国家自然科学基金(30970262)
- 作品数：4 被引量：25H指数：2
- 相关作者：梁焯龚阳敏万霞江木兰郭兵更多>>
- 相关机构：中国农业科学院油料作物研究所中华人民共和国农业部华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 三角褐指藻LPAAT基因在酵母中表达对脂肪酸的影响被引量：6
- 2012年
- 从三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)中克隆到1 632bp的溶血磷脂酸酰基转移酶(LPAAT)全长cDNA,其中包含的开放阅读框被命名为PtLPAAT。在毕赤酵母中异源表达PtLPAAT基因,诱导培养45h时随机选取的3个酵母转化子总脂肪酸含量分别提高了2.68%、11.14%、31.28%;诱导培养72h时同样的转化子总脂肪酸含量分别提高11.59%、18.72%、46.63%。用薄层层析法分离诱导培养48h后的酵母菌体的甘油三酯,并用气相色谱法测定其脂肪酸,结果显示:与非转基因对照菌株相比,其油酸提高了0.9倍、亚油酸提高了5倍。用荧光定量PCR检测发现PtLPAAT基因的表达量随三角褐指藻油脂不断积累逐渐升高。表明在酵母中表达PtLPAAT基因不仅能够明显地提高其脂肪酸含量,而且还能选择性结合不饱和脂肪酸到甘油三酯中。
- 张军平江木兰龚阳敏万霞梁焯黄凤洪
- 关键词：三角褐指藻转基因毕赤酵母油脂含量脂肪酸组成
- 橘林油脂酵母发酵条件的初步研究被引量：2
- 2012年
- 以橘林油脂酵母(Lipomyces kononenkoae CICC1714)为实验材料,通过设计单因素实验,确定了摇瓶发酵培养的最佳产油条件为:氮源为硫酸铵,碳源为葡萄糖,培养温度28℃,接种量10%,初始pH值为7.0,最适碳氮比为99。优化后批次发酵的生物量为7.01g/L,油脂含量15.91%,油脂产量1.12g/L。经半连续发酵后最终的生物量为24.13g/L,油脂产量为3.06g/L。
- 张东辉梁焯万霞龚阳敏江木兰
- 关键词：单因素实验发酵条件微生物油脂
- 光强和温度对球等鞭金藻(Isochrysis sphaerica)生长及其脂肪酸的影响被引量：17
- 2011年
- 本研究测定了光照强度为16～58μmol/(m2.s)和15～30℃条件下球等鞭金藻(Isochrysis sphaerica)的生长曲线以及脂肪酸组成和含量。结果表明,在设置的光照强度范围内,光照强度越强,微藻的生长速度越快。光强对各种脂肪酸的含量影响有差异,过低和过高都不利于藻体内多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acids,PU-FAs)的积累。当光强为24μmol/(m2.s)时二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA,C22∶6 n-3)的积累量最高,占总脂肪酸的11.77%。球等鞭金藻的最适生长温度在20～25℃之间,低温条件有利于不饱和脂肪酸的积累。光强20μmol/(m2.s)、温度20℃条件下总不饱和脂肪酸(Total Unsaturated Fatty Acids,TUFAs)含量最高,达64.99%;同样的光强,温度15℃条件下DHA占总脂肪酸的12.19%。可见适宜的光强和温度是利用球等鞭金藻收获PUFAs的关键。
- 郭兵龚阳敏万霞梁焯江木兰
- 关键词：光照强度温度球等鞭金藻多不饱和脂肪酸
- 载有磷酸甘油激酶基因启动子的新表达载体的构建以及在发酵性丝孢酵母中启动外源基因的表达研究(英文)
- 2012年
- 利用简并PCR技术从一株丝孢酵母(Trichosporon sp.)中克隆到磷酸甘油激酶基因的部分序列,然后利用染色体步移的方法克隆到了已知片段的上游序列约950bp。通过启动子序列分析软件分析,发现序列中含有启动子所需的必须元件如TATA BOX和CAAT BOX等,因此确定克隆到的基因片段含有启动子序列。将潮霉素基因置于该启动子下构建了丝孢酵母整合型表达载体pTFPH,并转化发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans),转化后的酵母能够在含有潮霉素的抗性选择性平板长出,而未进行转化的对照菌株则不能生长。以上试验证明:丝孢酵母的磷酸甘油激酶基因启动子具有启动异源基因在发酵性丝孢酵母中表达的功能,这个结果为油脂酵母工程菌的构建和开发新的酵母表达宿主奠定了基础。
- 王萍江木兰张银波万霞梁焯龚阳敏
- 关键词：简并PCR染色体步移
