常州市应用基础研究计划项目(CJ20112011)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 相关作者：俞小卫郭红荣刘茗曾幸坤张倩更多>>
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- 维生素D对原代培养哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨维生素D对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)的抗增殖机制,并证明细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在其抗增殖调控中的作用。方法:原代培养正常对照组和哮喘组大鼠ASMCs,取第3～5代细胞用于实验。总分为以下5组:正常对照ASMCs组、哮喘ASMCs组、哮喘ASMCs+1×10-8mol/L维生素D组、哮喘ASMCs+1×10-7mol/L维生素D组、哮喘ASMCs+1×10-6mol/L维生素D组。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞术检测各组ASMCs增殖活性的变化;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测不同组ASMCs cyclin D1 mRNA和蛋白的表达。结果:①哮喘ASMCs组G0/G1期细胞比例(80.01±2.55)%明显少于其他各组,S期(8.31±0.42)%和G2/M期(11.21±1.43)%比例增加,MTT法检测其吸光度值增高(0.78±0.04),提示ASMCs增殖明显增强。其中各值分别与正常对照ASMCs组[(90.15±3.02)%、(5.41±0.62)%、(4.38±0.56)%、0.22±0.04]相比,有显著性差异(P<0.001);同时哮喘ASMCs组与哮喘ASMCs+1×10-6mol/L维生素D组各值[(89.08±2.81)%、(5.58±0.92)%、(4.61±1.12)%、0.38±0.02]相比,其差异有统计学意义(P<0.001);与哮喘ASMCs+1×10-7/1×10-8mol/L维生素D组相比,差异也有统计学意义(P<0.01);②在cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平上,哮喘ASMCs组与正常对照ASMCs组、哮喘ASMCs+1×10-6mol/L维生素D组分别相比较均偏高,差异显著(P<0.001);③在各不同剂量维生素D作用组,分别在细胞增殖活性检测、cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平上,大剂量维生素D组作用均优于最小剂量组,差异有统计学意义(P<0.001),显示维生素D的抗增殖作用有明显剂量-效应相关性。结论:哮喘组大鼠ASMCs增殖明显,维生素D可以通过调节cyclinD1表达发挥其对哮喘大鼠ASMCs的抗增殖作用。
- 曾幸坤郭红荣俞小卫刘茗
- 关键词：哮喘气道平滑肌细胞维生素D细胞周期蛋白D1
- 维生素D对炎症环境中大鼠气道平滑肌细胞增殖及转化的影响被引量：4
- 2013年
- 维生素D是一种新的神经内分泌-免疫调节激素,研究结果表明,维生素D的缺乏可增加支气管哮喘（简称哮喘）的严重程度和发生频率[1].早期维生素D干预对哮喘等过敏性疾病的防治机制,可能是通过转化生长因子-β1（TGF-β1）相关信号通路进行的信号传导.肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是一种有害的前炎症因子,在哮喘的气道炎症反应和气道重塑中占有主要地位.本研究中以原代培养大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）为研究对象,用加入TNF-α致敏的培养基,模拟哮喘气道炎症反应条件,探讨维生素D对TNF-α致敏的ASMC生长增殖的抑制作用及其对TGF-β1表达的影响.
- 曾章坤郭红荣俞小卫刘茗张倩朱莹然
- 关键词：气道平滑肌细胞增殖维生素D前炎症因子TGF-Β1表达
