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结核分枝杆菌早期分泌抗原ESAT-6的高效表达及其在结核分枝杆菌特异性细胞免疫检测中的应用被引量：7: 2009年; 目的获得纯化的MTB早期分泌抗原ESAT-6，并对其抗原性及在MTB特异性细胞免疫检测中的应用价值进行评价。方法采用基因工程技术表达MTBESAT-6蛋白，通过Western blot法分析ESAT-6与特异性抗体的反应性。以纯化ESAT-6为抗原，用酶联免疫斑点技术（Elispot）检测肺结核患者、健康医务工作者、自然村居民外周血γ-干扰素的应答水平，同时与用于隐性结核感染及结核病诊断的QFT-G检测法进行平行比较，对其在MTB感染细胞免疫检测中的应用价值进行评价。结果成功表达和纯化了ESAT-6重组蛋白，所表达的蛋白能被特异性抗ESAT-6抗体识别，同时与肺结核外周血单核细胞反应，刺激后者产生γ-干扰素。Elispot技术检测肺结核患者、健康医务工作者、自然村居民的阳性率分别为36／49（73．5％）、11／62（17．7％）、17／194（8．8％），同时用QFT-G法对肺结核患者和健康医务工作者进行检测阳性率分别为38／49（77．6％）、14／58（24．1％），两种检测方法比较敏感度（73．5％，77．6％；X^2=0．381，P〉0．05）和特异度（82．3％，75．9％；X^2=0．406，P〉0．05），差异无统计学意义。结论利用pET原核表达系统可成功地表达和纯化MTBESAT-6重组蛋白，以ESAT-6为抗原建立的Elispot外周血IFN-γ检测技术与QFT-G的特异性和敏感性相当，可用于结核病的辅助诊断。; 张晶刘威龙周伯平张明霞杨倩婷朱秀云陆坚邓群益陈心春; 关键词：分枝杆菌结核抗原酶联免疫吸附测定

原发性颈淋巴结结核的治疗体会及Elispot技术的诊断价值被引量：4: 2009年; 目的探讨原发性颈淋巴结结核的各种治疗方法的优缺点及评价酶联免疫斑点（Elispot）检测外周血中结核分枝杆菌性抗原特异性γ干扰素水平在颈淋巴结结核中的诊断价值。方法回顾分析89例原发性颈淋巴结结核患者的临床资料，30例（A组）采用内科治疗（化疗1～1．5年），28例（B组）行肿块全部切除加区域性颈淋巴结清扫术，16例（C组）行淋巴结结核病灶切除术，15例（D组）行病灶切开刮除、开放引流术，所有手术患者术后均化疗1年。用Elispot技术对患者外周血中产生结核菌抗原特异性γ干扰素的水平进行定量检测，同时检测患者的结核抗体。结果 A组中22例肿块继续增大并增多（73．3％），其中9例形成脓肿破溃；B组无一例复发；C组5例复发（31．3％）；D组3例形成结核性窦道，4例再发淋巴结肿块（46．7％）；保守治疗和手术治疗复发率比较有明显统计学差异（χ^2=9．69，P〈0．01），保守治疗复发率明显升高；三种手术方式复发率比较也有明显统计学差异（χ^2=14．47，P〈0．01），此4组患者手术愈合时间有统计学差异（F=104．44，P〈0．01），B组患者手术愈合时间最短，复发率最低；Elispot、结核抗体检测患者的阳性率分别是87．6％、62．9％（χ^2=14．61，P〈0．01）。结论原发性颈淋巴结结核的治疗应以手术为主，手术治疗能缩短治疗时间，减少药物用量及不良反应，能明显提高治愈率，降低复发率，而手术方式首选肿块全部切除加区域性颈淋巴结清扫术；Elispot技术优于结核抗体，可用于颈淋巴结结核的辅助诊断。; 黄华乐晓华陈心春李红春; 关键词：结核淋巴结颈部酶联免疫斑点结核抗体

结核病患者外周血和胸水中TLR2配体活性的测定: 2010年; 目的通过观察结核病患者外周血和胸水中IL-8的水平,检测TLR2配体的活性,探讨TLR2在结核病发病中的作用。方法选取肺结核(PTB)患者45例,结核性胸膜炎(TP)患者25例,健康对照(HD)38例,采用ELISA法分别检测血浆和胸水中IL-8含量,并用HEK293-hTLR2细胞株检测血浆和胸水中TLR2配体的活性。结果发现IL-8在结核病患者的胸水中水平明显升高(P<0.001),而且结核病人中的血浆和胸水TLR2配体的活性也高于健康者(P<0.05)。结论结核病患者感染部位TLR2配体活性及IL-8明显升高,对局部炎症细胞的浸润有重要意义,同时可作为结核病诊断的辅助手段。; 陈涛张明霞邓群益朱秀云蔡雄茂李国保付向东陈心春; 关键词：结核 TOLL样受体2 IL-8

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广东省自然科学基金(7008514)

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