天津市应用基础与前沿技术研究计划(06YFJZJC02100)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 相关作者：李明春张峻邢来君朱玥明魏东盛更多>>
- 相关机构：南开大学天津市农业科学院更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划国家大学生创新性实验计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 利用定点突变分析海藻糖合酶的功能被引量：6
- 2009年
- 我们通过对来自红色亚栖热菌(Meiothermus ruber)CBS-01中的海藻糖合酶(Trehalose synthase)序列比对及三维模型构建,我们构建了D200G/H165R,R227C,R392A三个定点突变体,检测其对麦芽糖及海藻糖的转化能力。结果发现:在50°C时,D200G/H165R、R392A基本失去其原有活性,而R227C产生海藻糖的能力降低。37°C时,D200G/H165R失去转化能力,而R392A及R227C保有部分能力。因此我们推测,R392位点可能是维持酶的结构及热稳定性的关键位点,而D200位点在反应过程中也起重要作用。
- 王宇凡朱玥明魏东盛张峻邢来君李明春
- 关键词：海藻糖合酶定点突变
- 红色亚栖热菌TPS/TPP海藻糖合成途径中相关基因的克隆、表达及功能鉴定
- 2009年
- 通过构建红色亚栖热菌(Meiothermus ruberCBS-01)的基因组DNA文库,克隆得到该嗜热菌海藻糖合成途径中的磷酸海藻糖合成酶(TPS)和磷酸海藻糖磷酸酯酶(TPP)基因。以pET21a为表达载体,将磷酸海藻糖合成酶和磷酸海藻糖磷酸酯酶在大肠杆菌中进行表达并纯化,利用薄层层析的方法验证了这两个酶的活性。同时,本研究检测了红色亚栖热菌在各种环境压力下细胞内含物成分的变化情况,发现在高渗环境压力的诱导下,该菌会在胞内积累大量的6-磷酸海藻糖,而并非海藻糖,这为进一步研究TPS/TPP和TreS途径在细胞体内的作用奠定了基础。
- 朱玥明唐亦辰徐恒毅张娟魏东盛邢来君李明春
- 关键词：海藻糖
- 海藻糖合酶的分子生物学研究进展被引量：11
- 2009年
- 海藻糖合酶能够将麦芽糖转化为海藻糖,在海藻糖的工业生产中具有十分重要的意义。本文从海藻糖合酶的基因克隆、基因工程应用、结构和催化机制的研究以及其在微生物体内的功能等方面讨论了海藻糖合酶的研究进展。
- 朱玥明张峻邢来君李明春
- 关键词：海藻糖海藻糖合酶C端结构域代谢途径
- 海藻糖合酶基因工程菌的高密度发酵策略
- 2009年
- 探讨海藻糖合酶基因工程菌高密度发酵过程中的一些影响因素,为海藻糖合酶基因工程菌实现工业化生产提供理论依据。
- 陈颖张峻李明春齐欣唐柳
- 关键词：海藻糖合酶基因工程菌高密度发酵
- 海藻糖合酶基因工程菌诱导表达条件的研究被引量：3
- 2009年
- 实验将构建后的重组质粒pET21TreS转入大肠杆菌Rosetta gami(DE3)中,得到海藻糖合酶基因工程菌,并通过对培养时间、温度及诱导剂浓度等条件的优化,对其进行诱导表达,得到了该基因工程菌诱导表达的最适条件:发酵培养至菌体浓度(OD600)至0.6～0.8时,以1mmol/L浓度的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG),37℃,诱导2h后得到的蛋白表达量较高。
- 陈颖朱月明张峻李明春齐欣唐柳
- 关键词：海藻糖合酶基因工程菌
