湖南省科技计划项目(05JT1023)
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
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- 大鼠慢性阻塞性肺疾病中P-ERk参与Bach1调控γ-GCS的表达
- 2008年
- 目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)中BTB-CNC异体同源体1(BTBandCNChomology1,Bach1)对谷氨酰半胱氨酸连接酶(γ-GCS)表达的调控及磷酸化的细胞外信号调节激酶(P-ERK)可能的参与作用。方法:复制COPD模型,通过免疫组化、westernblot、RT-PCR检测肺组织Bach1、γ-GCSmRNA及其蛋白和P-ERK蛋白的表达。结果:免疫组化结果显示COPD组P-ERK、γ-GCS蛋白水平较对照组升高(P<0.01),而Bach1蛋白水平无差异(P>0.05);western印迹结果显示COPD组Bach1核蛋白水平较对照组降低(P<0.01),而浆蛋白水平升高(P<0.01);RT-PCR结果显示COPD组Bach1mRNA水平较对照组无差异(P>0.05),而γ-GCSmRNA水平升高(P<0.01);相关分析发现γ-GCSmRNA及蛋白的表达与P-ERK蛋白、Bach1浆蛋白呈正相关(P<0.01),而与Bach1核蛋白呈负相关(P<0.01);Bach1核蛋白与P-ERK蛋白呈负相关(P<0.01),而Bach1浆蛋白与P-ERK蛋白呈正相关(P<0.01)。结论:Bach1与P-ERK均参与了大鼠COPD的发病过程:Bach1在核内下调抗氧化基因γ-GCS的表达,氧化应激时P-ERK介导其出核,上调抗氧化基因γ-GCS的表达;P-ERK主要在转录后水平调节Bach1胞浆胞核穿梭运动。
- 王梅芳戴爱国胡瑞成朱黎明
- P13K／Akt—Nrf2信号通路调节大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达的研究被引量：1
- 2010年
- 目的观察香烟烟雾提取物（CSE）通过磷酯酰肌醇-3-激酶（PBK）／Akt—Nrf2（Nuclearfactor—E2relatedfactor）信号通路对大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）的影响。方法用浓度为10％的CSE对体外原代培养的大鼠气道上皮细胞进行不同时间处理及使用P13K特异抑制剂LY294002进行干预。观察CSE在不同的时间及使用LY294002干预后对Nrt2的核转位及γ-GCS的影响，用细胞免疫化学、流式术、免疫荧光及Westernblot方法检测Nrf2、p-Akt及γ-GCS的表达水平；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测γ-GCSmRNA的表达水平；检测还原型谷胱甘肽（GSH）的含量及γ-GCS的活性。结果暴露CSE后1h，GSH含量明显低于对照组，在暴露CSE后3h和6h，GSH含量明显增高。Nrf2蛋白质在对照组主要表达在胞浆，其蛋白质表达增强，而在CSE1h、CSE3h和CSE6h组主要在胞核中表达，其蛋白质表达增强。p-Akt蛋白质在暴露CSE后1h增强，3h最强，6h减弱。p-Akt阳性细胞百分比变化趋势与其蛋白质变化趋势相同。γ—GCSmRNA和蛋白质在CSE1h、CSE3h、CSE6h组表达逐渐增强。γ—GCS活性在CSE1h、CSE3h、CSE6h组逐渐增强。预先使用LY292002，p-Akt阳性细胞百分比及蛋白质表达明显弱于CSE3h组，Nrf2胞浆蛋白质表达增强，胞核表达减弱，吖-GCSmRNA、蛋白质和活性及GSH含量均明显低于CSE3h组。相关性分析显示Nri2与γ-GCS、γ-GCS活性呈正相关（r=0．81，0．77，P〈0．05），p-AM与γ-GCS、γ-GCS活性、GSH及Nrf2呈正相关（r=0．373，0．44，0．63，0．56，P〈0．05）。结论P13K／Akt信号通路可能参与Nrf2核转位及其对抗氧化基因γ-GCS的调控。
- 江刚戴爱国胡瑞成
- KLF2调控抗氧化系统及在肺部疾病中的应用前景被引量：2
- 2009年
- 氧化/抗氧化失衡是许多肺部疾病的重要发病机制之一。肺Krppel样转录因子(KLF2/LKLF)是锌指Kr櫣ppel样转录因子家族成员之一,由于最初发现KLF2主要在肺内表达因此称为KLF2。一直以来KLF2被认为在细胞的生长、分化、凋亡,肺与血管的发育,成熟T细胞的存活、静止与迁移中起重要作用。而近来发现KLF2也具有重要的抗氧化作用,能调控多种抗氧化酶和抗氧化转录因子的表达。本文就KLF2的结构和功能,及其对抗氧化系统的作用和在肺部疾病研究中的应用前景作一综述。
- 李洁戴爱国胡瑞成谭双香朱黎明
- 关键词：抗氧化系统肺部疾病
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ调控抗氧化系统与慢性阻塞性肺疾病被引量：1
- 2009年
- 氧化／抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）主要发病机制之一。过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor γ，PPART）是一种配体依赖性核受体，具有抗氧化作用。PPARγ的一些配体和辅激活因子PGC1a能调控活性氧的代谢和抗氧化酶的表达，而它们均通过激活PPARγ而发挥抗氧化作用。PPARγ对抗氧化系统这种重要的调控作用，为COPD的发病和治疗的研究提供了一种新的可行性思路。
- 李洁戴爱国胡瑞成朱黎明
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Γ抗氧化系统慢性阻塞性肺疾病
- 转录因子Nrf2／Bach1及MAPK激酶调控γ-GCS在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的作用被引量：6
- 2009年
