湛江市科技计划项目(2004003)
- 作品数:7 被引量:19H指数:3
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- β-淀粉样肽25-35诱导PC12细胞周期紊乱及其可能机制的研究
- 2012年
- 目的探讨β-淀粉样肽25-35(Aβ25-35)对PC12细胞周期及其相关基因表达的影响。方法 25μmol/LAβ25-35处理PC12细胞,用流式细胞术观察细胞周期变化,电泳观察凋亡条带,RT-PCR和Westernblot检测p21、CyclinD1、E2F1、pRb表达。结果 Aβ25-35处理后8h,PC12细胞S期明显增加(P<0.01),但16、24h逐渐降低(P<0.01);16h后细胞凋亡明显增加(P<0.01)。Aβ25-35处理4h后,p21mRNA和蛋白表达降低;CyclinD1、E2F1mRNA和CyclinD1、pRb蛋白表达增高(P<0.05)。结论 Aβ25-35诱导同步化的PC12细胞周期紊乱及凋亡,可能与下调p21表达和上调CyclinD1、pRb和E2F1表达有关。
- 谢朝阳祝其锋吴斌华陈小芳丁航
- 关键词:Β-淀粉样肽PC12细胞细胞周期凋亡
- 姜黄素影响Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制被引量:9
- 2009年
- 目的探讨姜黄素(curcum in,Cur)对β-淀粉样肽(25-35)[β-amyloidpeptide-(25-35),Aβ25-35]诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期异常与凋亡保护作用的可能机制。方法5μmol.L-1Cur预处理同步于G0期的PC12细胞,加入终浓度为25μmol.L-1Aβ25-35处理0~20h,用RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21、CDK4、E2F1、bax的表达。结果与Aβ25-35诱导组比较,Cur保护组p21mRNA和p21蛋白的表达增加;CDK4、E2F1、baxmRNA和CDK4、Bax蛋白的表达降低。结论Cur可能通过上调p21的表达,下调CDK4、E2F1、bax的表达,对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期异常与凋亡起保护作用。
- 谢朝阳祝其锋吴斌华
- 关键词:姜黄素CDK4E2F1
- 原花青素对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期紊乱的保护作用被引量:3
- 2009年
- 目的观察原花青素(PAC)对β-淀粉样肽(25-35)(Aβ25-35)诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期紊乱与凋亡的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用血清饥饿培养使PC12细胞同步于G0期,PAC预处理后加入Aβ25-35,通过流式细胞仪分析细胞周期与凋亡,RT-PCR和Western印迹从mRNA及蛋白水平检测p21、Cyclin D1、pRb和E2F1基因表达的变化。结果与Aβ25-35诱导组比较,PAC保护组S期细胞百分率明显减少,凋亡率明显降低(P<0.05);p21 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05),Cyclin D1、E2F1 mRNA和Cyclin D1、pRb蛋白表达降低(P<0.05)。结论PAC对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期紊乱与凋亡起保护作用,其机制可能与上调p21表达,下调Cyclin D1、pRb、E2F1表达有关。
- 谢朝阳梅寒芳祝其锋吴斌华陈小芳
- 关键词:原花青素AΒ25-35PCI2细胞细胞周期
- Aβ25-35诱导PC12细胞周期变化与凋亡的关系被引量:2
- 2008年
- 目的探讨β-淀粉样肽25—35(βamyloid peptide-25-35,Aβ25-35)诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化与凋亡的关系。方法用常规的去血清培养使细胞同步于G0期,采用终浓度为0-45μmol/L Aβ25-35处理PC12细胞24h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hoechst33258荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变;DNA电泳观察细胞凋亡时特异性梯状条带(DNA-Ladder);流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系。结果随着Aβ25-35剂量的增加,PC12细胞存活率降低(P〈0.01);用25μmol/L Aβ25-35处理PC12细胞12、24h,荧光染色结果显示24h出现典型的凋亡,表现为核固缩、核碎裂;DNA电泳结果显示凋亡特异性梯状条带;流式细胞仪分析表明去血清培养24h可使约90%PC12细胞停滞于G0/G1期,25μmol/L Aβ25-35诱导组8、16、24h与对照组比较,S期细胞比例增加(P〈0.01),16h后细胞凋亡率增加(P〈0.01),可见明显的亚二倍体峰(Ap峰)。结论Aβ25-35降低去血清培养的PC12细胞存活率,诱导同步化于G0/G1的PC12细胞重新进入细胞周期并随之出现凋亡,提示Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡可能与细胞周期紊乱有关。
- 谢朝阳梅寒芳祝其锋
- 关键词:PC12细胞细胞周期凋亡
- Aβ_(25-35)对PC12细胞周期及P21、CDK4、E2F1、BAX基因表达的影响被引量:2
- 2009年
- 目的观察β-淀粉样肽25-35(Aβ25-35)对体外血清饥饿培养PC12细胞周期及P21、CDK4、E2F1和BAX基因表达的影响。方法用终浓度为25μmol/L Aβ25-35诱导PC12细胞,流式细胞仪分析细胞周期的改变与凋亡的关系;RT—PCR和Western blot检测P21、CDK4、眨朋和BAX基因mRNA和蛋白表达。结果PC12细胞血清饥饿培养24h约90%停滞于G0/G1期;25μmol/L Aβ25-35诱导PC12细胞8、16和24h与对照组比较,S期细胞百分率增加(P〈0.01),16h后细胞凋亡率增加(P〈0.01),可见亚二倍体凋亡峰(Ap峰);25μmol/LAβ25-35诱导PC12细胞0—20h,P21mRNA和1921蛋白的表达下降;CDK4、E2F1、BAXmRNA和CDK4、BAX蛋白表达增高。结论Aβ25-35可诱导同步化于G0/G1的PC12细胞重新进入细胞周期并随之出现凋亡,其机制可能与下调P21mRNA和P21蛋白的表达,增加CDK4、盟肼、BAXmRNA和CDK4、BAX蛋白的表达有关。
- 谢朝阳祝其锋吴斌华
- 关键词:PC12细胞基因表达
- β-淀粉样肽(25-35)对PC12细胞Cyclin D1、CDK4、pRb、E2F1基因表达的影响被引量:1
- 2009年
- 目的观察β-淀粉样肽(25-35)〔β-amyloidpeptide(25-35),Aβ25-35〕对体外血清饥饿培养PC12细胞的CyclinD1、CDK4、pRb、E2F1基因表达的影响。方法用终浓度为25μmol/LAβ25-35处理PC12细胞,流式细胞仪检测分析细胞周期的改变,通过RT-PCR检测CyclinD1、CDK4、E2F1基因mRNA表达变化,Western印迹检测CyclinD1、CDK4、pRb蛋白表达的变化。结果流式细胞仪分析表明血清饥饿培养24h可使约90%PC12细胞停滞于G0/G1期,25μmol/LAβ25-35诱导组8、16、24h与对照组比较,S期百分率明显增加(P<0.01),16h后细胞凋亡率明显增加(P<0.01),可见明显的亚二倍体峰(Ap峰);Aβ25-35浓度诱导血清饥饿培养的PC12细胞0~20h,CyclinD1、CDK4、pRb、E2F1mRNA和蛋白表达增高。结论Aβ25-35诱导同步化于G0/G1的PC12细胞重新进入细胞周期,并阻滞于S期,同时出现凋亡,可能与增加CyclinD1、CDK4、pRb、E2F1mRNA和蛋白的表达有关。
- 谢朝阳祝其锋丁航
- 关键词:PC12细胞CDK4PRB基因表达