上海市科技兴农重点攻关项目(2010)
- 作品数：59 被引量：431H指数：11
- 相关作者：戴习林卓丽环刘永士施永海张根玉更多>>
- 相关机构：上海海洋大学上海市农业科学院东北林业大学更多>>
- 发文基金：上海市科技兴农重点攻关项目上海市教育委员会重点学科基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 百子莲CONSTANS同源基因的克隆及表达分析被引量：4
- 2014年
- 根据前期百子莲转录组测序分析的结果，获得了1个与光周期调控开花途径关键基因CONSTANS（CO）同源性较高的核心片段。采用cDNA末端快速扩增（RACE）方法得到了百子莲CO基因eDNA全长序列，命名为却COL，GenBank登录号为KF683287。序列分析表明，百子莲ApCOL基因eDNA全长1648bp，5’非编码区（5’UTR）和3’非编码区（3’UTR）分别为126和355bp，开放阅读框（ORF，127～1293bp）1167bp，编码388个氨基酸。ApCOL具有CO蛋白典型的结构域：氨基末端有2个B-box结构域，羧基末端有1个CCT保守结构域。氨基酸同源性比对发现，ApCOL与葡萄（XP_002274384．2）、可可（EOX99181．1）和大豆（NP001241023．1）等植物的CO蛋白有很高的相似性，同源性均在50％以上。系统进化树分析表明，ApCOL与小麦CO（EMS51329．1）聚类关系最近。实时荧光定量qRT-PCR结果表明：叶片中apCOL的表达量在花芽分化3个时期均高于花芽中的表达量，且叶片中的最高表达量和花芽中最低表达量均出现在花芽诱导期；在整个初花期内，各器官中却COL表达量由高到低依次是花梗、叶片、幼果、子房、花瓣、茎和花葶，花梗中表达量分别为叶片和茎中的2．68和114．3倍；不同光周期处理的叶片中ApCOL基因表达模式相近，均在暗处理时期呈现高表达。说明该基因的表达具有明显的时空差异性和生物钟调节特性，推测却COL在百子莲成花过程中以及花发育过程中发挥着一定的作用。
- 石玉波张荻申晓辉王玲卓丽环
- 关键词：百子莲克隆基因表达
- 氟啶脲对甜菜夜蛾生长繁殖的亚致死效应被引量：5
- 2013年
- 以LC_(10)、LC_(20)、LC_(20)和LC_(40)系列亚致死浓度的氟啶脲处理甜菜夜蛾2龄幼虫,研究其对甜菜夜蛾生长繁殖的影响。结果表明:氟啶脲对幼虫化蛹有明显抑制作用,随着氟啶脲浓度升高化蛹率降低,LC_(40)处理后的化蛹率仅为对照组的37.44%;亚致死浓度的氟啶脲可导致畸蛹率和成虫畸形率增加;亚致死浓度的氟啶脲对幼虫历期、蛹重、蛹期和羽化率等指标的影响不显著,并且性别间无明显差异。在繁殖性能方面,产卵前期随氟啶脲亚致死浓度升高而延长,LC_(40)处理组产卵前期为2.75 d;总产卵量随氟啶脲亚致死浓度升高而减少,LC_(40)处理组的总产卵量仅为对照组的42.78%;卵的孵化率随氟啶脲亚致死浓度的升高而降低,但无显著差异;产卵天数也随着亚致死浓度升高而缩短,对照组和LC_(20)、LC_(30)、LC_(40)处理组之间存在显著差异。
- 张天澍章巧利习育艺袁永达滕海媛王冬生
- 关键词：甜菜夜蛾氟啶脲亚致死效应
- 分散液相微萃取/超高效液相色谱-串联质谱法检测猪尿中盐酸赛庚啶残留量的研究被引量：11
- 2013年
- 建立了猪尿中盐酸赛庚啶残留量的分散液相微萃取(DLLME)/超高效液相色谱-串联质谱内标检测法。将5 mL猪尿用5%氨水调节至pH 11.0,以三氯甲烷为萃取剂,异丙醇为分散剂,配比为5∶3,组成微萃取体系共2 mL进行分散液相微萃取,4℃下以8 000 r/min高速离心5 min后获得提取液,在50℃下氮气吹干后,经1 mL 0.1%甲酸-乙腈(80∶20)溶解后使用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱检测,以盐酸二苯拉林(Diphenylpyraline,DPP)为内标,正离子电喷雾下多反应监测模式进行分析。结果显示,标准品溶液在0.5～25μg/L范围内线性关系良好(r=0.999 5),方法的检出限为0.05μg/L,定量下限为0.1μg/L。尿样在0.1～5.0μg/L加标范围内的回收率为90.2%～109.7%,RSD不高于8.5%,表明该方法具有较好的准确度与精密度。
- 吴剑平张鑫顾欣李丹妮严凤周悦榕
