教育部留学回国人员科研启动基金(2004-176)
- 作品数：17 被引量：170H指数：6
- 相关作者：孟继鸿陈利生董晨周永淳徐竞更多>>
- 相关机构：东南大学广西医科大学第一附属医院第三军医大学大坪医院更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金国家自然科学基金广西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学农业科学金属学及工艺更多>>
- 鱼藤酮帕金森病大鼠模型蛋白酶体活性的研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究鱼藤酮对大鼠大脑蛋白酶体活性的影响。方法采用健康Wistar雄性大鼠,建立鱼藤酮帕金森病模型,对实验组和正常对照组大鼠的黑质区和海马区蛋白酶体的活性进行测量,蛋白酶体活性测定通过蛋启酶体与其3种荧光底物反应,采用荧光分光光度计测量反应物荧光强度而定。结果实验组黑质区蛋白酶体 3种活性与对照组相比,蛋白酶体的postacidic活性明显下降(P<0．05),chymotryptic,tryptic活性有极明显下降 (P<0．01);海马区的postacidic活性无明显下降,chymotryptic,tryptic活性有极明显的下降(P<0．01);鱼藤酮处理前后黑质区和海马区3种活性下降程度比较,postacidic活性下降值差异无显著性意义(P>0．05),chymotryptic, tryptic活性下降值差异均有极显著性意义(P<0．01)。结论鱼藤酮对大鼠的黑质区及海马区的蛋白酶体的活性均有损害作用,但对黑质区的损害作用更明显。
- 黄丹翊王涛梁直厚冯媛乔娴孙圣刚
- 关键词：鱼藤酮蛋白酶体活性帕金森病
- 结直肠癌中抑癌基因ING1的表达及其意义被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨p33ING1在结直肠癌中的表达及意义。方法:应用免疫组化S-P法检测60例结直肠癌组织及相应正常黏膜组织中p33ING1的表达。结果:结直肠癌组织、相应正常黏膜组织中p33ING1蛋白的阳性表达率分别为43·3%(26/60)、100%(60/60)。p33ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组癌组织中的阳性表达率分别为57·6%(19/33)、25·9%(7/27)(P<0·05);在Dukes A、B期、Dukes C、D期病例中分别为56·7%(17/30)、30·0%(9/30)(P<0·05)。结论:p33ING1在结直肠癌组织中低表达,在结直肠癌的发生、发展中可能起重要作用。
- 梁君林周永淳陈利生
- 关键词：结直肠肿瘤ING1基因免疫组织化学
- 钙失敏在大鼠失血性休克血管低反应性中的作用被引量：14
- 2005年
- 目的观察血管平滑肌钙失敏在大鼠失血性休克(HS)血管低反应性中的作用。方法 取失血 性休克大鼠肠系膜上动脉(SMA),利用离体血管环张力测定技术,以血管环对梯度浓度去甲肾上腺素(NE) 的收缩力反映血管反应性,用去极化状态下(120 mmol／L K+)血管环对梯度浓度Ca2+的收缩力反映血管的 钙敏感性,观察失血性休克低反应血管是否存在钙敏感性降低以及钙敏感性调节剂血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、 胰岛素以及Rho-激酶特异性抑制剂Fasudil是否可以通过调节钙敏感性来调节血管反应性。结果 失血性 休克后SMA对NE的反应性和钙敏感性均显著下降,表现为NE的量-效曲线明显右移,NE的最大收缩力 (Emax)和-lg[EC50](pD2)降低(P<0.05或P<0.01);Ca2+的量一效曲线明显右移,Ca2+的Emax和pD2降低 (P<0.05或P<0.01)。具有钙敏感性增强作用的Ang Ⅱ(10-9mol／L)可使NE和Ca2+的量-效曲线左移,使 NE和Ca2+的Emax增高(P<0.05或P<0.01)。而具有钙敏感性抑制作用的胰岛素(100 nmol／L)可使NE 和Ca2+的量-效曲线右移,NE和Ca2+的Emax降低(P<0.05或P<0.01).Fasudil预处理可消除Ang Ⅱ对 NE诱导的血管收缩反应的增强效果,降低钙敏感性。结论 失血性休克血管平滑肌细胞存在钙敏感性降低. 血管平滑肌细胞钙敏感性降低在失血性休克血管低反应性的?
