中国博士后科学基金(20110491000)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：杨苏珍郝慧芳卢清侠杨继飞张改平更多>>
- 相关机构：河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗原多肽的串联表达及活性鉴定
- 2011年
- 为获得含合成肽疫苗抗原多肽的重组表达蛋白,根据猪口蹄疫O型合成肽疫苗中抗原多肽的氨基酸序列,使用大肠杆菌偏好性密码子人工合成该抗原多肽的双拷贝基因序列,并克隆至表达载体pET32a中,构建原核表达质粒pET32a-P2。将重组质粒转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,收集诱导的菌液进行SDS-PAGE电泳和Western-blot分析。结果显示,在分子量27 kD处有1条明显的蛋白表达条带,且能被O型FMDV阳性血清识别。对表达产物进行可溶性分析,结果显示,表达蛋白几乎全部以可溶形式存在。表达蛋白经Ni-NTA树脂亲和纯化,SDS-PAGE显示纯化的目的蛋白在27 kD处有单一目的条带,具有较高的纯度。ELISA检测结果显示,纯化的重组蛋白具有较高的活性。结果表明,该抗原多肽的双拷贝串联重复序列在大肠杆菌中得到了可溶性高效表达,为开发诊断试剂和基因工程疫苗奠定了基础。
- 卢清侠郭军庆郝慧芳杨苏珍邢广旭杨继飞王世红张改平
- 关键词：猪口蹄疫合成肽疫苗抗原多肽蛋白纯化活性鉴定
- 基于免疫层析试纸的猪O型FMDV抗体水平监测被引量：1
- 2011年
- 为了应用免疫层析试纸评价猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果,对50头试验仔猪进行免疫注射,并在首次免疫后28 d及2次免疫后20 d采血,通过试纸定量测定结果来监测试验猪抗体水平变化,同时对比猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒的检测结果.结果表明,猪口蹄疫O型合成肽疫苗能快速诱导产生高水平的抗体,首次免疫抗体阳性率达88%,2次免疫抗体阳性率高达100%.试纸定量测定结果表明,2次免疫后猪群免疫抗体水平整体显著提升,并保持在较高水平.与ELISA试剂盒比较二者具有相同的敏感性和特异性,符合率为100%.
- 卢清侠杨继飞金前跃杨苏珍柴书军万博郝慧芳张改平
- 关键词：FMDV免疫抗体水平ELISA
