福建省自然科学基金(2006J0059) 作品数:5 被引量:30 H指数:4 相关作者: 陈观水 潘大仁 周以飞 林生 高丽华 更多>> 相关机构: 福建农林大学 更多>> 发文基金: 福建省自然科学基金 国家自然科学基金 福建省教育厅资助项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
甘薯IbNPR1全长cDNA序列的分离与表达特性分析(英文) 被引量:5 2009年 在植物系统获得性抗性(SAR)中,NPR1蛋白是水杨酸介导的基因表达中关键调控因子。本研究以青农2号为试验材料,利用同源序列法和RACE技术分离甘薯SAR途径的主要抗病信号元件NPR1(none expresser of PR gene)的全长cDNA序列。序列分析表明,IbNPR1基因全长2353bp,包含一个编码586个氨基酸残基的开放阅读框,包含有类似拟南芥NPR1蛋白中的BTB/POZ和锚蛋白重复氨基酸序列结构域。聚类分析显示IbNPR1与来源于番茄的NPR1蛋白关系最近。Southern杂交及半定量RT-PCR分析表明,甘薯NPR1基因属于低拷贝基因家族,表达模式为组成型表达,并且SA能提高其表达水平。由该结果推测,IbNPR1可能在甘薯抵御病原物的侵染中起重要的作用。 陈观水 周以飞 林生 张铮 潘大仁关键词:甘薯 抗病 CDNA末端快速扩增技术 甘薯IbNPR1基因表达载体的构建及转化烟草 被引量:6 2009年 为了研究甘薯NPR1基因在转基因植物广谱抗病中的应用,利用前期克隆的甘薯NPR1基因,以pCAMBIA1300质粒为基本载体,构建了由组成型CaMV35S启动子驱动IbNPR1基因的植物表达载体pCAMBIA1300+IbNPR1;然后,采用冻融法转入农杆菌EHA105菌株,通过叶盘法对烟草进行了遗传转化。经PCR检测,IbNPR1基因已整合到烟草基因组中。 陈观水 张铮 周以飞 林生 郭友国 潘大仁关键词:NPR1基因 植物表达载体 烟草 甘薯NPR1基因半定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:15 2007年 为进一步研究甘薯病原微生物的侵染对甘薯病程相关非表达子1基因(NPR1)表达的影响,以甘薯肌动蛋白(β-ac-tin)基因为内参照基因,提取甘薯叶片总RNA,反转录为cDNA,同批异管对该2个基因进行PCR扩增.通过对循环数的优化和对体系重复性、准确性的分析,建立了一个稳定、方便的半定量RT-PCR体系. 陈观水 潘大仁 周以飞 林生 高丽华 杨志伟关键词:甘薯 基因表达 半定量RT-PCR 三浅裂野牵牛NBS类抗病基因同源序列的克隆与分析(英文) 被引量:5 2007年 NBS类植物抗病基因保守结构域的克隆为利用简并引物扩增抗病基因同源序列提供了可能。根据抗病基因Grol-4、Gpa2、N等的P-loop和GLPL保守结构域设计简并引物,分离甘薯近缘野生种三浅裂野牵牛NBS类型抗病基因同源序列,共获得6条相关序列,核苷酸序列的相似性为48%~97%,推测氨基酸序列的相似性在25.2%~95.1%之间。系统进化分析表明,6条三浅裂野牵牛RGA序列可分为2个不同的类群:TIR-NBS和non-TIR-NBS。三浅裂野牵牛RGA序列与源自甘薯的RGA序列有很高的相似性,这在一定程度上反映了三浅裂野牵牛与甘薯之间的亲缘关系。分离的6条RGA序列分别命名为ItRGA1~ItRGA6,GenBank登录号分别为DQ849027-DQ849032。 陈观水 潘大仁 周以飞 高丽华果蔗Rar1基因反义载体的构建及遗传转化初步研究 被引量:1 2009年 根据其它作物已克隆的RAR1基因的两个氨基酸保守位点设计简并引物,用果蔗cDNA进行PCR扩增,得到果蔗Rar1基因片段序列,推测出的氨基酸序列与其他作物推测出的氨基酸序列的CCCH结构域和一个锌结合域CHORD-Ⅱ具有很高的相似性,初步证明了所克隆的果蔗Rar1基因片段具有正确的序列信息。并构建了果蔗Rar1反义植物表达载体pCAM-RAR1,转化农杆菌后侵染果蔗的愈伤组织并得到初步验证,为转基因植物的获得以及果蔗Rar1基因功能鉴定奠定了基础。 林生 潘大仁 周以飞 陈观水 张绪璋关键词:果蔗