中国博士后科学基金(20100470106)
- 作品数：16 被引量：75H指数：7
- 相关作者：李灵芝高宏生龚海英张岭张永亮更多>>
- 相关机构：武警后勤学院天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室武警后勤学院附属医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金天津市科委重点资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- microRNAs联合血清硅含量检测早期矽肺的指示意义被引量：2
- 2017年
- 【目的】探究3种体液microRNAs联合血清硅含量检测早期矽肺的指示意义。【方法】采用完全随机设计方法选取早期矽肺患者,并排除肺结核活期、哮喘、慢性阻塞性肺疾病等肺部急慢性疾病;选择年龄相近、没有基础疾病的健康人群作为对照组。通过人外周血淋巴细胞分离液分离外周血淋巴细胞,采用Exo Quick TM试剂盒提取人血清exosome,应用原子吸收法测定血清硅含量,应用RT-q PCR定量检测microRNAs表达水平,通过受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)判定microRNAs联合血清硅含量指示早期矽肺的灵敏度和特异度。【结果】矽肺各期次同对照组血清硅元素含量比较,对照组为(3.02±1.57)μg/ml,0+期矽肺组为(3.86±1.29)μg/ml,Ⅰ期矽肺组为(4.61±1.96)μg/ml,矽肺组相比正常组具有增高的趋势。矽肺患者血清、外周血淋巴细胞、血清exosome mi R-16-5p的相对表达量为(3.0105±1.2220)、(0.0321±0.0154)、(4.7309±1.1193),let-7d-5p相对表达量为(0.1652±0.0576)、(0.0049±0.0018)、(0.4026±0.1664)。血清硅联合血清microRNAs检测ROC曲线下面积比最大达到94.4%,敏感性为100%,特异度为66.7%;血清硅联合外周血淋巴细胞microRNAs检测的ROC曲线下面积比为77.8%,敏感性为83.3%,特异度为66.7%;血清硅联合血清exosome microRNAs检测曲线下面积比为77.8%,敏感性为83.3%,特异度为66.7%。【结论】血清硅联合血清mi R-16-5p、let-7d-5p检测具有较高的矽肺诊断指示意义。
- 彭悦任贵兵曾宪焕赵杨孟斌赵化冰杨震薛荣高宏生
- 关键词：矽肺MICRORNAS
- 蕨麻正丁醇部位下调缺氧内皮细胞HIF-1α及ET-1表达被引量：10
- 2015年
- [目的]探讨蕨麻正丁醇部位对内皮细胞缺氧损伤的保护机制。[方法]采用人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)建立缺氧损伤实验模型,实验设常氧对照组、缺氧模型组、高(3.00 g/L)、中(1.50 g/L)、低浓度(0.75 g/L)蕨麻正丁醇部位组,复方丹参(3.0 g/L)组。胎盘兰染色法测定各组细胞存活率;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)m RNA和内皮素-1(ET-1)m RNA表达,免疫细胞化学染色及Western Blot方法检测HIF-1α蛋白表达。放免法测定培养基中ET-1的活性。[结果]与对照组比较,缺氧模型组细胞存活率显著降低,HIF-1α和ET-1m RNA及蛋白表达增加(P<0.01);蕨麻正丁醇部位各剂量组与缺氧模型组比较,细胞存活率显著升高,高、中、低剂量蕨麻正丁醇部位组、复方丹参组细胞HIF-1α和ET-1 m RNA及蛋白水平显著降低(P<0.01)。[结论]在缺氧状态下,蕨麻正丁醇部位可能通过HIF-1α途径调控靶基因的表达,从而发挥保护作用。
- 杨硕张岭龚海英张永亮李灵芝高宏生
- 关键词：内皮细胞缺氧POTENTILLAINDUCIBLEENDOTHELIN-1
- 氯化钴缺氧处理对大鼠星形胶质细胞TFPI-2表达的影响
- 2017年