- 目的:研究转录因子红系衍生核因子相关因子-2(Nrf2)及BTB-CNC异体同源体1(Bach1)在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中的表达,探索其感受氧化应激调控谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的可能机制。方法:复制慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型,通过免疫组化、Westernblotting、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究肺组织Nrf2、Bach1、γ-GCSmRNA及其蛋白和p-ERK、p-p38、p-JNK蛋白的表达。结果:免疫组化结果显示COPD组p-ERK、p-p38、γ-GCS、Nrf2蛋白水平较对照组升高(P<0.01),而Bach1、p-JNK蛋白水平无差异(P>0.05);Westernblotting结果显示COPD组p-ERK、p-JNK、Nrf2核蛋白质水平较对照组升高(P<0.01),Bach1、p-p38浆蛋白水平较对照组升高(P<0.01)而Bach1核蛋白水平较对照组降低(P<0.01);RT-PCR结果显示,COPD组Nrf2、Bach1mRNA水平较对照组无差异(P>0.05),而γ-GCSmRNA水平升高(P<0.01);直线相关分析结果表明,γ-GCSmRNA表达水平与Nrf2、p-ERK、p-p38总蛋白质水平,Nrf2、p-ERK、p-JNK核蛋白水平和Bach1、p-p38浆蛋白质水平均呈正相关(P<0.01),而与Bach1核蛋白质水平呈负相关(P<0.01);Nrf2核蛋白质水平与p-ERK、p-JNK核蛋白水平呈正相关(P<0.01),而Bach1核蛋白质水平与p-ERK、p-JNK核蛋白水平呈负相关(P<0.01)。结论:在慢性阻塞性肺疾病的发病过程中转录因子Nrf2/Bach1可能在核内竞争反向调节抗氧化基因γ-GCS的表达;信号转导蛋白p-ERK、p-JNK在调控Nrf2/Bach1核内平衡中起重要作用,且调控主要发生在转录后水平;γ-GCS可能还存在其它转录调节机制。
- 王梅芳戴爱国胡瑞成高军丽朱黎明
- 关键词：阻塞性有丝分裂素激活蛋白激酶类
- Bach1与Nrf2调控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶对大鼠慢性阻塞性肺疾病的作用被引量：4
- 2008年
- 为了探讨Bach1(BTBand CNC homology1)与红系衍生的核因子相关因子2(Nrf2)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达变化在慢性阻塞性肺疾病(COPD)中的作用和意义,用气管内注入脂多糖及熏香烟的复合刺激法建立大鼠COPD模型.观察两组大鼠的肺组织病理学改变,测两组大鼠的肺功能指标;应用免疫组化、Western印迹、原位杂交和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法检测Bach1与Nrf2及γ-GCS在两组大鼠的肺组织中的表达.结果显示,COPD组的肺功能指标(FEV0.3、FEV0.3/FVC%、PEF)明显恶化;光镜下肺组织病理改变符合COPD的特征性改变;γ-GCS与Nrf2的mRNA及蛋白质表达在COPD组大鼠肺组织中明显增强;而Bach1 mRNA及蛋白质在COPD组和对照组的表达无明显差别.且核/胞浆分离技术表明,Nrf2蛋白在对照组主要表达于胞浆,胞核中表达水平较弱,在COPD组胞浆、胞核均有表达,但是在胞核中的水平明显升高;Bach1蛋白在对照组主要表达于胞核中,胞浆中无明显表达,在COPD组主要表达于胞浆,胞核中无明显表达.相关性分析表明,γ-GCS mRNA与FEV0.3、FEV0.3/FVC%、PEF均呈负相关;Nrf2蛋白表达与γ-GCSmRNA呈正相关;Bach1蛋白与γ-GCS mRNA呈负相关.上述结果提示,Bach1与Nrf2和γ-GCS可能均在大鼠COPD的发病中发挥作用,且Bach1和Nrf2可能通过竞争性机制调控γ-GCS的表达,影响COPD的发生和发展.
- 高军丽戴爱国
- 关键词：Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶慢性阻塞性肺疾病
- 哮喘豚鼠肺、肝组织中还原型谷胱甘肽、γ谷氨酰半胱氨酸合成酶及其重链mRNA的表达被引量：1
- 2009年
- 目的研究支气管哮喘(简称哮喘)豚鼠肺、肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活性及其重链(γ-GCSh)mRNA表达的差异和变化。方法取健康雄性豚鼠30只,随机分为哮喘组(A组)、地塞米松治疗组(B组)及对照组(C组),每组10只。采用腹腔内注射联合雾化吸入卵清蛋白复制哮喘豚鼠模型,用生物化学反应比色法检测各组豚鼠肺、肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、总谷胱甘肽(TGSH)和γ-GCS的活性,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组豚鼠肺、肝组织中γ-GCSh mRNA的表达。结果A组豚鼠与B组、C组比较肺内γ-GCS活性及γ-GCSh mRNA的表达明显升高,相应的总谷胱甘肽水平增加(P均<0.01),但GSH水平较对照组、治疗组下降(P<0.05);肝脏组织内γ-GCS活性、γ-GCSh mRNA的表达、TGSH及GSH浓度A、B、C三组比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论哮喘豚鼠肺内γ-GCS、TGSH及γ-GCSh mRNA表达增高,并可能在抗氧化损伤中发挥重要作用,而TGSH、GSH、γ-GCS及γ-GCSh mRNA在哮喘豚鼠肝脏局部表达无变化。
- 朱黎明曹守冬戴爱国
- 关键词：哮喘Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶还原型谷胱甘肽
