广州市医药卫生科技项目(2006-YB-170)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 相关作者：张新华董颀张同韩陈广盛于清华更多>>
- 相关机构：广州医学院第二附属医院中山大学广州医学院更多>>
- 发文基金：广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA特异性抑制舌癌细胞株端粒逆转录酶基因表达的体外研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨hTERT特异性的siRNA干扰舌癌Tca8113细胞hTERT基因表达的效果,及其对舌癌Tca8113细胞增殖、凋亡的影响。方法构建针对hTERT基因的siRNA(siRNA-hTERT1),转导入Tca8113细胞,同时以无同源性的siRNA-hTERT2作阴性对照,以及无任何处理的空白对照。应用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测hTERT基因表达变化,MTT法检测细胞生长率,流式细胞术分析细胞凋亡的情况。结果与阴性对照组的1.934±0.212和空白对照的2.053±0.369相比,siRNA-hTERT1有效下调hTERT的mRNA表达,仅为0.950±0.138,差异有显著性(P<0.01)。转染72 h后,siRNA-hTERT1的细胞抑制率达47.2%,远远高于阴性对照组的2.6%,差异有显著性(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,siRNA-hTERT1处理48 h后细胞凋亡率明显增加,达(27.30±0.18)%,显著高于阴性对照组的(5.11±0.22)%和空白对照组的(5.00±0.19)%,差异有显著性(P<0.01)。结论siRNA-hTERT1能特异性抑制舌癌Tca8113细胞hTERT基因的表达,促进细胞的凋亡和减慢细胞增殖。
- 张新华董颀陈广盛
- 关键词：口腔鳞癌端粒酶逆转录酶RNA干扰
- 顺铂和阿霉素联合抑制舌鳞癌Tca8113细胞增殖被引量：2
- 2009年
- 目的观察顺铂和阿霉素联合作用对人舌鳞癌Tca8113细胞生长的抑制作用，以及对细胞周期和凋亡的影响。方法不同浓度顺铂、阿霉素及两者联合作用于人舌鳞癌Tea8113细胞，用MTT法观察细胞增殖情况以及药物对细胞生长的抑制效应。用流式细胞仪观察细胞凋亡和细胞周期。结果顺铂（r=0．538，P〈0．01）和阿霉素（r=0．642，P〈0．01）呈剂量和时间依赖性抑制Tca8113细胞生长。单独用1．25μmol／L阿霉素作用24h，对Tca8113细胞的生长无显著影响。不同浓度顺铂（2～10mg／L）单独作用24h，仅10mg／L浓度可显著抑制Tca8113细胞的生长（P〈0．01）。1．25μmol/L阿霉素与顺铂联合应用24h后，4、6、8、10mg／L顺铂均可显著抑制Tca8113细胞生长，且与相应浓度的单独用药组比，差异均有统计学意义（均为P〈0．001）。1．25μmol／L阿霉素、6mg／L顺铂以及阿霉素1．25μmol／L＋顺铂6mg／L均显著改变G0～G1期（50．00±0．32％，43．53±2．026％，50．77±3．83％）和S期（36．5±1．05％，40．8±2．52％，30．87±2．65％）细胞百分比（均为P〈0．01），联合用药的作用较单一用药组更显著（P〈0．05）。上述药物对细胞凋亡的作用均不明显，联合用药后坏死细胞比例明显增加。结论顺铂和阿霉素联合作用，可显著地抑制人舌鳞癌细胞分化增殖，并增强药物的细胞毒性作用。
- 张新华董颀张志光张同韩陈广盛
- 关键词：舌癌顺铂阿霉素细胞周期
- 靶向siRNA干扰hTERT联合顺铂抑制Tca8113增殖的实验研究被引量：5
- 2010年
- 目的:应用hTERT特异性siRNA干扰舌癌Tca8113细胞hTERT基因的表达,探讨hTERT-siRNA联合顺铂对舌癌Tca8113细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外化学合成针对hTERT的siRNA,通过阳离子脂质体将siRNA-hTERT1转染舌癌Tca8113细胞,RT-PCR检测hTERTmRNA表达水平,Western印迹检测其蛋白表达水平,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)及流式细胞分析法分别测定hTERT-siRNA联合顺铂处理后对舌癌Tca8113细胞增殖及凋亡的影响。数据采用SPSS13.0进行方差分析。结果:靶向hTERT的siRNA可以有效抑制舌癌Tca8113细胞株hTERT的表达,hTERT-siRNA和顺铂均可抑制Tca8113细胞增殖并诱导其一定程度的凋亡。当联合应用靶向hTERT的siRNA和顺铂时,上述作用显著加强(P<0.05)。结论:体外化学合成的hTERTsiRNA可以有效抑制舌癌Tca8113细胞hTERT的表达,hTERT表达受抑制后,可增强顺铂作用舌癌Tca8113细胞的敏感性。
- 张新华刘海潮于清华
- 关键词：HTERT口腔癌RNA干扰顺铂TCA8113细胞
- siRNA特异性沉默hTERT mRNA对人舌癌Tca8113细胞体内外生长的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨靶向端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的siRNA抑制舌癌Tca8113细胞的效果和机制。方法:构建hTERT基因的siRNA(siRNA-hTERT1),阳离子脂质体法转染舌癌Tca8113细胞,以无同源性的siRNA-hTERT2作阴性对照,以未转染的细胞为空白对照。MTT法检测细胞生长率,流式细胞术分析细胞凋亡的情况。建立裸鼠舌癌皮下种植瘤模型,瘤内注射法将siRNA-hTERT1转导,观察3组种植瘤的大小,细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒检测种植瘤内细胞凋亡的情况。逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测细胞株和种植瘤内hTERT mRNA表达的变化。结果:细胞株转染siRNA-hTERT172h后,抑制率达47.2%,显著高于阴性对照组(2.6%),P<0.01;细胞凋亡率也明显增加,达27.30%±0.18%,显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。种植瘤转染siRNA-hTERT114d后,种植瘤体积为(298.8±138.7)mm3,显著小于阴性对照组的(495.1±151.6)mm3和空白对照组(506.8±207.4)mm3,抑瘤率达到40.0%(P<0.01);同时可见转染组的细胞凋亡数目增加,显著多于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。检测hTERTmRNA的表达,可见siRNA-hTERT1转染后,细胞株和种植瘤内的表达显著减少(P<0.01),而阴性对照和空白对照间无显著差异。结论:siRNA-hTERT1在体内外均能有效抑制舌癌Tca8113细胞的生长,抑制hTERT基因的表达和促进细胞的凋亡是其主要机制。
- 张新华董颀张同韩
- 关键词：口腔肿瘤端粒酶逆转录酶
