广东省自然科学基金(04009381)
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 相关作者：张世能黄志清徐凤琴袁世珍左海军更多>>
- 相关机构：中山大学附属第二医院中山大学广州医学院附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胰腺癌细胞系SW1990中肿瘤干细胞样侧群细胞的分离及生物学特性研究被引量：4
- 2008年
- 目的从人胰腺癌细胞系SW1990中分离肿瘤干细胞样侧群（sidepopulation，SP）细胞，并进一步研究其生物学特性。方法细胞常规培养后应用Hoechst33342和PI染色、荧光激发流式细胞仪检测并分选SP细胞，MTT法检测细胞活性，流式细胞仪分析干细胞标志物CD133的表达，克隆平板测定细胞克隆形成能力，Westernblot检测细胞ABC超家族成员G2（ABCG2）蛋白表达。结果人胰腺癌细胞系SWl990中sP细胞比例为2．70％，可完全被维拉帕米阻断。培养9d后，sP细胞的A492值为2．1，克隆形成率为（38．7±6．8）％，CD133阳性率为69．63％，均显著高于非SP细胞的0．5，（15．5±2．8）％，16．71％；SP细胞ABCG2表达也较非SP细胞强。结论胰腺癌细胞系SW1990存在SP细胞。
- 黄凤婷张世能黄奕俊峗淑莉钟娃左海军庄晓虹
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤干细胞侧群细胞
- MAT1-siRNA体外转染抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的研究被引量：1
- 2007年
- 目的:观察siRNA沉默MAT1基因对胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响,探讨MAT1基因作为胰腺癌基因治疗标靶的可行性。方法:在脂质体介导下将MAT1基因序列特异性siRNA体外转染人胰腺癌BxPC-3细胞,采用RT-PCR和W estern印迹法分析MAT1基因的表达,锥虫蓝染色计数法和Boyden小室模型分别测定细胞的增殖和体外侵袭能力变化。结果:与对照各组相比,实验组BxPC-3细胞MAT1 mRNA和蛋白在一定时间内均表达下调,其中mRNA表达在24 h和48 h分别下调达55.2%和64.3%(P<0.01);细胞体外增殖和侵袭能力均明显受抑,差异具统计学显著性(P<0.01)。结论:针对MAT1基因的siRNA可抑制胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力,MAT1可能是胰腺癌基因治疗的靶点。
- 张世能刘建平徐凤琴傅玉茹左海军袁世珍
- 关键词：胰腺肿瘤RNA干扰细胞增殖肿瘤侵润
- TSA诱导胰腺癌BxPC-3细胞周期阻滞与凋亡的研究被引量：2
- 2007年
- 目的观察曲古抑菌素A(tricho-statin A,TSA)对胰腺癌BxPC-3细胞增殖及凋亡的诱导作用,探讨TSA抗胰腺癌的作用机制。方法BxPC-3细胞应用TSA处理后采用流式细胞技术分析其细胞周期分布和细胞凋亡率,免疫组化方法检测细胞乙酰化组蛋白H4表达,Western blot分析p21 WAF1/CIP1蛋白表达。结果TSA对胰腺癌BxPC-3细胞具有生长抑制作用,且呈时间和剂量依赖性。TSA可将BxPC-3细胞阻滞于G0/G1期,TSA组G0/G1期细胞达(61.8±2.5)%,较空白对照组(42.5±2.2)%和乙醇对照组(47.3±3.4)%明显增多(P=0.004);三组细胞凋亡率分别为25.5%、5.5%和5.1%(P=0.000)。TSA组细胞p21 WAF1/CIP1蛋白表达及其相关染色质乙酰化组蛋白H4表达上调。结论TSA对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和细胞周期具有影响作用并可诱导细胞凋亡,p21 WAF1/CIP1蛋白及其相关染色质乙酰化组蛋白H4表达上调可能是其抗胰腺癌作用机制之一。
