国际科技合作与交流专项项目(2013DFA32150)
- 作品数：39 被引量：113H指数：7
- 相关作者：姚登福姚敏郑文杰董志珍王理更多>>
- 相关机构：南通大学南通市第一人民医院南通大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目江苏省临床医学科技专项江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 下调膜联蛋白A2基因转录对肝癌细胞生物学行为的影响被引量：3
- 2014年
- 目的观察下调膜联蛋白A2（annxin A2，ANXA2）表达对肝癌（HCC）细胞生物学行为的影响。方法以定量PCR分析不同肝癌细胞ANXA2 mRNA转录水平，以Western blot分析ANXA2表达；以免疫荧光检测ANXA2在细胞内表达和分布；以碘化丙啶染色和流式细胞术分析细胞周期；以CCK-8试剂盒分析细胞增殖潜能；以transwell实验分析其侵袭潜能；以创伤愈合试验分析其迁移潜能；以裸鼠移植瘤模型分析其致瘤潜能。两样本均数比较用t检验，率的比较用x^2检验，等级资料比较用秩和检验，多样本均数的两两比较采用口检验，组间差异用单因素方差分析。结果高侵袭潜能MHCC97-H细胞ANXA2表达明显高于HepG2、SMMC-7721和SMMC-7402和L02细胞；特异性shRNA沉默ANXA2效率在80％以上；免疫荧光显示ANXA2定位于细胞膜和细胞质，胞核少见；下调ANXA2表达明显下调HCC细胞s期比例（口=8．001，P=0．002），抑制细胞增殖（q=17．140，P＜0．01）、迁移潜能（q=12．808，P＜0．01）和侵袭潜能（q=9．069，P=0．002）；裸鼠移植瘤模型显示干扰组瘤重下降（g=11．968，P＜0．01），瘤体中ANXA2表达下调（Z=2．530，P=0．011）。结论下调ANxA2基因转录显著影响肝癌细胞的生物学行为，可望成为肝癌分子治疗的潜在靶目标。
- 张海健姚敏钱琦时运李景源陈心王司晔姚登福
- 关键词：膜联蛋白A2生物学行为
- 肝癌特异癌胚性抗原介导的免疫治疗研究
- 2016年
- 肝细胞性肝癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）的预防和有效治疗仍是医学界的难题。人类HCC发生与肝炎病毒（HBV、HCV）慢性持续性感染、化学致癌物摄入等多病因作用相关。癌基因或癌相关基因激活、抗癌基因失活或胚胎期某些癌基因重新复活等诸多因素,引起肝细胞生长失控,经启动、促进、演变为多阶段发病过程。
- 姚敏姚登福
- 关键词：肝癌发生肝细胞性肝癌化学致癌物癌相关基因恶性度
- MicroRNA作为原发性肝癌新标志物的应用前景被引量：1
- 2016年
- 原发性肝癌（primary liver cancer,PLC）发病率高,进展快,早期发现难,易产生多药耐药（MDR）和复发转移,治疗难度大,且预后差,仍是严重威胁人类健康的常见恶性肿瘤,亟待探索新的诊治方法。体内广泛存在由20～25个核苷酸组成的非编码微小RNA（micro RNAs,mi RNAs）,在转录后水平调节基因表达,参与胚胎发育、细胞增殖与分化、凋亡等生命过程，在新血管生成、干细胞分化、浸润及转移等过程中发挥重要作用。
- 董志珍姚登福
- 关键词：原发性肝癌MICRORNA核苷酸组成预后差细胞分化程度
- Wnt通路关键分子Wnt3a表达对肝癌诊断与鉴别诊断价值
- 2016年
- 目的：分析Wnt通路关键信号分子Wnt3a表达对HCC的诊断价值。方法：收集80例肝癌、53例肝硬化及慢乙肝患者和40例健康对照血清,用ELISA检测Wnt3a水平,与AFP比较评估Wnt3a诊断价值;以免疫组化法分析80例肝癌及癌周组织Wnt3a表达。结果：肝癌患者血Wnt3a水平显著高于各良性肝病组（P〈0.001）,与肝硬化、HBV感染、TNM分期显著相关（P〈0.05）;如以800 ng/L为正常上限,诊断肝癌敏感度、特异度、准确度、阳性和阴性预测值分别为92.5%、94.3%、93.2%、96.1%和89.3%,与AFP联检敏感度达96.3%,ROC下面积为0.994高于AFP的0.710（P〈0.001）。癌组织Wnt3a定位于胞浆和细胞膜上,阳性率96.2%显著高于癌周组46.3%（P〈0.001）;癌组织Wnt3a高表达（3～6分）占71.3%,癌旁组仅13.8%。Wnt3a高表达与分化等级、肝硬化、HBV感染、TNM分期显著相关（P〈0.01）。结论：Wnt通路关键信号分子Wnt3a表达是良、恶性肝病诊断与鉴别的特异标志物。