- 【目的】探讨氯化钴缺氧对大鼠星型胶质细胞TFPI-2基因表达的影响及其可能的调节机制。【方法】将大鼠星型胶质细胞分为对照组、化学缺氧组(加入终浓度为100μmol/L氯化钴培养24 h)。显微镜下观察细胞形态变化,MTT法检测细胞活性,RT-PCR法检测各组缺氧诱导因子-1α(hypoxia induced factor,HIF-1α)、组织因子途径抑制因子-2(tissue factor pathway inhibitor 2,TFPI-2)mRNA表达水平变化,Western blotting检测缺氧前后HIF-1α、TFPI-2、VEGF蛋白表达水平变化。【结果】MTT检测显示,氯化钴缺氧会降低细胞活性,且呈时间依赖性。在显微镜下可观察到细胞缺氧后胞体变小,突触缩短。氯化钴缺氧处理组细胞TFPI-2 mRNA水平显著高于对照组(P<0.05)。Western blotting显示与对照组相比,缺氧后细胞内HIF-1α、TFPI-2、VEGF蛋白表达水平均有显著升高(P<0.05)。【结论】氯化钴缺氧可以激活HIF-1/VEGF缺氧通路,增加SH-SY5Y细胞TFPI-2 mRNA和蛋白表达水平。
- 孙佳高宏生王毅铮任贵兵孟斌龚燕华李灵芝张永亮钟士江
- 关键词：缺氧诱导因子-1Α氯化钴组织因子途径抑制物-2
- 曲美他嗪对急性低压缺氧大鼠脑水肿的预防作用被引量：2
- 2012年
- 目的研究曲美他嗪(TMZ)对低压缺氧致大鼠脑组织水肿的预防作用。方法将72只雌性SD大鼠随机分为常氧对照组、低压缺氧模型组、尼莫地平(NIM)组和TMZ高、中、低剂量组,每组12只。除常氧对照组外,其他组均应用低压氧舱模拟海拔7 000 m高原、持续12 h建立高原缺氧模型。应用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察脑组织形态学变化;物理方法检测脑含水量;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测各组大鼠脑组织水通道蛋白-4(AQP-4)mRNA的表达;Western blot检测各组大鼠脑组织AQP-4蛋白水平。结果与低压缺氧模型组比较,HE染色显示:NIM组和TMZ各剂量组均可减轻大鼠低压缺氧造成的脑组织损伤,TMZ高剂量组最为显著;NIM组和TMZ各剂量组均可降低低压缺氧大鼠脑含水量,差异有统计学意义(P<0.05),TMZ高剂量组降低更为明显(P<0.01);NIM组和TMZ各剂量组均显著降低脑组织中AQP-4 mRNA及蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 TMZ对急性低压缺氧致大鼠脑水肿具有显著的预防作用,可显著减轻低压缺氧状态造成的大鼠脑组织损伤和脑水肿,其机制可能与其降低脑组织中AQP-4的表达水平有关。
- 李广策董培张岭李灵芝田军
- 关键词：曲美他嗪低压缺氧脑含水量苏木精-伊红染色
- 蕨麻正丁醇部位对急性低压缺氧小鼠的保护作用被引量：15
- 2011年
- 【目的】观察蕨麻正丁醇部位(n-butanol extract of Potentilla anserine L.,NP)对模拟高原缺氧损伤小鼠的保护作用。【方法】120只雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组、低压缺氧模型组、红景天组和NP高[0.3 g.(kg.d)-1]、中[0.15 g.(kg.d)-1]、低剂量[0.075 g.(kg.d)-1]组,每组20只。除正常对照组外,各组小鼠在密闭减压舱内,模拟海拔8 000 m维持缺氧18h。检测各组小鼠脑组织含水量,测定脑组织和血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)活性。并通过HE染色观察各组小鼠脑组织缺氧损伤的程度。【结果】与减压缺氧模型组比较,红景天组和高剂量NP可显著降低减压缺氧小鼠脑含水量(P<0.01或P<0.05),提高小鼠脑组织SOD活力(P<0.01或P<0.05),减少小鼠脑组织MDA的产生(P<0.01或P<0.05),提高小鼠血清SOD活力(P<0.01),减少小鼠血清MDA的产生(P<0.01或P<0.05),降低小鼠血清中CK活性(P<0.01或P<0.05)。HE染色显示,NP及红景天胶囊可减轻小鼠低压缺氧对脑组织的损伤。【结论】蕨麻正丁醇提取部位对模拟高原缺氧损伤具有显著的保护作用。
- 王鲁君张岭李灵芝吕琪董培
- 关键词：低压缺氧脑含水量丙二醛超氧化物歧化酶
- 急性高原缺氧大鼠肺组织损伤及其机制研究被引量：4
- 2013年
