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脂阿拉伯甘露聚糖的提纯及其对肺结核的诊断价值被引量：2: 2011年; 目的初步建立提取纯化结核分枝杆菌(M.TB)脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomanan,LAM)的方法,并将其用于血清标本检测,评价其对肺结核的诊断价值。方法 M.TB菌体经冰浴超声破碎,乙醇回流,DNase I酶RNase酶除去DNA和RNA,热酚水法去蛋白,氯仿甲醇去酚和脂质,得到粗制的脂多糖。经Sephacryl-100凝胶过滤层析分离纯化,得到LAM。将其作为抗原,通过免疫金渗滤法检测涂阳肺结核和对照血清标本中的LAM抗体。结果所得LAM经SDS-PAGE银染,与对照标准品大小一致,为37 kDa。血清LAM抗体检测对肺结核诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、和涂片符合率分别为91.7%、87.8%、92.7%、86.2%、90.2%。结论成功提取到LAM抗原,用其检测血清结核抗体显示出理想的敏感性和特异性,有望成为结核病血清学快速诊断方法之一。; 彭荣乐军金瑞良景玲杰韩敏; 关键词：脂多糖类

抗结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖ELISA的建立及其临床应用被引量：1: 2011年; 目的提取纯化结核分枝杆菌(MTB)脂阿拉伯甘露聚糖(LAM),建立抗LAM抗体(LAM-IgG)检测的酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法 MTB菌体彻底破碎后,去除蛋白、脂质、核酸,得到粗制的脂多糖。经Sephacryl-100凝胶过滤层析分离纯化,得到LAM。以该LAM作为间接ELISA的包被抗原来检测血清中的LAM抗体。结果所得LAM经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)银染,与对照标准品大小一致,为37 000。115例肺结核患者LAM抗体阳性率71.3%;92例非结核肺部疾病患者假阳性率11.9%;188名健康体检者假阳性率3.2%。敏感性71.3%,特异性93.9%。结论本研究成功提取到LAM抗原,此抗原可作为间接ELISA的包被抗原用于结核抗体的检测。; 彭荣金瑞良胡忠义; 关键词：脂阿拉伯甘露聚糖结核分枝杆菌抗原酶联免疫吸附试验

一种单平面电极阵列结构的介质上电润湿数字微流控器件被引量：1: 2010年; 一种高介电常数(K=7.6～11.6)的有机铁电聚合物材料——偏氟乙烯与三氟乙烯共聚物首次作为介质层用于介质上电润湿效应的数字微流控器件.在30 V的外加电压下,液滴与器件间的固-液接触角可以从118°下降到75°,并且呈现明显的电压极性相关性.基于此现象,设计并制作了新型的单平面电极阵列结构的数字微流控器件,简化了器件结构和工艺流程,整个工艺步骤可以与集成电路工艺兼容.新型器件成功实现了3μL的液滴的往返运输,工作电压只需20 V.; 赵平安周嘉刘冉; 关键词：介质上电润湿

结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-Rv3425基因片段融合蛋白的表达与纯化被引量：2: 2011年; 目的克隆表达结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-Rv3425基因片段融合蛋白并纯化,测抗原的免疫原性,为结核病的临床诊断提供有效的候选抗原。方法利用生物信息学分析免疫优势位点,设计不同引物,采用聚合酶链反应(PolymeraseChain Reaction,PCR)扩增出相应基因片段,插入pET30a表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达目的蛋白,亲和纯化后用H37Rv免疫的兔血清进行间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定其免疫原性。结果 PCR扩增的CFP10、ESAT6和Rv33425基因片段与基因文库(Genbank)报道的完全一致。三者在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达的产物约为22kDa,与预计大小相吻合。Ni-NTA亲和纯化出目的蛋白。ELISA显示该蛋白具有较强的免疫原性。结论结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-Rv3425融合基因片段的融合表达纯化后,可作为结核病免疫诊断的一个候选抗原。; 吴兴福孙战强徐明; 关键词：分枝杆菌结核 CFP10 ESAT6

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国家科技重大专项(2008ZX10003003)