广东省自然科学基金(S2012040006483)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 相关作者：陈规划华学锋焦国华高洪丽张志光更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院深圳市龙岗区人民医院中山大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CISD2抑制舌癌AW13516细胞增殖效果的实验研究
- 2015年
- 目的探讨CISD2对人舌鳞状细胞癌AW13516细胞增殖能力的影响及其相关机制。方法采用CISD2-si RNA慢病毒表达载体及空载体对照质粒感染人舌癌AW13516细胞建立SI组、NC组,并设立未感染对照(CTRL)组。蛋白质印迹法(Western blot)检测CISD2、c-myc、Bax、Bcl-2蛋白表达。采用CCK-8实验检测细胞增殖能力,琼脂集落形成实验检测细胞集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,裸鼠皮下移植瘤模型检测体内增生能力。3组比较采用单因素方差分析。结果 SI组CISD2蛋白的表达量较CTRL组明显降低。SI组24、48、72 h时吸光度(A)值分别为0.258±0.013,0.291±0.022,0.342±0.025,与CTRL组比较差异具有统计学意义(t=13.26,15.84,25.33,P<0.05)。SI组细胞的琼脂集落形成数量为(6.2±0.5)个/孔,明显低于CTRL组的(56.3±2.8)个/孔,差异有统计学意义(t=22.38,P<0.05)。SI组细胞的凋亡率为(53.22±3.13)﹪,高于CTRL组(4.71±0.42)﹪,差异有统计学意义(t=35.71,P<0.05)。SI组与CTRL组比较,c-myc、Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2/Bax比率降低。裸鼠皮下移植瘤生长第30天时,SI组的肿瘤体积(231±15)mm3明显小于CTRL组的(859±42)mm3,差异有统计学意义(t=64.77,P<0.05)。结论下调CISD2后可能通过降低c-myc蛋白表达及下调Bcl-2/Bax比值等机制抑制人舌鳞状细胞癌的增殖能力。
- 焦国华阚智慧高洪丽吴贽张志光
- 关键词：舌肿瘤RNA干扰细胞增殖
- 肿瘤相关成纤维细胞在肿瘤发生、发展中的作用被引量：2
- 2013年
- 肿瘤主要由肿瘤细胞和肿瘤问质组成。其中肿瘤问质主要包括免疫细胞、成纤维细胞及血管内皮细胞和细胞外基质（extracellularrnatrix，ECM）。与正常组织不同，肿瘤间质常具有炎症细胞数目增多、成纤维细胞活化及ECM成分改变等特点。肿瘤间质内活化的成纤维细胞被称为肿瘤相关成纤维细胞（carcinoma－associated fibroblasts，CAF）。
- 华学锋张琪陈规划
- 关键词：肿瘤相关成纤维细胞肿瘤发生血管内皮细胞细胞活化细胞外基质免疫细胞
- miR-214对人肝细胞癌增殖能力影响的体外实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨微小RNA(mi R)-214对肝细胞癌(肝癌)增殖能力的影响及其相关机制。方法应用终浓度50 nmol/L的mi R-214模拟物mimics及其阴性对照mimics分别转染MHCC97L肝癌细胞建立M214组、阴性对照组(NC214组),另设未转染对照组(Ctrl组)。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测3组肝癌细胞mi R-214含量。采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测细胞增殖抑制率,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法(Western blot)检测c-myc、Bax、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白表达。3组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果 M214组MHCC97L细胞mi R-214的含量为Ctrl组的(2 536±7)倍,差异有统计学意义(LSD-t=58.75,P<0.05)。M214组24、48、72 h时细胞增殖抑制率分别为(15.33±0.62)%、(24.07±0.75)%和(41.02±0.91)%,与Ctrl组比较差异有统计学意义(LSD-t=14.64,19.87,31.86;P<0.05)。M214组细胞平板克隆形成数量(5.3±0.7)个/孔,明显低于Ctrl组的(37.1±1.0)个/孔(LSD-t=-12.51,P<0.05)。M214组细胞凋亡率(42.1±3.2)%明显高于Ctrl组的(7.0±0.7)%(LSD-t=35.66,P<0.05)。M214组c-myc、Bcl-2蛋白表达量降低,Bax蛋白表达量升高。结论mi R-214可能通过下调c-myc蛋白表达及Bcl-2/Bax比值抑制人肝癌细胞的增殖能力。
- 郭明明蔡锐彬邹德志赵坤刘江辉
- 关键词：肝细胞细胞增殖细胞凋亡
- 肝癌相关成纤维细胞对肝细胞肝癌影响的实验研究被引量：6
- 2013年
- 目的探讨肝癌相关成纤维细胞(hCAF)对肝细胞肝癌(肝癌)转移的影响。方法分别将hCAF和正常成纤维细胞(NF)培养2~3 d,行免疫荧光染色,观察hCAF和NF细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞表面蛋白(FSP)、成纤维细胞活化蛋白(FAP)、波形蛋白(vimentin)的表达情况。通过hCAF与MHCC97L-绿色荧光蛋白(GFP)、HepG2-GFP肝癌细胞共培养及划痕实验,观察hCAF对肝癌细胞的形态变化的影响及其对肝癌侵袭转移能力的作用。结果 hCAF和NF细胞均表达α-SMA、FSP、FAP、vimentin,但hCAF表达α-SMA与FAP的水平明显高于NF。hCAF与肝癌细胞共培养至96 h,MHCC97L-GFP细胞生长由典型的抱团样成簇生长,变成分散呈播散样生长;HepG2-GFP细胞由多角形的上皮细胞形态转变为长梭形的间质细胞形态。MHCC97L-GFP、HepG2-GFP肝癌细胞与hCAF共培养5 d后划痕明显较NF组缩小。结论 hCAF能加速肝癌细胞发生类似上皮细胞间质转型的变化,增强肝癌细胞侵袭转移能力。
- 华学锋李团结贾昌昌陈冠中郭宇邱东波台艳张琪陈规划
- 关键词：成纤维细胞肿瘤转移平滑肌肌球蛋白膜蛋白质类
- NAF1基因对舌鳞状细胞癌细胞增殖转移能力的影响被引量：3
- 2014年
- 目的使用小干扰RNA（si RNA）干扰舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中营养缺乏自噬因子1（NAF1）的表达,观察对NAF1基因的沉默效果,并测定沉默后Tca8113细胞生长增殖侵袭能力的变化。方法建立小干扰RNA（si-NAF1）组、阴性对照（si-NC）组、对照（vector）组。采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法和Western blotting法检测NAF1、细胞周期素D1（cyclin D1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）的表达。MTT实验检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell法观察各组细胞侵袭能力变化。结果与vector组相比,NAF1-si RNA干预Tca8113细胞后,si-NAF1组NAF1的m RNA和蛋白表达水平都明显降低（χ^2=25.65,t=-17.1,P〈0.05）,cyclin D1、MMP-2蛋白表达水平降低（tcyclin D1=-14.7,tMMP -2=-9.6,P〈0.05）,细胞增殖能力明显降低（t=-36.77,P〈0.05）,克隆形成能力明显减弱（t=-12.33,P〈0.05）,侵袭能力明显降低,si-NAF1组穿过Transwell膜的细胞少于vector组。结论通过si RNA技术降低NAF1表达可能通过降低cyclin D1水平抑制舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的增殖能力,通过影响MMP-2蛋白表达水平,抑制Tca8113细胞的侵袭能力。
- 焦国华阚智慧高洪丽张志光
- 关键词：舌肿瘤RNA干扰
