国家自然科学基金(30740077)
- 作品数：3 被引量：31H指数：2
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- 禽波氏杆菌单因子血清的制备及血清分型的探索
- 禽波氏杆菌病主要是由禽波氏杆菌引起的一种高度接触性传染病,利用波氏杆菌的14个菌株分别制备相应的抗血清,然后对抗血清进行交叉吸收试验,得到Ⅰ型和Ⅱ型2种单因子血清,不同血清型的单因子血清不与其他血清型菌株发生凝集。利用这...
- 马荣德朱瑞良郭文龙朱明华孙寅剑
- 关键词：禽波氏杆菌血清型
- 文献传递
- 2种益生菌菌体OMP对新城疫病毒免疫增强作用被引量：1
- 2009年
- 为研究乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌菌体OMP的免疫增强作用,本试验利用超声波细胞粉碎器破碎、TritonX-100处理技术提取了乳酸杆菌与地衣芽孢杆菌OMP,通过考马斯亮蓝G-250法测得两者菌体OMP含量,进行了SDS-PAGE电泳检测,然后将提取的菌体OMP以不同的方式、含量作为免疫增强剂与新城疫病毒尿囊液混合后再与油佐剂以1∶3比例制备成免疫原,免疫7日龄雏鸡,通过持续10周的抗体检测、外周淋巴细胞比例(A)及白细胞吞噬指数(B)检测,判断菌体OMP对新城疫病毒具有免疫增强作用。结果,乳酸杆菌与地衣芽孢杆菌菌体OMP含量分别为2 323.5、867.6 mg/L;SDS-PAGE电泳试验得出分子量分别为6.4×104、8.6×104的乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌菌体OMP蛋白含量多,带的颜色较深,为起主要作用的蛋白;各试验组HI抗体效价免疫保护期远远高于单独使用新城疫LaSota株灭活油苗的对照组及空白组,差异显著(P<0.01或P<0.05);各试验组外周淋巴细胞比例(A)及白细胞吞噬指数(B)均高于单独使用新城疫LaSota株灭活油苗的对照组及空白组,差异显著(P<0.01或P<0.05);同时还可以得出菌体OMP含量越高则HI抗体效价、淋巴细胞比例(A)、白细胞吞噬指数(B)均增高;不同菌体OMP混合免疫增强作用高于单独使用一种菌体OMP。由此表明乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌菌体OMP能显著增强ND疫苗的免疫效果,为今后研制免疫效果更好地ND疫提供了技术支持。
- 王小娥朱瑞良杨春晓崔金生肖海军王允超岳寿松
- 关键词：乳酸杆菌地衣芽孢杆菌外膜蛋白新城疫病毒免疫增强作用
- 兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其免疫原性检测被引量：8
- 2008年
- 2004年,山东省某一大型养兔场的20~30日龄幼兔突然大批发病死亡。病兔早期精神不振,多数病兔鼻腔流出脓性鼻液,随着病程的延长逐渐表现为呼吸困难,并出现鼻鼾声,以体况瘦弱,腹泻为主要症状。从中主要分离到4株细菌,根据其形态学特性、培养特性、生化特性、血清学反应特性等将分离菌鉴定为兔支气管败血波氏杆菌。然后对所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株进行(G+C)mol%含量的测定以及16SrRNA的扩增,结果(G+C)mol%含量为61.7%~62.4%,与Kersters K结果相符(61.6%~62.6%);而该菌16SrRNA核苷酸序列与GenBank中收录的AF177666株禽波氏杆菌核苷酸序列同源性为82.7%,与本实验室保存的禽波氏杆菌及兔败血波氏杆菌参考菌株S80103株同源性高,分别为99.7%和99.9%。利用所分离到的兔支气管败血波氏杆菌菌株制备免疫原,通过免疫孕前母兔,使仔兔获得母源抗体,而使幼仔兔获得早期保护,效果较好。
- 王伟朱瑞良李新苍胡晓娜王永花
- 关键词：波氏杆菌免疫
- 奇异变形杆菌与沙门氏菌双重PCR检测方法的建立
- 偏简单目的:建立快速检测奇异变形杆菌与沙门氏菌的双重PCR方法。方法:根据奇异变形杆菌尿素酶合成的正向调节因子R基因(ureR)和沙门氏菌属侵袭性抗原保守基因(invA)设计特异性引物,建立其双重PCR检测方法,并对反应...