- 【目的】通过建立低压缺氧模型,模拟急性高原缺氧损伤,观察不同缺氧时间点大鼠肺组织损伤情况。【方法】选取清洁级雌性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、缺氧6、12及24 h组。利用数控低压缺氧舱,建立急性高原缺氧损伤模型,通过HE染色观察大鼠肺组织形态学改变,利用干湿比重法检测肺组织含水量,采用生化手段检测血清乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)及过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,应用Western blotting技术检测肺组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)1/4的表达情况。【结果】HE染色:正常对照组可见多边形或圆形薄壁囊泡,边界清楚,肺泡上皮细胞间为薄壁肺泡隔,隔内可见毛细血管断面,各低压缺氧组肺泡上皮细胞明显肿大,肺泡壁增厚,肺间隔内毛细血管扩张;与正常对照组相比,各缺氧组大鼠肺含水量显著升高(P<0.01),且随缺氧时间的延长而逐渐增高;与正常对照组相比,各缺氧组大鼠血清LDH活性显著升高(P<0.01),CAT活性显著下降(P<0.05或P<0.01);与正常对照组相比,各缺氧组大鼠肺组织中AQP1/4蛋白表达量均明显升高(P<0.01),且随缺氧时间的延长而逐渐增高。【结论】急性高原缺氧可造成实验大鼠肺水肿,且损伤程度与缺氧时间密切相关,其机制可能为上调水通道蛋白(AQP)1/4的表达所致。
- 祁玉婷郭鹏李建宇高宏生李灵芝
- 关键词：高原缺氧水通道蛋白1水通道蛋白4
- 曲美他嗪对急性低压缺氧大鼠心肌损伤的保护作用被引量：7
- 2012年
- 【目的】研究曲美他嗪(Trimetazidin,TMZ)对低压缺氧致大鼠心肌损伤的保护作用。【方法】将60只雄性SD大鼠随机分为常氧对照组、低压缺氧模型组、TMZ高、中、低剂量组分别给予20、10、5 mg/kg,每组12只。除常氧对照组外,其他组均应用低压氧舱模拟海拔7 000 m高原,持续12 h,建立高原缺氧模型。HE染色观察心肌组织形态学变化;比色法检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性;放免法检测血浆内皮素-1(ET-1)、心钠素(ANP)含量。【结果】与低压缺氧模型组比较,HE染色显示,各剂量TMZ均可减轻大鼠低压缺氧造成的心肌损伤,TMZ高、中、低剂量组均可显著降低低压缺氧小鼠血浆LDH活性(P<0.01,中、低剂量TMZ P<0.05),减少血浆中ET-1及ANP含量(P<0.01)。【结论】TMZ对急性低压缺氧大鼠心肌的损伤具有显著的保护作用。
- 李广策董培张岭李灵芝田军
- 关键词：曲美他嗪低压缺氧心肌损伤内皮素-1心钠素
- 急性高原缺氧大鼠脑皮质相关细胞因子变化及蕨麻的保护作用被引量：17
- 2012年
- 目的探讨模拟高原缺氧条件下大鼠脑皮质内细胞因子变化及蕨麻的保护作用。方法选择成年健康雄性SD大鼠54只，按随机数字表法分为平原组、模拟中海拔（3000m）组和模拟高海拔（7000m）组，后两组再分为缺氧12h和24h两个时间点，各时间点又分蕨麻组和对照组，每组6只。建立大鼠急性低压缺氧损伤模型；蕨麻组灌胃蕨麻提取物300mg／kg，对照组给予生理盐水。于各时间点处死大鼠，剥离脑组织，匀浆离心后取上清，采用悬浮芯片蛋白法测定单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素（IL-113、-6、-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ-干扰素（IFN-γ）及血管内皮生长因子（VEGF）含量。结果与平原组比较，模拟中、高海拔对照组各时间点MCP-1（ng／L）、IL-1β（ng／L）、IL-6（ng／L）、IL-10（ng／L）、TNF-α（ng／L）、IFN-γ（ng／L）及VEGF（ng／L）含量均显著升高，且上述各指标均随时间延长和海拔升高而升高，以模拟高海拔对照组24h升高最显著（MCP-1：199．69±16．67比164．32±11．84；IL-1β：83．32±9．90比17．05±5．60；IL-6：112．15±4．55比74．50±10．00；IL-10：129．49±16．28比68．11±10．26；TNF—α：106．29±13．05比54．54±6．97；IFN-γ：105．72±14．