广东省科技攻关计划(2003A20403)
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
- 相关作者：廖明程珏益任涛辛朝安江经纬更多>>
- 相关机构：华南农业大学广东出入境检验检疫局惠州出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划国家农业科技成果转化资金项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达被引量：5
- 2005年
- 利用RT-PCR扩增了2株H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并将其克隆到pMD 18-T载体上,进行序列分析。结果显示,这2株禽流感病毒NS1基因核苷酸序列的同源性为70.2%,分别属于NS等位基因群A和等位基因群B。再将克隆的NS1基因插入到pET-28a质粒中构建原核表达载体,将其转化到DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞中,经双酶切鉴定及序列分析,表明获得了重组质粒pET-52NS1和pET-174NS1。经SDS-PAGE分析,重组质粒转化BL21(DE3)(pLysS)感受态细胞后,经IPTG诱导,获得了分子质量约为30 ku的NS1融合蛋白。用AIV多克隆血清做Western-blotting分析,发现来自2个等位基因群的NS1蛋白都具有较好的抗原活性。
- 刘仁陆周佩娇朱事康任涛戴应基李炳清曹伟胜罗卓军程珏益郑世萍廖明
- 关键词：禽流感病毒H5N1亚型NS1基因克隆
- 猪流感病毒的分离鉴定及毒力检测被引量：15
- 2007年
- 程珏益徐军徐成刚张海梁任涛罗开健辛朝安江经纬廖明
- 关键词：猪流感病毒A型流感病毒呼吸道传染病正粘病毒科生物学特性
- 一株猪流感病毒HA、NA基因的扩增、克隆及序列分析
- 利用自行设计的引物,通过RT-PCR方法扩增出本实验室分离到的一株H3N2亚型猪流感病毒(简称SGD2)HA、NA基因,然后分别将其克隆到pMD 18-T载体中。氨基酸序列分析发现HA、NA有多个位点与所比较的序列不同,...
- 张海梁曹伟胜徐成刚任涛张桂红罗开健辛朝安廖明
- 文献传递
- 猪流感病毒的分离鉴定及毒力检测
- 本研究从广东省两个发生呼吸道病的猪场送检的病料和棉签拭子中分离到两株病毒,经初步鉴定为SIV。病毒纯化后进行HA及NA亚型的鉴定,结果两株病毒均为H3N2亚型毒株,分别命名为A/Swine/Guangdong/1/200...
- 程珏益张海梁徐成刚任涛徐军罗开健辛朝安廖明
- 文献传递
- 口蹄疫病毒R株致弱前后的基因变异研究
- 2010年
- 为研究口蹄疫病毒(FMDV)致弱前后基因组变化的关系,本研究根据GenBank上发表的口蹄疫病毒全基因序列数,设计了8对引物,采用RT-PCR方法分别扩增出FMDVR株及其致弱毒株(R304)编码区的8段基因,将各片段克隆至pMD18-T载体,并进行序列测定。比较和分析编码区各个基因(LP、VP4、VP2、VP3、VP1、2A、2B、2C、3A、3B、3C、3D)的核苷酸序列和氨基酸序列的变异。结果表明,R株和R304株基因组区全长均为6966nt,编码2322个氨基酸,致弱后共有110个核苷酸发生变化,编码氨基酸有32个发生变化;其中3A基因的氨基酸序列变化最大,其次为LP和VP1,而2A和2C的氨基酸未发生变异。该研究对口蹄疫病毒的抗原和毒力研究有重要的参考价值。
- 贺东生林小敏苏丹萍罗满林林绍荣
- 关键词：口蹄疫病毒减毒基因
