广东省自然科学基金(04009360)
- 作品数：8 被引量：44H指数：4
- 相关作者：徐辉雄吕明德汤庆聂芳岳殿超更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院广州医学院第一附属医院兰州大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科委重点攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 低频超声照射SonoVue对绿色荧光蛋白质粒在小鼠肝癌移植瘤中表达的作用
- 2008年
- 目的 研究物理参数对体内基因转染率的影响，确定最佳剂量-效应关系。方法建立小鼠（C57BL／6J）肝癌皮下移植瘤模型，经尾静脉注入绿色荧光蛋白质粒（pEGFP）和SonoVue混合物，给予不同辐照声强（1W／cm^2、2w／cm^2、3w／cm^2）、辐照时间（1min、5min、10min）以及不同剂量SonoVue（30μl、60μl、90μl）。流式细胞仪和荧光显微镜检测肿瘤细胞内绿色荧光蛋白表达。结果pEGFP在肿瘤组织内的表达随辐照时间、辐照声强、造影剂剂量的增加而增多，持续增加辐照时间、声强和造影剂剂量并不能有效增加其转染率，2W／cm^2[（21．02±1．45）％]、5min[（23．22±1．91）％]、60plSonoVue[（21．02±1．45）％]时，pEGFP在肿瘤组织内的表达达到最大。结论不同物理参数对体内基因转染率有明显影响，2W／cm^2、5min、60μlSonoVue的参数条件下，可达到最佳剂量-效应关系。
- 聂芳徐辉雄吕明德王瑛汤庆
- 关键词：造影剂基因转移技术肝肿瘤
- 声诺维(Sono Vue)增强超声辐照对HepG2细胞膜通透性的影响被引量：17
- 2005年
- 目的 探讨超声辐照对人肝癌细胞株HepG2 细胞通透性的影响以及声学造影剂声诺维(SonoVue)的增强作用。方法 用连续多普勒超声辐照人肝癌细胞株HepG2,超声发射频率1.9 MHz,软组织热指数(TIS)为0.8,增益设定为80%,输出声强(ⅠSATA)为80.0 mW/cm2,辐照时间均持续60 s。照射时添加或不添加超声造影剂声诺维(SonoVue)。用流式细胞仪检测细胞荧光染色阳性的阳性率。结果 荧光染色阳性细胞的百分率:无超声辐照组或单纯添加SonoVue组分别为(3.06±1.57)%和(1.4±0.04)%,经超声辐照后为(23.72±14.4)%,添加SonoVue辐照后显著增加至(54.78±43.6)%(均P<0.05)。结论 超声辐照能改变HepG2细胞膜通透性,添加超声造影剂后能显著增强这种作用,有希望成为肿瘤分子生物学治疗的介导手段。
- 岳殿超徐辉雄吕明德汤庆李宝金向邦德
- 关键词：空化效应膜通透性
- 微泡造影剂联合超声介导KDR启动子-胸苷激酶基因靶向血管治疗小鼠肝癌被引量：2
- 2007年
- 目的 评估微泡造影剂SonoVue联合超声辐照介导KDR启动子-单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（HSV—TK）系统（KDR—TK）结合更昔洛韦（GCV）靶向血管治疗小鼠肝癌的有效性。方法 建立小鼠（C57BL／6J）肝癌皮下移植瘤模型40只，随机分为4组，分别经尾静脉团注磷酸缓冲盐溶液（PBS）、KDR—TK、KDR—TK、KDR—TK＋SonoVue，后两组分别给予1MHz、2W／cm^2、5min的超声辐照，24h后治疗组分别腹腔注射GCV0．1ml（100mg·kg^-1·d^-1），连续10d，检测肿瘤大小，计算抑瘤率，28d后处死小鼠行肿瘤微血管密度及组织病理学检查。结果 抑瘤率在PBS组（A组）、KDR—TK／GCV组（B组）、KDR—TK＋超声／GCV组（C组）、KDR—TK＋超声＋SonoVue／GCV组（D组）分别为0%、3．6％±2．7％、21．4％±2．9V0和40．7％±4．5％（D组与B组，P〈0．01；D组与C组，P〈0．05；C组与B组，P〈0．05）；肿瘤微血管密度分别为48．8±5．1、44．2±6．4、27．4±3．2和12．3±1．4（B组与A组，P〉0．05；C组与A组，P〈0．05；D组与A组，P〈0．01；D组与C组，P〈0．05）；HE染色C组、D组坏死病变明显。结论 微泡造影剂增强超声辐照介导的KDR—TK基因靶向破坏小鼠肝癌微血管的效应，为肝癌的基因治疗提供一种可行、有效的方法。
- 聂芳徐辉雄吕明德王竹汤庆王瑛
- 关键词：造影剂基因疗法
- AFP启动子介导胸苷激酶表达载体的构建及其特异性表达被引量：1
- 2009年
- 【目的】构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析。【方法】采用PCR法扩增人AFP基因启动子。回收纯化后克隆入pBluescript Ⅱ KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中,构建成pEGFP-C1-AFP-TK。对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定。【结果】序列分析表明,该启动子含300bp核苷酸,与已报道的序列比较,100%相符。限制性酶切分析,重组质粒pEGFP-C1-AFP-TK已经克隆AFP启动子。RT-PCR及Western blotting分析pEGFP-C1-AFP-TK转染后的HepG2细胞后,表明TK基因在mRNA水平上能有效的表达,裂解后的HepG2细胞膜蛋白中有相对分子质量约61～83ku大小的特异性条带。【结论】人肝细胞癌(HepG2)靶向性质粒pEGFP-C1-AFP-TK构建成功。
- 岳殿超李宝金徐辉雄张泷涓王瑛吕明德
- 关键词：AFP启动子HEPG2细胞靶向表达
