 5 9± 0 0 2 ,P <0 0 5 ) ,蛋白分泌增多 (15 5 2±1 81vs 4 3 0 5± 3 18,P <0 0 5 ;389 0 6± 13 75vs 76 4 2 2± 31 78,P <0 0 5 )。Akt1反义寡核苷酸显著抑制AIgG诱导NF -κB活化 (0 37± 0 0 5vs 0 75± 0 16 ,P <0 0 1)、MCP - 1和CSF - 1mRNA(0 5 2± 0 0 2vs 0 72± 0 0 2 ,P <0 0 5 ;0 4 4± 0 0 1vs 0 5 9± 0 0 2 ,P <0 0 5 )?
- 王碧飞许韩师李幼姬李玉杰叶任高余学清
- 关键词：抗原抗体复合物巨噬细胞集落刺激因子
- Akt/NF-κB信号途径在免疫复合物诱导肾系膜细胞增殖中的作用被引量：7
- 2004年
- 目的 :观察免疫复合物 (IC)能否诱导体外培养的肾小球系膜细胞 (MC)增殖及其Akt/NF κB信号在其中的作用。方法 :实验设对照组、刺激组及Akt1正义 (SODN)、错义 (MSODN)与反义寡核苷酸 (ASODN)组。寡核苷酸组 :以lipofectin分别介导Akt1SODN、MSODN、ASODN转染MC 8h ;对照组和刺激组 :以lipofectin作用MC 8h。然后刺激组和寡核苷酸组均用聚合IgG(aggregatedIgG ,AIgG ,一种标准的IC模型 )刺激 ,对照组用等量的单体IgG刺激。用MTT比色法检测细胞的增殖 ,流式细胞术分析MC的细胞周期 ,RT PCR分析mRNA的表达 ,Westernblot检测蛋白的表达 ,电泳迁移率变动实验 (EMSA)检测NF κB的活性。结果 :IC可诱导MC中NF κB的活化 ,上调细胞周期蛋白cyclinD1的mRNA及蛋白表达 ,促进MC进入S期。Akt1ASODN可抑制Akt1蛋白的表达 ,抑制IC诱导的MC中NF κB活性 ,抑制cyclinD1mRNA及其蛋白的表达 ,进而抑制IC促进MC进入S期和增殖。Akt1SODN、MSODN则无上述抑制作用。结论 :IC可通过Akt/NF κB信号途径 ,介导体外培养的MC增殖。提示Akt/NF κB信号途径 ,可作为干预IC诱导MC过度增生的一个新的治疗靶点。
- 王碧飞许韩师李幼姬叶任高孔庆瑜余学清
- 关键词：AKTNF-KB肾小球系膜细胞免疫复合物
- Fractalkine/CX3CR1介导的肾小管上皮细胞对巨噬细胞的趋化作用被引量：3
- 2005年
- 唐可京李幼姬谢灿茂黄顺伟王碧飞余学清
- 关键词：CX3CR1趋化作用肾小管上皮细胞单核-巨噬细胞介导巨噬细胞浸润
- Fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎患者肾组织中的表达被引量：8
- 2007年
- 目的:研究Ⅳ型弥漫增殖型狼疮肾炎、轻微性肾小球病变及正常肾组织中趋化因子fractalkine及其受体CX3CR1的表达,以及与CD68阳性巨噬细胞表达之间的相互关系,探讨fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎发病中的作用。方法:Ⅳ型狼疮肾炎患者的肾活检组织21例,轻微性肾小球病变患者的肾活检组织18例,光镜下正常的肾组织标本8例。采用免疫组织化学技术检测肾组织中fractalkine、CX3CR1及CD68的表达。结果:(1)正常肾组织和轻微性肾小球病变肾组织中fractalkine基本未见阳性表达;其受体CX3CR1阳性细胞和CD68阳性巨噬细胞仅偶见于肾小球及肾皮质间质中。(2)Ⅳ型狼疮肾炎肾小球和肾皮质间质中CX3CR1阳性细胞和巨噬细胞显著增多,且两者的表达显示高度的相关性(分别为r=0.956,P<0.01和r=0.965,P<0.01)。(3)Ⅳ型狼疮肾炎肾组织中fractalkine高表达于皮质肾小管上,fractalkine阳性皮质肾小管的百分比分别与肾皮质间质CX3CR1阳性细胞数和巨噬细胞数之间高度相关(分别为r=0.720,P<0.01和r=0.770,P<0.01)。结论:提示fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎的发病机制中可能占有重要地位。
- 唐可京李幼姬谢灿茂祝胜郎陈文芳余学清
- 关键词：趋化因子类FRACTALKINECX3CR1狼疮肾炎
- 肾小管上皮细胞fractalkine的表达介导对巨噬细胞的趋化作用被引量：8
- 2005年
- [目的]探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导大鼠近端肾小管上皮细胞株NRK-52E上调表达趋化因子fractalkine的时间和剂量效应,并观察肾小管上皮细胞fractalkine表达是否介导了对巨噬细胞的趋化作用.[方法]应用免疫荧光细胞化学技术、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western印迹法检测TNF-α诱导的NRK-52E fractalkine表达,应用Transwell装置观察NRK-52E对大鼠巨噬细胞株RAW 264.7的趋化效应,以及fractalkine中和抗体对趋化效应的影响.[结果]正常培养的NRK-52E可表达少量的fractalkine,TNF-α(40 ng/mL)刺激后1 h,fractalkine的mRNA和蛋白表达增加尚不明显,在刺激后6 h表达即明显增加,持续至24～48 h.10 ng/mL TNF-α即可诱导fractalkine mRNA和蛋白表达增加,20 ng/mL及40 ng/mL TNF-α诱导fractalkine表达增加的效应更加明显.NRK-52E fractalkine表达上调可明显增强其趋化巨噬细胞的效应,而fractalkine中和抗体可明显抑制此种趋化效应.[结论]TNF-α能够以时间和剂量依赖方式上调肾小管上皮细胞fractalkine的mRNA和蛋白表达,且fractalkine在介导肾小管上皮细胞对巨噬细胞的趋化作用中起重要作用.
- 唐可京李幼姬谢灿茂黄顺伟李晓艳余学清
- 关键词：肾小管上皮细胞巨噬细胞趋化作用介导RT-PCR
- Defensin α1对大鼠系膜细胞增殖的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨defensin α1对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞株1097增殖的影响以及可能的机制。方法:利用MTT掺入观察不同浓度的基因重组人类defensin α1在不同作用时间对系膜细胞增殖的影响,选择能够刺激系膜细胞生长的浓度及作用时间给予U0126预孵育,观察能否阻断defensin α1促系膜细胞增殖作用,使用Western blotting了解defensin α1对系膜细胞ERK1/2磷酸化及Ⅳ型胶原合成的影响。结果:Defensin α1在3-20mg/L范围内对系膜细胞具有促生长作用,12h达到峰值(P<0.01)。当浓度大于20mg/L时可抑制系膜细胞的生长,浓度在15-25μmol/L U0126可以阻断defensin α1对系膜细胞的促生长作用。浓度为3mg/L defensin α1刺激5min后可使ERK1/2磷酸化明显增加,作用12h后系膜细胞的IV胶原蛋白表达高于对照组并持续到48h(P<0.01)。结论:一定浓度的defensin α1可以促进系膜细胞的增殖和细胞外基质的合成,这种促增殖作用可能是通过MAPK途径实现的。
- 张益民叶任高李幼姬李晓艳王昌云余学清董秀清
- 关键词：肾小球系膜细胞细胞增殖