- 徐竞刘良明
- 关键词：失血性休克NECA^2+低反应性收缩力
- 线粒体DNA1555位点和GJB2基因及SLC26A4基因的诊断方法及临床应用被引量：94
- 2005年
- 目的建立常见耳聋基因如线粒体DNA(mtDNA)1555位点、GJB2基因、SLC26A4(Pendren′ssyndromegene,PDSgene)基因突变的临床检测方法。方法来自门诊的散发耳聋患者367例,有母系家族遗传史耳聋患者60例(27个家系),来自聋哑学校的先天性聋患者20例,来自门诊经高分辩CT证实双侧前庭水管扩大患者3例,无感音神经性聋病史的对照个体50例。应用线粒体基因A1555G突变检测试剂盒检测线粒体基因1555位点的突变情况;针对20例语前聋患者进行GJB2全序列分析;针对3例大前庭水管综合征的患者,应用变性高效液相色谱技术进行SLC26A4基因的全部外显子筛查,出现异常波形之外显子行序列分析。结果在26个家系的59例患者和5例散发患者中发现mtDNAA1555G突变;20例先天性聋中发现2例GJB2235delC纯合突变,酶切加测序发现1例235delC+299-300delAT复合突变,均为先天性聋的肯定原因,另外2例具有109G-A杂合突变;3例大前庭水管综合征患者的变性高效液相色谱技术筛查均发现包含第7、8外显子的扩增子具有异常波形,测序证实1例为杂合的SLC26A4G316X突变;另2例为919-2A-G纯合突变。结论耳聋基因诊断具有显著的临床意义,可操作性强,在不远的将来耳聋的基因诊断可能会正式列为耳科临床检测项目。
- 戴朴于飞康东洋张昕刘新米文宗曹菊阳袁慧军杨伟炎吴柏林韩东一
- 关键词：基因GJB2基因线粒体基因变性高效液相色谱技术
- 结直肠癌中抑癌基因ING1的表达研究
- 2006年
- 目的探讨抑癌基因ING1及其蛋白p33/ING1在结直肠癌中的表达。方法用RT-PCR检测35例散发性结直肠癌中ING1mRNA的表达水平,并应用S-P法检测60例散发性结直肠癌及正常黏膜组织中p33/ING1蛋白的表达。结果结直肠癌组织、正常黏膜组织中p33/ING1蛋白阳性表达率分别为43.3%(26/60)、100%(60/60),两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。p33/ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组中的阳性表达率分别为57.6%(19/33)、25.9%(7/27),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。在DukesA、B期和DukesC、D期患者癌组织中p33/ING1的阳性表达率分别为56.7%(17/30)、30.0%(9/30),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论ING1及p33/ING1蛋白的低表达与散发性结直肠癌发生、发展密切相关,临床分期越差者表达水平越低。
- 张森韦建宝周永淳陈利生
- 关键词：抑癌基因ING1结肠肿瘤直肠肿瘤
- N-(4-乙烯基)苄基咪唑共聚物的合成及与钴卟啉络合物的氧结合性能被引量：1
- 2006年
- 研究了N-(4-乙烯基)苄基咪唑单体及其与甲基丙烯酸辛酯共聚物(PBIOM)的合成与表征,以及咪唑基有机或聚合物配位体与钴卟啉(CoP)络合物的氧结合性能.合成的PBIOM重均分子量和咪唑基含量分别由GPC和元素分析方法测定,结果为3.4×105和57 mol%.PBIOM或苄基咪唑(BIm)中的咪唑基与CoP在溶液中配位,得到的CoP-PBIOM或CoP-BIm络合物具有快速、可逆的氧结合特性.相同氧气分压下CoP-BIm络合物在三氯甲烷溶液中的氧结合百分率略大于CoP-PBIOM络合物.CoP-PBIOM络合物固体膜的氧结合亲和力大于三氯甲烷溶液中的氧结合亲和力.60℃下CoP-PBIOM固体膜的氧结合半衰期为40.7 h,而CoP-BIm固体膜为8.8 h,表明聚合物配位体显著提高了CoP络合物的氧结合寿命.
- 申屠宝卿刘群翁志学西出宏之
- 关键词：钴卟啉
- 一种新型戊型肝炎病毒样颗粒的表达、纯化及其免疫原性被引量：18
- 2006年
- 目的：以非包涵体形式表达含戊型肝炎病毒（HEV）中和抗原表位的新型HEV重组蛋白,并对其进行鉴定和分析.方法：将HEV开放阅读框架2（ORF2）编码452～617位氨基酸的基因片段连接到载体pET28a（＋）,转化大肠杆菌,获取表达克隆.以Ni-NTA层析柱纯化表达的蛋白,并用SDS-PAGE、Western blot和直接电镜负染等方法分析鉴定,最后免疫小鼠检测特异性抗体的产生水平.结果：表达的重组蛋白天然可溶,相对分子质量（Mr）约为22 000,并可形成直径为20 nm左右的病毒样颗粒,能与戊型肝炎患者血清发生Westem blot阳性反应,免疫小鼠后可诱导产生高滴度的特异性抗体.体外中和试验显示产生的抗体具有中和HEV的活性.结论：原核表达的、含HEV中和抗原表位的、长度仅166个氨基酸的HEV ORF2近3＇端编码蛋白能够形成病毒样颗粒,而且该新型病毒样颗粒具有良好的抗原性和免疫原性.
