公共文化服务平台

共 5 条记录，以下是 1-5

全选清除导出

排序方式：

问号钩端螺旋体诱导J774A．1细胞FasL／Fas表达上调及FasL／Fas相关细胞凋亡的研究被引量：4: 2008年; 目的:了解FasL/Fas途径参与问号钩端螺旋体(简称钩体)诱导细胞凋亡及其FasL/Fas表达水平变化。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染小鼠单核-巨噬细胞J774A.1模型。采用DAPI染色法观察问号钩体56601株感染细胞凋亡的形态学特征,流式细胞术定量检测感染细胞的凋亡率及FasL中和抗体对细胞凋亡的阻断作用。PE标记抗小鼠FasL或Fas单克隆抗体染色法,观察问号钩体56601株感染细胞FasL/Fas表达情况。采用流式细胞术定量检测感染细胞的FasL/Fas表达水平。结果:问号钩体56601株感染J774A.1细胞4h时,部分细胞出现染色质浓缩及边缘化现象;感染24h时上述病变现象更加明显且有部分细胞核裂解。问号钩体56601株感染J774A.1细胞4h和24h的凋亡率分别为53.6%和64.31%。FasL中和抗体预处理细胞后,问号钩体56601株感染细胞4h或24h的凋亡率分别为10.27%和15.90%。J774A.1细胞被问号钩体56601株感染后4和24h,FasL表达率分别从感染前的4.19%上升至21.69%和65.70%,Fas表达率分别从感染前的12.88%上升至91.96%和88.01%。结论:诱导细胞凋亡是问号钩体56601株损伤J774A.1细胞的重要机制。问号钩体可上调靶细胞FasL/Fas表达水平,并通过FasL/Fas途径诱导J774A.1细胞凋亡。; 李世军胡野严杰毛亚飞李立伟; 关键词：细胞凋亡 J774A.1细胞

问号钩端螺旋体诱导J774A．1细胞凋亡及caspase-3、-6活化对凋亡的影响被引量：1: 2008年; 目的:了解问号钩端螺旋体(钩体)诱导小鼠单核-巨噬样细胞(J774A.1)凋亡的作用,以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法:建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A.1细胞感染模型。采用FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况。分别采用荧光比色法和WesternBlot,检测感染细胞caspase-3、-6活性及其底物(PARA和LaminA/C)剪切情况。结果:多种不同浓度的问号钩体赖株感染均可使J774A.1细胞发生凋亡,其中以问号钩体∶细胞=100∶1的比例感染时凋亡率最高(48.81%±5.95%)。感染细胞caspase-3和-6最大活性分别为(1453.41±36.07)FU和(618.65±39.82)FU,是未感染细胞的16.38和9.98倍。感染细胞的PARP和Lamin A/C均被剪切。Caspase-3、-6抑制剂对问号钩体赖株诱导的J774A.1细胞凋亡有明显的阻断作用。结论:问号钩体可诱导J774A.1细胞凋亡,caspase-3和-6与该细胞凋亡密切相关。; 金丹丹董海艳严杰李立伟毛亚飞

问号钩端螺旋体在体外诱导细胞凋亡及相关信号通路的研究: 2008年; 目的了解问号钩端螺旋体诱导不同宿主细胞凋亡的作用及相关胞内信号传导通路。方法建立问号钩体黄疸出血群赖型赖株小鼠单核-巨噬样细胞J774A．1、人脐静脉内皮细胞EVC304和人Ⅱ型肺泡上皮细胞A549感染模型。采用FITC-Annexin V／PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况。分别采用荧光比色法和Western blot检测感染的J774A．1细胞caspase-3，-8，-9活性和凋亡相关蛋白FADD（Fas-associated death domain）表达水平。结果问号钩体赖株感染1-6h后，36．70％-63．70％的J774A．1细胞可出现明显的早期凋亡，感染12h时转变为晚期凋亡或坏死为主（53．68％）。78．52％问号钩体赖株感染的A549细胞仅出现晚期凋亡或坏死。问号钩体赖株感染的EVC304细胞无细胞凋亡或坏死现象。感染的J774A．1细胞caspase-3和-8最大活性分别为（1453．41±36．07）和（1402．15±59．09）FU，是未感染细胞的16．38和29．99倍。感染的J774A．1细胞caspase-9虽略有升高为（89．42±5．08）FU，但明显低于easpase-3和-8（P〈0．001）。随着感染时间的延长，感染的J774A．1细胞FADD蛋白表达量逐步增加。结论问号钩体诱导宿主细胞凋亡的效应可因细胞种类不同而有明显差异，FADD→caspase-8→caspase-3是介导问号钩体感染J774A．1细胞凋亡的主要信号通路。; 金丹丹汤仁仙潘建平严杰; 关键词：细胞凋亡