- 王晗姚敏杨君伶潘刘翃闫辉韩静岳明姚登福
- 关键词：肝细胞性肝癌WNT3A信号通路
- 肝癌多药耐药发生机制与监测标志物
- 2013年
- 肝癌治疗强调个体化,在多种治疗方法中化疗仍然起着不可替代作用。肝癌具有先天和后天的多药耐药性,致化疗效果不理想,已成为治疗中急需解决的问题。本文述评了肝癌相关多药耐药产生机制与监测标志物的研究近况。
- 顾星姚登福
- 关键词：肝癌多药耐药标志物
- 血管生成素2异常表达与肺癌侵袭、转移和预后的关系被引量：8
- 2018年
- 目的探讨血管生成素2（Ang－2）异常表达与肺癌侵袭、转移和预后的关系。
方法以自身配对法收集南通大学附属医院2009年1月至2010年12月间122例原发性肺癌患者术后癌和癌旁组织，以免疫组织化学法分析组织Ang－2表达。在细胞水平上，观察肺上皮Beas－2B及肺癌（SPCA－1，NCI－1650，A549和NCI－H1975）细胞中Ang－2蛋白及mRNA表达。筛选干扰Ang－2基因有效Short hairpin RNA（shRNA）质粒转染高表达Ang－2的A549肺癌细胞，以Western印迹、荧光定量聚合酶链反应、细胞计数试剂盒8（CCK－8）、Transwell等观察转染前后肺癌细胞Ang－2表达、Ang－2 mRNA水平、细胞增殖、侵袭、迁移及上皮间质转化（EMT）能力等的变化，分析Ang－2表达与肺癌侵袭及转移的关系。
结果肺癌组织Ang－2高表达，Ang－2表达与肿瘤直径（P＝0.008）、分化程度（P＝0.033）、TNM分期（P＝0.025）和5年生存率（P〈0.001）均显著相关。Ang－2高表达者5年生存率显著低于低表达者（16.1%比80.0%，P〈0.001）；TNM分期Ⅰ期患者Ang－2高表达者5年生存率显著低于低表达者（P〈0.001），Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期患者Ang－2高、低表达者之间5年生存率差异均无统计学意义。Ang－2蛋白及mRNA在肺癌细胞A549中表达最高。以最高效的Ang－2－shRNA－1质粒转染A549细胞后，细胞中Ang－2表达明显受抑，细胞增殖速度明显降低并呈时间依赖性；细胞的侵袭、迁移及EMT能力亦显著下降。
结论Ang－2异常表达与肺癌侵袭、转移及患者预后密切相关，干扰Ang－2表达有望成为肺癌治疗新的分子靶目标。
- 邱历伟陈建荣杨绪莉方淼郑文杰董志珍姚敏姚登福
- 关键词：肺肿瘤血管生成素2RNA干扰预后
- 线粒体内膜肉毒碱棕榈酰基转移酶在脂肪积聚肝细胞诱发恶性转化过程中的动态表达被引量：6
- 2017年
- 目的观察肝细胞恶性转化过程中线粒体内膜肉毒碱棕榈酰基转移酶II（CPT-Ⅱ）的动态改变。方法雄性SD大鼠分为对照组、脂肪肝组和诱癌组，分别以常规，高脂及含二乙基氨基芴（2-FAA）高脂饲料喂饲共14周。每2周处死对照鼠1只、脂肪肝和诱癌鼠各1组，留肝组织和血液。肝组织按HE检查结果分为对照组、脂肪肝组、变性组、癌前组和癌变组。肝脂质以油红O染色，肝CPT-Ⅱ表达以免疫组织化学法分析，以比浓度法比较组间肝CPT-Ⅱ浓度，并定量血清总胆固醇、甘油三酯（TG）、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶水平。组间比较用t检验。结果摄入脂肪后SD鼠肝细胞见大量脂肪积聚，正常对照组脂肪含量明显低于脂肪肝（t=-11．556，P〈0．001）、变性组（t=-4．847，P=0．04）、癌前病变（t=-13．652，P=0．005）和癌变组（t=-10．896，P=0．008）。肝细胞变性、癌前病变和癌变组血清TG，血清总胆固醇水平明显高于正常对照组（P〈0．05），TG和血清总胆固醇升高2-3倍。经2-FAA诱癌后肝细胞形态学表现为肝细胞发生变性、癌前病变和癌变的发展过程，伴有肝细胞损伤，肝细胞变性、癌前病变和癌变组天冬氨酸氨基转移酶及丙氨酸氨基转移酶活性显著高于正常对照组的4-8倍（P〈0．05）。定量肝CPT-Ⅱ比浓度并经免疫组织化学证实，在肝细胞癌变期间显著低于对照和脂肪肝组（P〈0．05）。结论CPT-Ⅱ酶低表达或功能丧失致肝细胞脂肪积聚加重，对肝细胞恶性转化过程起促进作用。
