国家高技术研究发展计划(2004AA2Z3452)
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
- 相关作者：陈保文王国治徐苗苏城沈小兵更多>>
- 相关机构：中国药品生物制品检定所重庆医科大学附属第一医院中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ELISA检测抗荚膜组织胞浆菌抗体方法的建立被引量：6
- 2007年
- 目的建立检测小鼠血清中抗荚膜组织胞浆菌抗体的ELISA方法。方法制备荚膜组织胞浆菌(HC)抗原和结核分枝杆菌(MTB)抗原免疫小鼠,通过不同免疫次数获得不同效价的小鼠抗HC血清。以荚膜组织胞浆菌蛋白提取物(P-HTPM)为包被抗原,“方阵滴定法”确定包被抗原和抗血清的最适工作浓度,建立检测抗HC抗体ELISA法。结果HC抗原免疫小鼠3次获得4份低效价抗血清,平均A值为0.345,免疫4次获得8份高效价血清,平均A值为0.991。ELISA方法中包被抗原和抗血清的最佳工作浓度为1μg?孔及1∶1000。P-HTPM和TB-PPD与各自免疫血清均呈阳性反应,A值分别为0.993±0.216和1.606±0.263,但二者之间无交叉反应。结论本文建立的ELISA方法将成为荚膜组织胞浆菌病和结核病的一种鉴别诊断方法。
- 王璞陈保文罗永艾徐苗王国治
- 关键词：荚膜组织胞浆菌ELISA结核分枝杆菌
- 斑点免疫金渗滤法检测抗荚膜组织胞浆菌抗体的研究被引量：2
- 2007年
- 目的研究快速检测荚膜组织胞浆菌抗体的方法。方法荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)为包被抗原,以葡萄球菌A蛋白(SPA)标记的免疫胶体金为检测标记物,采用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测荚膜组织胞浆菌(HC)免疫小鼠血清中抗HC抗体以及其他真菌免疫血清中抗体。结果DIGFA检测20份HC小鼠免疫血清,结果全为阳性,与ELISA检测结果一致,敏感性为100%。检测8份正常小鼠血清出现1份假阳性,特异性为87.5%。检测其他真菌免疫血清结果为:念珠菌属和马尔尼菲青霉菌免疫血清结果全为阴性;8份皮炎芽生菌血清出现1份阳性,9份副球孢子菌血清出现2份阳性。结论斑点免疫金渗滤法检测抗HC抗体有较高的敏感性和特异性,快速简便。经临床标本扩大验证后将对荚膜组织胞浆菌病的快速诊断有应用价值。
- 王璞陈保文徐苗王国治
- 关键词：荚膜组织胞浆菌斑点免疫金渗滤法
- 荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物的制备被引量：4
- 2006年
- 目的研制荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物。方法采用液体表面膜培养方法培养荚膜组织胞浆菌,培养液经盐析和弱酸沉淀法纯化,再经透析和除菌,制成荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物原液,并进行豚鼠的皮肤反应试验和安全性检测。结果荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物的蛋白纯度达80%以上,其1μg/ml的浓度诱导的豚鼠皮肤反应与国外同类制品等效,且具有良好的安全性。结论荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物可作为体内诊断制品,用于检查人体荚膜组织胞浆菌的感染以及荚膜组织胞浆菌病的临床诊断。
- 陈保文沈小兵苏城王国治
- 关键词：纯蛋白衍生物皮肤反应
- P-HTPM对荚膜组织胞浆菌和不同分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验被引量：1
- 2008年
- 目的通过荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)对荚膜组织胞浆菌(HC)和不同分枝杆菌致敏豚鼠的皮肤试验,检测P-HTPM用于组织胞浆菌病(HP)和结核病鉴别诊断的特异性和敏感性。方法用结核分枝杆菌(MTB)和22种非结核分枝杆菌以及荚膜组织胞浆菌(HC)分别致敏豚鼠,经皮内注射结核杆菌纯蛋白衍生物(TB-PPD)、胞内分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD-B)、P-HTPM或国外同类产品HDS,检测P-HTPM的特异性;将P-HTPM原液分别稀释成1、2、4、8μg/ml,与HDS同时以轮圈法注射于经HC致敏的豚鼠,检测P-HTPM的敏感性;用MTB、MTB+HC和不同浓度的HC分别致敏豚鼠,再分别经皮内注射TB-PPD和P-HTPM,检测交叉反应性。结果P-HTPM与HDS对HC致敏的豚鼠均呈阳性反应,而对结核及其他分枝杆菌致敏的豚鼠均呈阴性反应;不同浓度的P-HTPM均可诱导HC致敏豚鼠的皮肤反应,并随P-HTPM浓度升高,皮肤反应强度略有增强,1μg/ml的P-HTPM即与HDS诱导的皮肤反应等效;TB-PPD及P-HTPM对自身抗原致敏的豚鼠均可诱导较强的皮肤反应,且明显强于MTB+HC混合抗原致敏豚鼠诱导的皮肤反应;TB-PPD对HC致敏的豚鼠个别呈弱阳性,但随HC致敏浓度的升高,其阳性率下降。结论P-HTPM用于HP和结核病的鉴别诊断具有较好的特异性和敏感性。
- 李凤祥徐苗陈保文沈小兵苏城王国治
- 关键词：荚膜组织胞浆菌纯蛋白衍生物特异性敏感性
- 组织胞浆菌病和结核病的实验室诊断被引量：3
- 2006年
- 陈保文王国治沈小兵苏城
- 关键词：组织胞浆菌病荚膜组织胞浆菌深部真菌病呼吸道传染细菌学检查无症状型
- 荚膜组织胞浆菌病诊断及与结核病鉴别诊断方法的实验研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨荚膜组织胞浆菌病(HP)诊断及其与结核病鉴别诊断的方法。方法提取荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM),以P-HTPM、荚膜组织胞浆菌素国外参考品和结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)为研究试剂,以荚膜组织胞浆菌和结核分枝杆菌免疫的豚鼠和小鼠及其血清为实验对象,采用皮肤试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析试验(GICA)3种方法进行HP诊断及与结核病鉴别诊断的研究。结果成功提取P-HTPM,蛋白纯度为85.8%;P-HTPM与国外参考品的皮肤反应结果一致(P>0.05),1 mg/L的P-HTPM与国外参考品等效,P-HTPM与TB-PPD对致敏豚鼠皮肤试验无交叉反应;包被P-HTPM的ELISA检测小鼠抗荚膜组织胞浆菌血清全为阳性,检测抗结核分枝杆菌血清和正常小鼠血清结果均为阴性(P<0.01);以P-HTPM抗原为检测线的GICA试纸条检测小鼠抗荚膜组织胞浆菌血清灵敏度为100%(14/14),特异度为93.8%(15/16)。结论以P-HTPM为抗原的动物皮肤试验、ELISA和GICA对HP的诊断及其与结核病的鉴别诊断有重要价值。
- 郭天芳王璞陈保文王国治罗永艾徐苗沈小兵苏城
- 关键词：荚膜组织胞浆菌病结核病诊断与鉴别诊断
