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小鼠Boule蛋白与Crem3′UTR结合并调节其表达: 2012年; 目的研究小鼠Boule蛋白与精子成熟相关基因Crem之间的相互作用,揭示Boule蛋白在精子发生过程中所起的作用。方法构建pGEX-Boule表达载体,将表达载体转化宿主菌(BL21)感受态细胞,诱导纯化出Boule蛋白,应用RT-PCR和凝胶滞后实验(EMSA)分析与Boule蛋白结合的mRNA。结果表达载体pGEX-Boule构建成功,纯化出GST-Boule融合蛋白,RT-PCR和EMSA实验证明Boule蛋白能够结合Crem3′UTR。结论 Boule蛋白能够结合Crem3′UTR,可能通过调控Crem蛋白的表达作用于精子发生过程。; 林昌海曾梅陈述卢亦路马用信; 关键词：EMSA RNA结合蛋白

细菌双杂交筛选肿瘤细胞中与人生物钟蛋白PER1相互作用的蛋白被引量：3: 2015年; 目的筛选肿瘤细胞中与生物钟分子振荡系统的重要组成部分PERl蛋白（period circadian protein homolog1）相互作用的蛋白质分子，为生物钟基因在肿瘤发生发展过程中的功能研究提供条件。方法应用细菌双杂交技术与人宫颈癌Hela细胞cDNA文库，以pBT为载体，构建pBT-PERl融合表达诱饵质粒，与pTRG连接的人宫颈癌HeIa细胞cDNA文库质粒共转化双杂交系统报告菌株，利用培养基的特殊选择性，筛选出阳性克隆并测序分析。结果筛选出14个蛋白编码基因，其中4个包含完整的蛋白编码序列，包括与线粒体动力学相关的OPA3蛋白，与铜代谢相关的CUTA蛋白，与细胞运动、定位等细胞事件相关的蛋白，与物质合成、代谢等生物化学反应相关的蛋白，还有在信号转导中发挥作用的相关蛋白。结论肿瘤细胞中与PER1蛋白存在潜在相互作用新蛋白的筛选和鉴定为研究人生物钟基因PERI在肿瘤发生发展中的功能提供了条件。; 张宇姚有林蒋思远卢亦路刘运强陶大昌张思仲马用信

Znf45I通过调节TGF-β信号通路影响早期造血发生: 目的探讨新一类C2H2型锌指蛋白家族成员ZNF45在早期造血发生中的功能和分子遗传机制。方法以模式生物斑马鱼为模型,通过显微注射、基因过表达和沉默、原位杂交、免疫印迹等技术研究斑马鱼znf45-like(znf451)蛋...; 陈惠娟孙华钦陶大昌刘运强杨元张思仲马用信; 关键词：TGF-Β 斑马鱼胚胎; 文献传递

人急性淋巴细胞白血病细胞株T细胞电转染条件的优化被引量：7: 2011年; 目的优化人急性淋巴细胞白血病细胞株细胞(Jurkat T细胞)的电转染条件。方法采用电穿孔的方法,将pEG-FP-C1导入Jurkat T细胞中,通过改变电转时的电压来检测细胞存活率,调节电压、细胞密度、电转质粒数、电转缓冲液,通过流式细胞仪检测质转染效率。结果电转条件在电压140 V、细胞密度107个/毫升、质粒数30μg、电转缓冲液为优化培养基时,电转染效率可达(79.2±3.21)%。本研究为外源基因电转染Jurkat T细胞提供了可靠的试验参数依据。结论本实验通过优化Jur-kat T细胞电转染条件能够有效地提高Jurkat T细胞的电转染效率。; 江雪杨平李玥赵少志马用信; 关键词：电转染转染效率 PEGFP-C1

斑马鱼胚胎显微注射基因分析平台的建立: 2012年; 斑马鱼作为一种新的理想模式动物,已在发育生物学、环境毒理学和人类疾病及相关基因功能等研究中得到广泛应用。本文就建立斑马鱼胚胎的显微注射基因分析平台进行了探究,并通过piwil2基因的抑制和过表达实验验证了平台的可操作性,也对建立平台中所要注意的问题进行了讨论。; 陶大昌陈惠娟赵君马用信; 关键词：斑马鱼显微注射

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国家自然科学基金(31070676)