湖南省科技重大专项(2007FJ1003)
- 作品数:34 被引量:311H指数:11
- 相关作者:余兴龙李润成贺建华黄兴国葛猛更多>>
- 相关机构:湖南农业大学军事医学科学院山西农业大学更多>>
- 发文基金:湖南省科技重大专项湖南省教育厅重点项目湖南省科技厅项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 快速鉴定猪肉和牛肉多重PCR方法的建立及初步应用被引量:9
- 2011年
- 建立了快速有效地鉴定猪肉和牛肉的多重PCR方法。根据GenBankTM登陆的猪和牛的线粒体基因序列设计特异性引物,通过PCR条件优化建立起多重PCR方法,并评价该方法的敏感性和特异性。结果表明,该多重PCR方法能特异性扩增到目的大小的牛和猪线粒体基因片段;该方法不能扩增羊、鸡、狗等8种常见动物线粒体基因组片段;该方法最低能检测到牛DNA9.8×101fg/μ L和猪DNA6.7×101fg/μ L;能检测出市场上猪肉和牛肉商品中的假冒产品。该方法具有高度的特异性和敏感性,能够快速鉴别检测猪肉和牛肉商品。
- 李杰乔绪稳余兴龙李润成肖朝庭刘国华蒋大良
- 关键词:多重PCR牛肉猪肉
- 酵母天蚕素基因表达产物的抗菌活性研究
- 昆虫抗菌肽是由细胞中核糖体合成的一类碱性多肽,它具有分子量小、热稳定性和水溶性好、不易被酶水解、无免疫原性等特点,具有广谱抗菌活性和抑杀耐药菌株等优点,对真菌、原虫、肿瘤细胞及病毒亦有抑杀作用。20世纪70年代由瑞典科学...
- 肖淦文罗振福李俊波易学武谯士彦贺建华范志勇
- 关键词:天蚕素抗菌肽抗菌活性
- 文献传递
- 不同植酸酶对生长育肥猪生产性能及养分利用的影响被引量:13
- 2010年
- 选择"杜×长×大"三元杂交生长猪54头,研究了大肠杆菌、黑曲霉来源植酸酶替代日粮中部分磷酸氢钙对生长育肥猪生长性能、养分消化率、血液生化指标及粪磷、氮排泄的影响。试验猪随机分成对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组,每组3个重复。对照组饲喂常规日粮,试验Ⅰ组饲喂低磷+植酸酶Ⅰ的日粮,试验Ⅱ组饲喂低磷+植酸酶Ⅱ的日粮。试验结果表明,在生长育肥猪日粮中添加植酸酶替代部分磷酸氢钙,改善了生长育肥猪生长性能,其中添加大肠杆菌植酸酶显著改善生长育肥猪的生长性能;显著改善了干物质、粗蛋白质、钙、磷、总能的表观消化率,并显著降低了粪中氮、磷的排泄;显著提高了血清中总蛋白、球蛋白、血清磷的浓度,而尿素氮、血清钙浓度显著降低。添加黑曲霉植酸酶后,血糖浓度下降,而碱性磷酸酶的活性无显著变化;添加大肠杆菌植酸酶后,碱性磷酸酶的活性显著降低,而血糖浓度无显著变化。
- 刘自逵黄兴国刘文敏贺建华
- 关键词:生长猪植酸酶表观消化率血液生化指标
- 猪血红蛋白的酶解及氨基酸含量的研究被引量:9
- 2008年
- 猪血是一种营养价值高而价格低廉的蛋白质资源。猪血中含有丰富的蛋白质,其中血红蛋白占主要部分。因此,对血红蛋白及其水解产物的研究受到了国内外众多学者的关注。为选出适合于水解猪血红蛋白的蛋白酶,笔者采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶对猪血进行单酶和复合酶水解试验,确定碱性蛋白酶为水解猪血的适用酶。通过质谱仪测定,碱性蛋白酶酶解产物分子量集中在800~2400道尔顿,而800~1260道尔顿区间占主要部分;经全自动氨基酸分析仪测出其产物含有17种氨基酸,其中含8种必需氨基酸,必需氨基酸占总氨基酸量的50.93%,说明碱性蛋白酶酶解产物是制作食品和饲料添加剂的理想资源。
- 董清平方俊蒋红梅卢向阳
- 关键词:猪血血红蛋白酶解
- 副猪嗜血杆菌外膜蛋白D15基因的原核表达及其表达产物的免疫原性被引量:7
- 2010年
- 根据GenBank中登录的副猪嗜血杆菌(HPS)D15基因鸟枪序列(登录号:NZ_ABKM01000005)设计1对特异性引物,以HPS5型SP毒株DNA为模板,通过PCR方法扩增了D15基因。将其进行T-A克隆,构建pMD18D15质粒并进行序列测定和分析。结果表明,D15基因含有一个2418bp的开放阅读框,编码805个氨基酸,与D15基因参考序列的同源性为99.9%。该HPSD15基因的推导氨基酸序列具有典型Omp85蛋白家族的拓扑结构特征。以pMD18D15质粒为模板,用PCR方法扩增HPSD15基因,并将其克隆到pET-28a(+)中,构建pETD15原核表达质粒,将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3)后,用IPTG诱导重组菌,并用SDS-PAGE和Western-blot检测诱导物。结果表明,pETD15重组表达质粒在大肠杆菌中实现了高效表达,融合蛋白的分子质量约为94ku,融合蛋白能被HPS阳性血清识别,提示该融合蛋白具有反应原性。昆明小鼠和豚鼠免疫试验结果表明,D15重组蛋白具有一定的诱导免疫保护反应的能力。