- 顾娟娟姚敏蔡乱方淼王理郑文杰姚登兵董志珍姚登福
- 关键词：脂肪肝
- 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3转录干预对肝癌细胞侵袭和血管新生的抑制作用被引量：10
- 2013年
- 目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC-3）特异性短发夹RNA（shRNA）对肝癌细胞侵袭和血管新生的抑制作用与机制。方法将GPC-3特异性shRNA转染肝癌细胞，检测GPC-3mRNA及蛋白表达的变化；分析其对细胞增殖、凋亡及细胞侵袭能力的影响。样本均数两两比较采用独立样本f检验，多样本均数比较采用单因素方差分析。结果shRNA转染肝癌细胞的效率大于80％，GPC-3shRNA1转染HepG2、MHCC-97H和Huh7肝癌细胞后，GPC-3mRNA水平分别为2．13±1．10、4．94±0．59、3．66±0．32，与空白对照组的19．34±0．90、20．24±1．61、β．97±1．15相比，f值分别为21．786、15．473、15．004，P值均〈0．001，差异均有统计学意义，且GPC-3shRNAl可明显诱导细胞凋亡，抑制肝癌细胞增殖、运动及侵袭能力。HepG2、MHCC-97H和Huh7肝癌细胞干扰组p-连环蛋白mRNA表达分别为6．82±0．21、4．01±0．52和5．47±O．90，与阴性对照组的12．52±0．30、12．03±0．98、12．45±0．26比较，f值分别为26．903、12．578和12．870，P值均〈0．001，差异均有统计学意义；GlilmRNA水平分别为9．78±1．35、10．78±1．15和10．93±0．97，与阴性对照组的6．49±0．72、6．80±0．79、10．03±0．97比较，f值分别为-3．730±4．918和-3．083，P值均〈0．05，差异均有统计学意义。GPC-3shRNA1还可下调HepG2和MHCC-97H细胞胰岛素样生长因子Ⅱ和血管内皮生长因子表达。结论GPC-3shRNA1可下调GPC-3mRNA水平，通过wnt／β-连环蛋白和Hedgehogs信号通路抑制癌细胞迁移、侵袭和血管新生，提示GPC-3为肝癌基因治疗潜在的分子靶目标。
- 蔚丹丹姚敏陈洁王理严美娟顾星邱历伟董志珍姚登福陆少林
- 关键词：信号传导磷脂酰肌醇蛋白聚糖3短发夹RNA血管新生
- miR-183靶向Ezrin表达对肝癌细胞侵袭和转移的抑制作用被引量：3
- 2013年
- 目的 :探讨miR-183靶向Ezrin表达对肝癌细胞侵袭转移能力的影响。方法 :培养肝癌细胞(HepG2)和正常肝细胞(LO-2),以逆转录实时定量PCR和Western Blot分别检测miR-183和Ezrin蛋白相对表达;合成miR-183模拟物转染HepG2细胞,观察转染前、后Ezrin蛋白表达;以划痕和transwell试验比较转染前、后肝癌细胞迁移侵袭能力的变化。结果:与LO-2细胞相比,miR-183在HepG2细胞低表达(P=0.023),靶基因Ezrin蛋白高表达(P=0.033)。转染miR-183模拟物后,HepG2细胞中Ezrin蛋白的表达明显下降(P<0.001)且细胞迁移侵袭能力也显著降低。结论:miR-183为监测肝癌转移的潜在标志并经负调控Ezrin抑制细胞侵袭转移。
- 邱历伟顾星吴玮赛文莉杨君伶张海健姚登福陆少林
- 关键词：肝细胞性肝癌MICRORNAEZRIN蛋白
- 肝细胞恶性转化与监测分子标志被引量：1
- 2013年
- 早诊早治是提高肝细胞癌患者生存率的唯一途径。随着基因组学、蛋白组学、转录组学和代谢组学等多种"组学"技术的进展,愈来愈多的肝细胞恶性转化相关分子标志被发现,并有望成为肝癌发生的预警监测及早期诊断的特异性生物标志。
- 姚登福顾星
- 关键词：肝细胞癌特异性标志物