- 王慧朱瑞良谭燕玲魏凯王新建孙振红盛鹏程
- 关键词：奇异变形杆菌沙门氏菌双重PCR
- 文献传递
- 泰山松花粉多糖对小鼠免疫增强作用的研究
- 为研究泰山松花粉多糖对健康小鼠免疫功能的增强作用以及对免疫抑制小鼠的免疫恢复作用。本研究选取160只20 g～24 g的清洁级昆明小鼠(雌性),随机分为8组,3个多糖组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),3个环磷酰胺(CTX)-多糖组(Ⅳ、...
- 魏凯朱瑞良孙振红谭燕玲王慧王新建
- 关键词：环磷酰胺抗体免疫增强淋巴细胞IGA
- 多重PCR检测三种重要食源性致病菌方法的建立及应用被引量：22
- 2011年
- 【目的】建立快速检测奇异变形杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌3种食源性致病菌的多重PCR方法。【方法】根据奇异变形杆菌尿素酶合成的正向调节因子R基因(ureR)、沙门氏菌侵袭性抗原保守基因(invA)和单核细胞增生李斯特氏杆菌编码溶血素O(LLO)的hlyA基因,分别设计3对特异性引物,对单基因PCR和单管多重PCR扩增的特异性、敏感性分析以及建立L16(43)正交试验对单管多重PCR扩增条件,如引物浓度、Tm值、模板量等的优化,建立快速检测奇异变形杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌的稳定的单管多重PCR方法。【结果】针对奇异变形杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌3种食源性致病菌所设计的3对引物分别能扩增出374、724和215 bp的目的条带,具有高度特异性,反应条件优化后,3种目的菌在105 CFU/mL均可同时扩增出较清晰条带(奇异变形杆菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌在104 CFU/mL浓度下仍然可见到条带),比单基因PCR低一个稀释度,并且人工模拟试验和市售食品试验检测结果稳定。【结论】该方法操作简单、快速、特异性强和灵敏度高,能够实现对奇异变形杆菌、沙门氏菌和单核细胞增生李斯特氏杆菌3种食源性致病菌的快速诊断检测和监控。
- 王慧朱瑞良谭燕玲魏凯王新建孙振红盛鹏程
- 关键词：奇异变形杆菌沙门氏菌多重PCR检测
- 鸡奇异变形杆菌外膜蛋白的抗血清制备及其荧光标记抗体检测方法的建立
- 为建立鸡奇异变形杆菌(P.mirabilis)直接荧光标记抗体检测方法,本研究采用改良的方法提取了奇异变形杆菌OMP。以该OMP免疫健康新西兰家兔制备兔抗鸡奇异变形杆菌OMP高免血清,制得纯化的IgG,用FITC标记得到...
- 朱明华朱瑞良王慧孙寅剑马荣德谭燕玲魏凯王新建郭文龙
- 关键词：奇异变形杆菌外膜蛋白荧光抗体
- 文献传递
- 规模化肉种鸡场胚胎性细菌病的多重感染
- 为了解近年来造成规模化种鸡场鸡胚死亡率增加、孵化率降低的主要病原菌因素及多重感染的情况。本研究对山东某3个大型肉种鸡场17日龄～19日龄的死亡鸡胚进行细菌分离鉴定,经形态特性、生化特性、血清学试验及23S rRNA测序分...
- 谭燕玲朱瑞良王慧魏凯孙振红王新建
- 关键词：鸡胚禽波氏杆菌
- 文献传递
- 运用23S rRNA对禽波氏杆菌分离株的进化分析
- 为分析波氏杆菌分离株的进化特点,本研究通过PCR反应扩增分离保存的8株禽波氏杆菌、3株兔支气管败血波氏杆菌及1株猪支气管败血波氏杆菌菌株的23S rRNA基因的片段(710 bp),分别克隆到载体pMD18-T,然后测序...
- 谭燕玲朱瑞良马荣德王慧魏凯王新建郭文龙朱明华
- 关键词：禽波氏杆菌PCR基因分析
- 文献传递
