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南京医科大学科技发展基金(09NJMUZ33)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
张维铭
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相关机构:
天津医科大学
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发文基金:
南京医科大学科技发展基金
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张维铭
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1篇
2011
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X射线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌细胞放射敏感性的影响
被引量:2
2011年
目的探讨X射线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌细胞放射敏感性的影响。方法针对STAT3mRNA序列,设计合成3对编码小于扰RNA(siRNA)的DNA模板寡核苷酸链(siRNAl、siRNA2和siRNA3),构建STAT3-siRNA阳性和阴性重组质粒,用以转染Eca-109细胞。Eca-109细胞分为5组:转染试剂对照组、阴性质粒对照组、重组质粒siRNAl实验组、siRNA2实验组和siRNA3实验组。细胞转染后48h,换用Gdl8培养液筛选21d,获得单个阳性克隆并扩增。分别用RT-PCR和Westernblotting检测细胞中的STAT3mRNA和蛋白表达。转染细胞分别接受0、2、4、6和8Gyx射线照射,平板克隆形成实验检测细胞存活分数,流式细胞仪检测经4GyX射线照射的细胞周期和凋亡。结果成功构建了STAT3-siRNA3重组质粒。RT·PCR和Westernblotting显示,siRNA3实验组的STAT3mRNA和蛋白表达显著少于2个对照组,而siRNAl和siRNA2实验组的STAT3mRNA和蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义。在2~8Gy剂量点,siRNA3实验组细胞存活分数均显著低于对照组(t=-0.228~-0.051,P〈0.05)。流式细胞仪分析显示,经4Gyx射线照射,siRNA3实验组G0/G,期细胞的百分率和细胞凋亡率均显著高于转染试剂对照组、阴性质粒对照组(t=-13.137~16.350,P〈0.01),4Gyx射线照射可引起细胞周期G0/G1期阻滞,诱导肿瘤细胞凋亡。结论STAT3-siRNA3能有效地抑制肿瘤细胞的STAT3mRNA和蛋白表达。4GyX射线照射联合STAT3-siRNA3可抑制人食管癌细胞增殖,引起细胞周期阻滞和凋亡,提高肿瘤细胞的放射敏感性。
赵环宇
张维铭
陈锦飞
关键词:
RNA干扰
STAT3基因
食管癌
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