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16S-23S rRNA基因间区在快速鉴定病原菌中的应用进展被引量：2: 2009年; 分子诊断的方法因具有高度敏感性和特异性,在快速鉴定病原菌中起着越来越重要的作用。16S-23S rRNA间区因存在序列和长度的变异为病原菌的基因诊断提供了一个有力工具。本文就其结构特点和在病原菌鉴定中的应用作一综述。; 刘春江府伟灵夏涵黄君富; 关键词：基因 RRNA 病原临床实验室技术

采用通用引物PCR与机器码识别技术快速鉴定血液感染病原菌: 2009年; 目的建立一种快速检测血液感染病原菌的方法。方法选取7种常见血液感染病原菌,在其16SrRNA末端和23S rRNA始端的保守区设计通用引物,对16S-23S rRNA基因间区进行扩增,然后将PCR产物的电泳图谱进行机器码识别,以鉴定病原菌。结果通用引物能扩增出7种病原菌,且每种菌具有不同片段长度(bp):大肠埃希菌(716、808),金黄色葡萄球菌(732、827),铜绿假单胞菌(833),表皮葡萄球菌(630、722、817),肺炎链球菌(606),肺炎克雷伯菌(550、705、797),粪肠球菌(591、693);此图谱可经机器码识别,对各种病原菌进行快速鉴定。结论采用通用引物PCR和机器码识别技术可简便、快速、特异地鉴定常见血液感染病原菌。; 刘春江黄君富黄庆夏涵潘虹蔡晋府伟灵; 关键词：通用引物 PCR 机器码血液感染病原菌

利用毛细管电泳-单链构象多态性快速鉴定血液感染病原菌的研究: 2010年; 目的研究毛细管-单链构象多态性(capillary electrophoresis-single strand conformation polymorphism,CE-SSCP)分析技术鉴定血液感染病原菌的可行性,并建立一种快速检测病原菌的新方法。方法选取7种常见血液感染病原菌,在其16S rRNA的保守区设计通用引物,对16S rRNA基因进行扩增,然后将PCR产物进行CE-SSCP分析,依靠CE-SSCP图谱来鉴定病原菌。结果通用引物能够扩增出7种病原菌;CE-SSCP分析后每种菌具有不同出峰时间:大肠杆菌(3999);金黄色葡萄球菌(4082);铜绿假单胞菌(3958);表皮葡萄球菌(4063);肺炎链球菌(4055);肺炎克雷伯菌(3980);粪肠球菌(4166)。结论采用毛细管电泳-单链构象多态性分析技术可简便、快速地鉴定常见血液感染病原菌。; 刘春江黄君富夏涵张晓莉王珏潘虹府伟灵; 关键词：毛细管电泳单链构象多态性通用引物 PCR 血液感染

新型纳米金界面压电石英晶体DNA传感器的实验研究被引量：3: 2008年; 目的构建一种新型纳米金界面压电石英晶体DNA传感器,探讨纳米金界面上进行寡核苷酸探针固定的最佳条件。方法构建纳米金颗粒修饰的石英晶振生物反应界面,进行巯基修饰的寡核苷酸探针的固定,对纳米金自组装pH值条件、探针固定浓度等影响因素进行实验研究;将构建的传感器和未经纳米金颗粒修饰的传感器用于铜绿假单胞菌检测,比较两种传感器的响应性能,并进一步对该纳米金界面压电石英晶体DNA传感器的再生进行研究。结果纳米金自组装的最佳pH值为6.0,探针最佳固定浓度为3.0μmol/L。纳米金颗粒修饰的石英晶振的响应性能大于未经修饰的石英晶振,可以重复使用5次。结论纳米金界面压电石英晶体DNA传感器,具有不需标记、操作简单、能实时在线检测、频率响应性能高、无污染和能重复使用等优点,在临床实验诊断方面应用前景广阔。; 夏涵黄君富姚春艳王丰陈鸣黄庆蔡国儒府伟灵; 关键词：石英晶体微天平纳米金探针生物传感器

漏声表面波生物传感器不同检测方法的实验研究被引量：5: 2008年; 目的构建双通道漏声表面波生物传感器液相检测技术平台。方法以人乳头状瘤病毒为检测对象,传感器检测系统运用相位、频率及延迟线3种检测方法对其进行实时检测;利用扫描隧道显微镜观察传感器裸金表面、固定巯基化探针以及核酸杂交后的金膜表面结构的微观变化。结果相位和频率两种检测方法较好;扫描隧道显微镜下可以看到裸金膜表面金原子排列有序;探针分子分布密度增加;杂交后寡核酸分子密度更为密集。结论成功构建了漏声表面波生物传感器液相检测技术平台并运用多种检测方法;扫描隧道显微镜可以形象直观地对传感器金膜表面、核酸杂交进行直接观察,结果进一步证实了实验结论的正确性。; 王云霞陈鸣姚春艳丁毅施建峰曹亮刘俊康徐启旺府伟灵; 关键词：传感器延迟线相位

Self-assembled germanium nano-structures by laser-assisted oxidation被引量：8: 2006年; 黄伟其刘杨荣

毛细管电泳-单链构象多态性分析技术: 2009年; 毛细管电泳-单链构象多态性分析技术(CE-SSCP)是进行基因突变分析、细菌鉴定、抗菌活性分析、单核苷酸多态性(SNP)分型和mRNA定量的强有力工具。近些年来,随着分子生物学技术的不断发展,其应用也愈加广泛。本文就该技术的基本原理及影响参数,如筛分介质、检测器、温度、缓冲液组成及pH值等进行了综述,并对其应用作了简要介绍。; 刘春江夏涵黄君富府伟灵; 关键词：毛细管电泳单链构象多态性分析基因突变分析细菌鉴定

纳米金型压电石英DNA传感器的电化学阻抗谱研究被引量：1: 2010年; 目的采用电化学阻抗谱法表征所构建的纳米金型压电石英DNA传感器。方法采用构建的三电极系统,分别于空白石英晶振、探针固定后、6-巯基己醇封闭后、靶序列杂交后交流阻抗谱、纳米金磁微粒信号放大后对石英晶振表面进行交流阻抗谱分析,同时观察传感器的频率响应情况。结果进行纳米金磁微粒信号放大后,频率变化值为(127.5±6.8)Hz,与靶序列杂交、阴性对照和空白对照频率变化值差异有统计学意义(P<0.01),构建的三电极系统可成功检测石英晶振表面电化学变化,并且在检测过程中的各步骤,电子转移阻抗Ret均发生了明显增加(P<0.01),压电频率变化趋势与电化学阻抗变化趋势一致。结论电化学阻抗谱法可无损性地分析晶振表面膜层变化,验证了建立的压电石英DNA传感器检测方法和纳米金信号放大方法的真实性和有效性。; 夏涵王丰黄庆府伟灵黄君富; 关键词：石英晶体微天平传感器电化学阻抗谱

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国家自然科学基金(30672004)