- 朱小宁余兴龙盛益颖李润成罗维葛猛刘俊奇刘春红肖利军将大良
- 关键词:副猪嗜血杆菌外膜蛋白原核表达免疫原性
- 低聚木糖的生理功能及在动物生产中的应用被引量:11
- 2008年
- 彭伟黄兴国
- 关键词:低聚木糖动物生产生理功能功能性添加剂饲料添加剂畜牧生产
- 微生态制剂对猪生产性能及粪中微生物的影响被引量:30
- 2009年
- 选用84头20 kg左右的生长猪,随机分为两个组,每个组3个重复,每重复14头。对照组饲喂添加抗生素200 mg/kg的日粮,试验组饲喂添加0.1%微生态制剂的日粮,试验期为28 d。试验结果表明,与对照组相比较,试验组生长猪的平均日采食量和平均日增重有增加的趋势(P>0.05),平均料肉比降低了0.34(P>0.05),腹泻率降低了4.94%(P<0.01);在提高生长猪日粮养分消化率方面,微生态制剂具有与抗生素相同的作用(P>0.05);粪样中的大肠杆菌数量显著降低(P<0.05),同时粪样中乳酸菌和双歧杆菌数量都有升高的趋势(P>0.05)。
- 黄兴国杨承剑王超黄璜贺建华
- 关键词:微生态制剂生长猪养分消化率
- 生猪产业的饲料安全与控制技术
- 猪肉产业是我国的传统优势产业,2008年我国猪肉产量4620.5万吨,约占世界总产量的46%,中国人均消费猪肉约15~20千克,约占肉类消费的75%。因此,猪肉制品的安全控制具有十分重要的意义。而饲料的安全控制是猪肉产品...
- 范志勇贺建华陈永辉彭艺伍小松
- 文献传递
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病RT-PCR快速鉴别诊断方法的建立与临床应用被引量:18
- 2008年
- 根据高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因的缺失信息,设计了3条特异性引物,以含高致病性PRRSVNsp2基因的质粒pMDNSP2及普通PRRSVVR2332株RNA为模板,建立了快速诊断高致病性PRRSVRT-PCR方法。通过对临床组织病料的总RNA进行不同稀释倍数检测,结果表明该方法能从0.265pg的总RNA中检测到PRRSV的基因,说明敏感性高。用该方法对猪瘟病毒(CSFV)、Ⅱ型圆环病毒(PCV-2)、伪狂犬病病毒(PRV)、链球菌(Streptococcus)、副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis)和大肠杆菌(Escherichiacoli)同条件检测,结果都为阴性。进一步对36份疑似高致病性PRRSV临床组织病料细胞培养物、2株PRRSV商品活疫苗以及52个猪场所送检的184份临床样品进行了检测应用,结果36份疑似高致病性PRRSV临床组织病料的细胞培养物有5份样品为阳性且都为高致病性PRRSV,2株PRRSV商品活疫苗为普通PRRSV,52个猪场中有42个猪场(123份样品)呈阳性,其中只有1份为普通PRRSV。实验表明该方法能够准确地鉴别诊断高致病性PRRSV和普通PRRSV,且具有快速、敏感和特异的特点,具有临床实用性。
- 刘忠华余兴龙李润成黄泽彬廖立珊白霞李晶向卫军汪镇南丁建
- O型口蹄疫病毒VP1基因与大肠杆菌不耐热肠毒素LTB基因的融合表达及表达产物的免疫原性分析被引量:1
- 2009年
- 以质粒pMDTLT为模板、用PCR的方法扩增出LTB基因,然后将其插入到pETVP1质粒中VP1基因的上游,构建了含有融合基因LTBVP1的表达质粒pETLTBVP1。转化宿主菌BL21(DE3)LysS后进行诱导表达,诱导菌经SDS-PAGE显示重组蛋白以包涵体的形式表达,分子量约为39kD;Western blotting分析表明,重组蛋白能与FMDV阳性血清及兔抗霍乱毒素(CT)血清反应,说明融合蛋白保持了LTB和VP1各自的免疫学活性。小鼠免疫实验表明:该融合蛋白通过腹腔接种小鼠能诱导产生较强的免疫应答反应,免疫鼠产生的血清抗体水平高于试验中商品口蹄疫疫苗免疫组。
- 李润成余兴龙白霞向卫军葛猛黎满香
- 关键词:口蹄疫病毒VP1基因LTB基因抗体效价