问号钩端螺旋体经线粒体相关信号通路诱导巨噬细胞凋亡的研究被引量：3: 2009年; 目的确定线粒体相关信号转导途径在问号钩端螺旋体（简称钩体）诱导小鼠单核一巨噬细胞凋亡过程中的作用。方法建立问号钩体黄疸出血群赖株诱导小鼠单核．巨噬样细胞株J774A．1凋亡模型。采用透射电镜观察感染细胞线粒体病变情况，JC-1染色法检测感染细胞线粒体膜电位变化，荧光探针DCFH-DA检测感染细胞内活性氧（ROS）水平。采用试剂盒检测感染细胞caspase．8和caspase-9活性变化。流式细胞术检测感染细胞凋亡情况以及caspase阻断剂阻断凋亡的效果。采用Westernblot检测线粒体内和胞质中的细胞色素C（CytC）以及凋亡诱导因子（AIF）、核酸内切酶G（EndoG）和Smac水平。应用免疫荧光染色法检测AIF和EndoG从细胞质至核内的转位。结果问号钩体赖株可诱导J774A．1细胞凋亡。感染细胞的线粒体有明显病变，线粒体膜电位降低且胞内活性氧水平升高。感染细胞caspase-8活化，caspase-9则否，但caspase阻断剂不能完全阻断细胞凋亡。感染细胞AIF和EndoG从线粒体释放至胞质并转位至细胞核内。未检测到感染细胞胞质内CytC水平升高及Smac的释放。结论线粒体可通过非caspase途径的AIF和EndoG参与问号钩体诱导单核-巨噬细胞凋亡的过程。; 范兴丽董海艳严杰; 关键词：问号钩端螺旋体细胞凋亡线粒体

钩端螺旋体脂多糖诱导J774A.1细胞凋亡及相关信号通路调控作用的研究被引量：6: 2010年; 目的了解问号钩端螺旋体脂多糖（L-LPS）体外诱导小鼠单核-巨噬样细胞株（J774A.1）凋亡及Toll样受体（TLR）和相关信号通路调控细胞凋亡的作用.方法酚水法从问号钩体黄疸出血群赖型赖株中提取L-LPS.流式细胞术测定L-LPS诱导J774A.1细胞凋亡及FasL中和抗体阻断细胞凋亡的作用.实时荧光定量RT-PCR（qPCR）及流式细胞术检测L-LPS作用前后J774A.1细胞Fas/FasLmRNAs和蛋白表达水平变化.TLR2或TLR4抗体封闭试验、信号通路阻断试验及流式细胞术,检测TLR2、TLR4及p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和胞外信号调节激酶（ERK）通路对L-LPS诱导细胞凋亡的调控作用.结果 100 ng/ml L-LPS作用J774A.1细胞4、12和24 h的凋亡率分别为56.50%、69.28%和24.35%,FasL中和抗体封闭后,细胞凋亡率分别下降至11.21%、21.58%和12.70%（P＜0.05）.L-LPS作用4、12和24 h的J774A.1细胞FasL和Fas mRNAs水平分别为正常细胞的1.34、2.12、2.10及2.45、3.87、3.12倍（P＜0.05）,FasL和Fas蛋白表达率分别从L-LPS作用前的4.82%和15.32%上调至18.61%、60.13%、42.75%（P＜0.05）和76.34%、85.70%和77.92%（P＜0.05）.TLR2抗体封闭后L-LPS诱导J774A.1细胞的凋亡率（11.54%）明显低于未封闭细胞（66.56%,P＜0.05）,但TLR4抗体封闭细胞的凋亡率仍高达55.27%（P＞0.05）.p38MAPK与JNK通路阻断后L-LPS诱导J774A.1细胞凋亡率（20.54%和47.98%）明显低于未阻断细胞（62.17%,P＜0.05）,ERK通路阻断后细胞凋亡率仍高达61.72%（P＞0.05）.结论 L-LPS经TLR2识别后通过p38MAPK和JNK通路上调J774A.1细胞Fas和FasL表达,从而参与L-LPS诱导细胞凋亡过程.; 李世军陈明环赵欣严杰; 关键词：问号钩端螺旋体脂多糖 FAS/FASL

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(30570092)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(30570092)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