- 关键词：盐酸赛庚啶超高效液相色谱-串联质谱法内标法分散液相微萃取
- 不同加温装置对冬季黄瓜育苗和生长的影响被引量：15
- 2012年
- 利用加温线和发热膜进行了冬季黄瓜育苗和栽培试验。结果表明,温控相同条件下,加温线的耗电量大于发热膜,发热膜苗床上的基质温度首先达到温控最高点,且一天中变化幅度较平稳。发热膜苗床上春秋王、沪杂3号、沪杂6号黄瓜品种幼苗的下胚轴长、子叶长和宽都大于加温线苗床上的幼苗。定植后的3个处理中,植株叶长、叶宽、叶片数、株高和单株产量表现为发热膜处理>发热膜+小环棚处理>加温线处理。因此利用发热膜进行冬季茄果类育苗,不仅省电而且加热能力和保温效果好。
- 张红梅金海军丁小涛余纪柱
- 关键词：黄瓜
- 黄瓜靶斑病菌致病性鉴定及药剂筛选被引量：8
- 2016年
- 采用喷雾接种的方法,对来自上海、山东、辽宁和广东等地黄瓜上分离的9个靶斑病菌(Corynespora cassiicola)菌株在黄瓜不同品种上的致病性进行了鉴定;并通过测定菌丝生长速率和田间试验,对常用杀菌剂进行了活性与防效的评价。结果表明:来源于不同地区的菌株对黄瓜的致病力存在差异,但未发现致病力的分化。10个主栽黄瓜品种对黄瓜靶斑病的抗性差异明显,其中‘碧玉'抗性最强,而‘春五'‘申青一号'的抗性较差。室内活性及室外药效试验结果表明,430 g/L戊唑醇悬浮剂、45%咪鲜胺乳油对黄瓜靶斑病有较好的防治效果。
- 徐丽慧高士刚曾蓉戴富明
- 关键词：黄瓜靶斑病药剂防治
- 野生及养殖哈氏仿对虾肌肉营养成分的分析与比较被引量：47
- 2013年
- 为了解哈氏仿对虾肌肉的营养特征,采用生化分析手段对野生及养殖哈氏仿对虾肌肉进行营养成分分析并对营养品质进行分析与比较。结果显示,野生群体肌肉中水分和粗蛋白含量(分别为79.42%和17.94%)与养殖群体(分别为79.28%和17.95%)没有显著差异;野生群体的粗脂肪含量(0.89%)显著低于养殖群体(1.12%),而粗灰分含量(1.44%)显著高于养殖群体(1.31%)。在18种检测出的氨基酸中,有9种氨基酸的含量,野生群体比养殖群体显著低,另外9种在两群体间没有差异。野生群体的氨基酸总量(TAA)、必需氨基酸(EAA)、非必需氨基酸(NEAA)、鲜味氨基酸(DAA)、虾味氨基酸(SAA)含量(分别为83.42%、29.69%、43.59%、32.54%和21.11%)均比养殖群体(分别为88.08%、30.53%、47.39%、34.47%和21.72%)显著低;野生群体的必需氨基酸指数(EAAI)和支链氨基酸与芳香族氨基酸的比值(F值)(分别为66.41和2.07)也明显低于养殖群体(分别为69.10和2.12)。野生群体的饱和脂肪酸(∑SFA)和多不饱和脂肪酸(∑PUFA)(分别为41.95%和39.51%)相对百分含量比养殖群体(分别为39.60%和36.64%)均明显高,而野生群体的单不饱和脂肪酸∑MUFA(18.54%)相对百分含量比养殖群体(23.76%)明显低;野生群体肌肉中油脂的EPA+DHA相对百分含量(28.23%)比养殖群体(25.66%)明显高,但在野生和养殖群体间肌肉中的EPA+DHA绝对含量没有明显差异。研究表明,哈氏仿对虾肌肉营养价值较高、肉味鲜美,人工养殖没有造成其肌肉脂肪的大量富集和脂肪酸组成及含量的急剧变化,相反使该虾的蛋白质营养价值更高。
- 施永海张根玉刘永士陆根海严银龙谢永德徐嘉波刘建忠
- 关键词：哈氏仿对虾肌肉营养成分脂肪酸
- 三重PCR检测黄瓜靶斑病菌、炭疽病菌和细菌性角斑病菌被引量：2
- 2016年
- 【目的】开发一种可同时检测黄瓜靶斑病菌(Corynespora cassiicola)、黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)和黄瓜细菌性角斑病菌(Pseudomonas syringae pv.lachrymans)的三重PCR快速检测方法。【方法】根据ITS或16S r DNA序列分别设计黄瓜靶斑病原菌、黄瓜炭疽病菌和黄瓜细菌性角斑病菌特异性检测引物;通过鉴定引物的特异性,筛选可在目标菌株中扩增出特异片段的特异引物;选择可以组合的3种病原菌特异性引物进行三重PCR,对引物浓度、退火温度、延伸时间和循环数分别进行优化,优化三重PCR体系。