- 董晨孟继鸿
- 关键词：戊型肝炎病毒重组蛋白病毒样颗粒
- 载体和基因片段的选择对戊型肝炎病毒基因免疫抗原表达的影响被引量：6
- 2006年
- 目的比较不同载体和不同大小的目的基因片段对戊型肝炎病毒(HEV)基因免疫抗原表达的影响,为基于HEV中和抗原表位的HEV基因免疫提供一定的依据。方法将含Ⅳ型HEV中国株中和抗原表位的p166和p179片段编码基因分别克隆入pTR421和pCDNA3.1两种真核表达载体,用脂质体介导基因转染HepG2人肝癌细胞系,经间接免疫荧光和Western blot分析以及将质粒注射小鼠局部肌肉组织后经免疫组织化学染色检测,分析目的基因在体内外的表达水平。结果成功构建了pTR421-166、pTR421-179、pCDNA3.1-166和pCDNA3.1-179四种重组质粒,经限制性内切酶双酶切和核苷酸测序鉴定,编码基因正确无误;pTR421-179转染的细胞以及注射小鼠的局部肌肉组织可以检测到p179的表达,而pCDNA3.1-179、pCDNA3.1-166以及pTR421-166均检测不到目的基因在体内、外的抗原表达。结论载体和目的基因片段的选择显著影响HEV抗原在体内、外的表达,直接关系到基因免疫的成功与否。
- 房雪峰王立新孟继鸿董晨田华翟理杰
- 关键词：戊型肝炎病毒基因免疫基因表达
- 妊娠相关糖蛋白对E型选择素介导的内皮细胞黏附作用研究
- 2006年
- 目的:本实验旨在探讨高度纯化的羊水和孕妇血清人绒毛膜促性腺激素(human chrionic gonadotropin,hCG)和glycodelin对E型选择素介导的HepG2细胞与内皮细胞黏附过程的影响。方法:以色谱仪分离和纯化羊水和血清的hCG和glycodelin,进一步测定[51Cr]标记的肝癌细胞系-HepG2细胞在不同来源、不同浓度hCG和glycodelin作用下和经过白细胞介素-1β(IL-1β)刺激后表达E型选择素的内皮细胞的黏附能力,从而评价这两种糖蛋白对E型选择素介导的内皮细胞黏附过程的影响。结果:羊水和血清hCGs能有效抑制E型选择素介导的内皮细胞黏附,其抑制作用呈浓度依赖关系,IC50分别为1·5×10-7mol/L和2·1×10-7mol/L,相对抑制力分别为纯四糖结构sialyl-Lewisx(sLex)的1·5×104和1·1×104倍;羊水和血清glycodelin同样有此作用,其IC50分别为3·2×10-6mol/L和6·3×10-6mol/L,相对抑制力分别为sLex的7·2×102和3·7×102倍;纯四糖结构sialyl-Lewisx(sLex)的IC50为2·3×10-3mol/L。结论:妊娠相关糖蛋白hCG和glycodelin是E型选择素介导的内皮细胞黏附的有效抑制物。
- 王晓玉林绍强屈洋Jeschke UStahn R
- 关键词：人绒毛膜促性腺激素GLYCODELINE-选择素细胞粘附
- ROS介导TGF-β1诱导的大鼠系膜细胞纤维蛋白溶酶活性变化被引量：3
- 2004年
- 目的 :观察转化生长因子 - β1(TGF - β1)对系膜细胞纤维蛋白溶解酶原激活物抑制物 - 1(PAI- 1)表达和纤维蛋白溶酶活性的影响 ,并探讨反应性氧自由基 (ROS)的作用。方法 :以体外培养的大鼠系膜细胞为对象 ,应用TGF - β1刺激 ,部分实验中应用还原型谷胱甘肽消耗剂BSO [DL -buthionine - (S ,R) -sulfoximine]或抗氧化剂NAC(N -acetylcysteine)进行干预处理。应用荧光素法测定细胞产生ROS量 ;应用Westernblot法检测PAI- 1蛋白表达 ;应用RT -PCR和Northernblot检测PAI- 1mRNA表达 ;应用合成的荧光素纤维蛋白溶解酶底物测定纤维蛋白溶解酶活性。结果 :外源性TGF - β1可显著增加大鼠系膜细胞产生ROS ,并上调细胞PAI- 1蛋白和mRNA的表达以及降低纤维蛋白溶解酶活性 ;BSO可增强TGF - β1诱导的系膜细胞PAI- 1mRNA的表达 ;而NAC可显著地逆转由TGF - β1诱导的PAI- 1mRNA表达的上调和纤维蛋白溶解酶活性的下降。结论 :TGF - β1可促使系膜细胞产生ROS ,ROS作为信号传递分子介导了由TGF - β1诱导的系膜细胞PAI-
- 姜宗培陈雄辉杨念生张海燕余学清
- 关键词：纤溶酶系膜细胞