- 张世能蔡霞徐凤琴张亚雷黄志清曾志勇
- 关键词：细胞周期
- 反义MAT1重组腺病毒对人胰腺癌细胞BxPC-3的周期调控作用被引量：9
- 2005年
- 目的探讨MAT1基因在胰腺癌BxPC3细胞周期G1/S转换中的作用。方法应用同源重组技术构建含反义MAT1基因的腺病毒载体;细胞生长分析采用台盼蓝染色计数法;Western印迹检测细胞MAT1、细胞周期素D1(cyclinD1)、cyclinE和pRb的蛋白表达;采用流式细胞仪分析反义MAT1基因转染后BxPC3细胞周期的变化。结果编码反义MAT1的重组腺病毒Ad MAT1AS感染滴度为5×1010pfu/ml;BxPC3细胞感染Ad MAT1AS后,MAT1、cyclinE和pRb蛋白表达明显下调,同时出现了明显的细胞G1期阻滞,79%的细胞处于G0/G1期,而空白对照组及空载体组则为40%至44%的细胞处于G0/G1期。结论MAT1基因在胰腺癌BxPC3细胞周期G1→S转换中发挥重要作用。
- 张世能徐凤琴黄志清曾志勇袁世珍
- 关键词：人胰腺癌细胞BXPC-3胰腺癌
- 侧群细胞与肿瘤
- 2008年
- 侧群（SP）细胞分布于成体多种组织、某些肿瘤细胞株和肿瘤细胞中，具有自我更新、多向分化、高致瘤能力等生物学特性，具有与干细胞相似的表型标记，对肿瘤治疗有重要意义。
- 黄凤婷张世能
- 关键词：干细胞肿瘤表型SP细胞
- 腺病毒介导CD/UPRT自杀基因系统治疗胰腺癌的实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨CD/UPRT自杀基因系统在胰腺癌基因治疗中的作用。方法采用同源重组技术构建重组腺病毒Ad-CD、Ad-CD/UPRT和Ad-GFP;体外感染人胰腺癌SW1990细胞,RT-PCR检测UPRTmRNA表达;MTT法检测细胞对5-FC的敏感性及旁观者效应;流式细胞仪分析细胞凋亡率;建立胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,瘤体内直接注射腺病毒,观察CD/UPRT自杀基因的原位治疗作用。结果转染CD/UPRT的胰腺癌SW1990细胞对5-FC的敏感性明显提高,Ad-CD/UPRT组的IC50为25μmol/L,而Ad-CD组和Ad-GFP组分别为100μmol/L和〉1000μmol/L。Ad-CD组、Ad-CD/UPRT组和Ad-GFP组的细胞凋亡率分别为61.3%、40.5%和3.0%,3组比较有显著差异（P〈0.05）。CD/UPRT基因转染存在旁观者效应。Ad-CD/UPRT瘤内注射治疗后种植癌体积缩小81%,Ad-GFP治疗肿瘤缩小63%。结论CD/UPRT自杀基因系统能提高对胰腺癌细胞的杀伤作用。
- 张世能徐凤琴于钟左海军危淑莉黄志清
- 关键词：胰腺肿瘤胞嘧啶脱氨酶尿嘧啶磷酸核糖转移酶腺病毒基因治疗
- 小干扰RNA沉默人胰腺癌细胞内连锁凋亡抑制因子基因表达的研究被引量：4
- 2006年
- X连锁凋亡抑制因子（X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）是凋亡抑制蛋白（IAP）家族中最有效的caspases抑制剂，它可直接抑制caspases并可多途径调节细胞凋亡，因而在肿瘤的发生和发展中发挥着重要作用。研究表明，多种肿瘤细胞中XIAP呈高表达，抑制XIAP基因表达可诱导肿瘤细胞凋亡，进而抑制肿瘤生长。本研究应用近年来开展的RNA干扰技术（RNA interference，RNAi），设计并合成针对XIAP编码基因的小干扰RNA（siRNA），于胰腺癌细胞BxPC-3中，观察siRNA能否产生肿瘤细胞内源性XIAP表达的转录后沉默，为胰腺癌基因沉寂疗法提供实验依据。
- 张世能张亚雷王凌云蔡霞詹俊黄志清袁世珍
- 关键词：RNA干扰技术凋亡抑制因子RNA沉默人胰腺癌X连锁CASPASES
