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湖南省医药卫生科研计划课题(B2005292)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
江刚
戴爱国
胡瑞成
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相关机构:
湖南省人民医院
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发文基金:
湖南省医药卫生科研计划课题
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1篇
湖南省人民医...
作者
1篇
胡瑞成
1篇
戴爱国
1篇
江刚
传媒
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中国医师杂志
年份
1篇
2010
共
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P13K/Akt—Nrf2信号通路调节大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达的研究
被引量:1
2010年
目的观察香烟烟雾提取物(CSE)通过磷酯酰肌醇-3-激酶(PBK)/Akt—Nrf2(Nuclearfactor—E2relatedfactor)信号通路对大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的影响。方法用浓度为10%的CSE对体外原代培养的大鼠气道上皮细胞进行不同时间处理及使用P13K特异抑制剂LY294002进行干预。观察CSE在不同的时间及使用LY294002干预后对Nrt2的核转位及γ-GCS的影响,用细胞免疫化学、流式术、免疫荧光及Westernblot方法检测Nrf2、p-Akt及γ-GCS的表达水平;用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测γ-GCSmRNA的表达水平;检测还原型谷胱甘肽(GSH)的含量及γ-GCS的活性。结果暴露CSE后1h,GSH含量明显低于对照组,在暴露CSE后3h和6h,GSH含量明显增高。Nrf2蛋白质在对照组主要表达在胞浆,其蛋白质表达增强,而在CSE1h、CSE3h和CSE6h组主要在胞核中表达,其蛋白质表达增强。p-Akt蛋白质在暴露CSE后1h增强,3h最强,6h减弱。p-Akt阳性细胞百分比变化趋势与其蛋白质变化趋势相同。γ—GCSmRNA和蛋白质在CSE1h、CSE3h、CSE6h组表达逐渐增强。γ—GCS活性在CSE1h、CSE3h、CSE6h组逐渐增强。预先使用LY292002,p-Akt阳性细胞百分比及蛋白质表达明显弱于CSE3h组,Nrf2胞浆蛋白质表达增强,胞核表达减弱,吖-GCSmRNA、蛋白质和活性及GSH含量均明显低于CSE3h组。相关性分析显示Nri2与γ-GCS、γ-GCS活性呈正相关(r=0.81,0.77,P〈0.05),p-AM与γ-GCS、γ-GCS活性、GSH及Nrf2呈正相关(r=0.373,0.44,0.63,0.56,P〈0.05)。结论P13K/Akt信号通路可能参与Nrf2核转位及其对抗氧化基因γ-GCS的调控。
江刚
戴爱国
胡瑞成
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