【结果】针对黄瓜靶斑病菌、黄瓜炭疽病菌和黄瓜细菌性角斑病菌分别设计出5对、7对和6对特异性引物,其中引物CC4F/CC4R和CC5F/CC5R可特异扩增黄瓜靶斑病菌ITS,引物CL1F/CL1R、CL2F/CL2R、CL3F/CL3R、CL3F/CL4R、CL3F/CL5R、CL3F/CL6R和CL3F/CL7R可特异扩增黄瓜炭疽病菌ITS,引物PS3F/PS4R和PS4F/PS4R可特异扩增黄瓜细菌性角斑病菌16S rDNA。引物CC5F/CC5R、CL3F/5R和PS3F/4R扩增片段长度分别为370、275和698 bp,其混合扩增产物可在3%琼脂糖凝胶上得到充分分离,这3对引物选择作为三重PCR引物。在三重PCR反应体系中,当引物CC5F/CC5R、CL3F/5R和PS3F/4R的终浓度分别为0.16、0.4和0.16μmol·L^(-1)时,3个目的片段能同时得到有效扩增;当退火温度大于65℃时,部分目的片段不能有效扩增。最终建立并验证了适合上述3种黄瓜主要病原菌的三重PCR检测体系,即25μL PCR反应体系中含有12.5μL 2×Hiff^(TM) PCR Master Mix(With Dye)、0.16μmol·L^(-1) CC5F/CC5R、0.4μmol·L^(-1) CL3F/CL5R、0.16μmol·L^(-1) PS3F/PS4R。反应程序:95℃预变性3 min;95℃变性30 s,65℃退火30s,72℃延伸2 min,35个循环;最后72℃延伸10 min。【结论】建立的三重PCR方法能够快速检测田间采集的黄瓜发病叶片中的黄瓜靶斑病菌、黄瓜炭疽病菌和黄瓜细菌性角斑病菌,灵敏度均可达到0.4 pg·μL^(-1)。
- 高士刚曾蓉徐丽慧罗金燕陈磊戴富明
- 关键词：黄瓜炭疽病菌三重PCR
- 表面等离子共振技术在食品安全检测中的应用被引量：1
- 2013年
- 本文简单介绍了表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR),以及罗列综述了近几年来表面等离子共振技术在食品微生物、药物残留、过敏原、添加剂以及海洋生物毒素检测中的应用。并对SPR技术在食品安全领域的应用进行了展望。
- 赵静陶宁萍卢瑛刘源丛健
- 关键词：食品安全生物传感器
- 3种蔬菜及浮植方式对虾池水体的净化效果被引量：9
- 2012年
- 以对虾养殖池水为培植水,采用3种浮植方式水培水芹、水蕹菜和生菜,通过对蔬菜的生长、氮磷的吸收及对虾池水化学状况的比较,探讨3种蔬菜对虾池水的净化效果以及适合水培蔬菜的浮植方式,以解决养殖期间虾池水体氮磷积累的问题。结果表明,水蕹菜日增重量与吸收氮磷能力显著高于水芹与生菜,且存活率最高。3种蔬菜对虾池水水质均有净化效果,其中水蕹菜效果最为明显,20 d后种植水蕹菜的水体中总氨氮、硝态氮、总氮、总磷以及化学需氧量分别下降55.0%、78.6%、52.6%、44.2%和41.3%,水芹次之。3种浮植方式对水芹和水蕹菜生物量的增加和氮磷的吸收无显著影响,生菜则以浮板种植最佳。研究认为,在3种蔬菜中水蕹菜对虾池水体的适应性强,是较为适宜在对虾池塘中种植的蔬菜,绳结式浮植方式为其在虾池中种植的适宜方式,结合上海地区对虾生产,建议在虾池早期按500 kg/hm2种植水蕹菜,能吸收利用未被利用的50%的输入氮。
- 戴习林郭印钱辉仁胡伟国陈薇
- 关键词：蔬菜水质净化对虾
- 淞江鲈HSP70基因cDNA部分序列克隆及其组织表达差异被引量：1
- 2013年
- 为了研究HSP70(heat shock protein 70)是否可作为淞江鲈(Trachidermus fasciatus Heckel)养殖中的应激监测分子指标,根据鲤鱼热应激蛋白70基因序列(AYl20894)设计并合成引物,以淞江鲈肝脏组织总RNA为模板,获得淞江鲈HSP70基因cDNA部分序列,长度为480bp,GenBank登陆号为KC342053.序列分析结果显示此序列与红笛鲷(Lutjanus sanguineus)等有较高的同源性.同时,应用所获淞江鲈HSP70基因部分序列,以淞江鲈β-actin基因的序列(HM449124)为内参,利用荧光定量PCR技术,检测淞江鲈肌肉、肠、脑、皮肤、性腺、肝脏、心脏、鳃、鳍9个组织的表达差异.结果表明,HSP70在淞江鲈9个组织中普遍表达,其中在鳍中表达量最高,在性腺、鳃、脑、肌肉、肝脏、皮肤、肠中的表达量依次递减,在心脏中表达量最低.在鳍中HSP70的表达量可能成为衡量淞江鲈应激程度的指标.
- 刘庆全罗武松郑映荷许耀高峰秦志浩倪雯雯王金秋
- 关键词：热应激蛋白70克隆荧光定量
