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国家科技重大专项(2009ZXl0004-715)
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马志远
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6种丙型肝炎假病毒颗粒的制备及其中和抗体初步筛检
2013年
目的制备6种不同基因型HCV代表株完整包膜糖蛋白E1E2的假病毒颗粒(HCVPP),建立检测HCV感染者中和抗体的方法。方法将6种包膜质粒分别与慢病毒包装质粒pHR’CMVA8.2及携带绿色荧光蛋白报告基因的自灭转移质粒pCS-CG共转染293T细胞,产生6种不同基因型的HCVpp;收集上清液中HCVpp并与患者血清孵育,加入到huh-7细胞中,流式细胞术检测中和抗体对HCVpp感染huh-7的抑制作用,以此抗体滴定方法完成中和抗体体外检测。结果制备的6种HCVpp均可在体外感染Huh-7细胞;5例HCV携带者(病毒RNA定量为阴性、抗HCV抗体为阳性的患者)的血清对2种HCVpp(1b、2a型)的中和滴度≥1:40;2例已治愈的丙型肝炎患者对1种HCVpp(1b型)的中和滴度≥1:40,其中1例的中和滴度为1:200;184例慢性丙型肝炎患者的健康配偶对4种HCVpp(3a、4、5、6型)的中和滴度≥l:40。结论成功制备6种不同基因型的HCVpp,建立了基于HCVpp的中和抗体检测方法,为研究抗病毒药物的体外筛选提供了有效模型。
杨晓飞
潘蕾
王宇
马力
张颖
周云
郝春秋
马志远
贾战生
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丙型
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