76比51．77±11．59；VEGF：227．95±26．84比80．28±23．76，均P〈0．01）。与同海拔对照组同期比较，模拟中、高海拔蕨麻组各时间点MCP-1、IL-1β、TNF—α、IFN-γ含量均明显降低（高海拔蕨麻24h组MCP-1：176．48±16．23比199．69±16．67；IL-1β：67．66±12．34比83．32±9．90；TNF-α：82．26±8．26比106．29±13．05；IFN-γ：83．29±9．84比105．72±14．76，均P〈0．05），IL-6、IL-10及VEGF含量均显著升高（高海拔蕨麻24h组IL-6：122．40±6．35比112．15±4．55；IL-10：150．66±11．18比129．49±16．28；VEGF：280．98±22．72比227．95±26．84，均P〈0．05）。�
- 唐琼琳高宏生刘丽华孙静王毅铮李灵芝陈虹张永亮赵国平
- 关键词：高原缺氧细胞因子
- 蕨麻对低压缺氧大鼠脑组织脑红蛋白表达的影响被引量：9
- 2013年
- [目的]建立大鼠高原低压缺氧模型,研究大鼠脑组织中脑红蛋白(Ngb)表达及蕨麻乙醇提取物干预的影响。[方法]将50只健康成年雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组、低压缺氧模型组、蕨麻乙醇提取物0.9、1.8和3.6 g/kg组,每组10只。分别按0.9、1.8和3.6 g/kg剂量将蕨麻乙醇提取物溶于1 mL 0.3%羧甲基纤维素钠溶液。每天于固定时间(8∶00)灌胃给药1次,正常对照组、低压缺氧模型组同时给予等体积0.3%羧甲基纤维素钠。连续灌胃14 d。各组大鼠在最后1次灌胃后1 h置于低压缺氧舱在海拔7 000 m低压缺氧12 h。缺氧结束后,用免疫组织化学方法检测Ngb在脑组织中的表达定位,用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR法)检测皮质Ngb mRNA水平,用West-ern blot方法检测皮质Ngb表达量。[结果]低压缺氧模型组大鼠皮质Ngb蛋白免疫反应阳性细胞数增加,胞浆、胞核均可见棕黄色颗粒状免疫反应阳性产物,海马各区未见Ngb表达;脑皮质表达Ngb mRNA及蛋白水平较对照组明显升高(P<0.01);与模型组相比,蕨麻乙醇提取物3.6 g/kg组大鼠脑皮质中Ngb mRNA及蛋白水平明显升高(P<0.01)。[结论]低压缺氧可刺激脑组织表达Ngb,蕨麻乙醇提取物在低压缺氧时可通过促进Ngb的表达,发挥脑保护作用。
- 张盈李灵芝杨虎龚海英张永亮
- 关键词：低压缺氧脑红蛋白
- 急性高原缺氧大鼠脑损伤及其水通道蛋白1／4的表达研究被引量：3
- 2012年
- 目的观察急性高原缺氧大鼠脑组织损伤及其水通道蛋白1，4（AQP1/4）的表达情况。方法将60只雌性SD大鼠按完全随机方法分为正常对照组及缺氧6、12、24h组，每组15只。利用数控低压舱建立急性高原缺氧模型。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠脑组织的损伤情况；用于湿差值法检测缺氧前后脑组织含水量的变化；采用酶学定量手段分析脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量；应用蛋白质免疫印迹法（western blotting）检测脑组织AQP1/4的表达情况。结果各缺氧组大鼠出现了不同程度的脑组织损伤，表现为细胞胞体缩小，核固缩、溶解，且损伤程度随缺氧时间延长逐渐加重。与正常对照组比较，各缺氧组大鼠脑含水量显著升高，SOD活性（U／mg）显著降低，MDA含量（nmol／mg）明显增加（P〈0．05或P〈0．01），且与缺氧时间呈依赖性；脑组织中AQP1/4蛋白表达量均显著升高（均P〈0．01），且随缺氧时间延长变化更显著[24h脑含水量：（84．32±2．14）％比（70．44±1.83）％，SOD：95．541±6．651比137．743±4．890，MDA：1．271±0．302比0．592±0．055，AQP1：0．879±0．035比0．443±0．025，AQP4：0．854±0．031比0．577±0．048，均P〈0．019。结论急性高原缺氧可造成脑水肿等严重的脑组织损伤，其机制可能与上调AQP1，4的表达有关。
- 李建宇祁玉婷郭鹏张永亮高宏生李灵芝
- 关键词：高原缺氧脑损伤脑水肿水通道蛋白1
