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河南省医学科技攻关计划项目(2011010012)
作品数:
1
被引量:1
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相关作者:
吕慧芳
陈小兵
罗素霞
王新锋
马一杰
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相关机构:
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2013
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5-氮杂胞苷调控TIP30基因表达对人结直肠癌细胞氟尿嘧啶敏感性的影响
被引量:1
2013年
【摘要】目的探讨5-氮杂胞苷(5-Aza—dC)对结直肠癌细胞中TIP30基因表达的影响,并探讨其与氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的关系。方法5-Aza—dC处理结直肠癌HCT116细胞,采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测TIP30基因启动子CpG岛甲基化状态,逆转录PCR检测TIP30 mRNA表达,Western blot法检测TIP30蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HCT116细胞对5-Fu的敏感性。结果未经5-Aza—dC处理的HCT116细胞中,TIP30基因启动子完全甲基化。5-Aza—dC处理HCT116细胞3d后去除5-Aza—dC,HCT116细胞TIP30基因非甲基化产物阳性,启动子去甲基化。随着5-Aza—dC去除时间的延长,HCT116细胞中TIP30基因启动子甲基化产物和非甲基化产物均为阳性,即启动子部分甲基化,部分非甲基化;去除5-Aza-dC第10天,TIP30基因启动子甲基化产物阳性,TIP30基因启动子重新甲基化。未经5-Aza—dC处理的结直肠癌HCT116细胞TIP30 mRNA和蛋白不表达。5-Aza—dC处理结直肠癌HCT116细胞3d后去除5-Aza—dC,TIP30mRNA和蛋白表达明显增强。随着5-Aza-dC去除时间的延长,TIP30mRNA和蛋白表达水平逐渐降低,第10天达到最低水平。在5-Aza-dC处理前、5-Aza-dC处理后去除5-Aza-dC的第0、10天,5-Fu作用于HCT116细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为41.62、33.17和4.96μg/m1。结论TIP30基因表达差异可能与其启动子甲基化状态有关,且TIP30基因启动子甲基化差异与结直肠癌细胞对化疗药物的敏感性相关。
陈小兵
陈贝贝
李剑
王新锋
马一杰
罗素霞
吕慧芳
关键词:
结直肠肿瘤
5-氮杂胞苷
氟尿嘧啶
敏感性
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